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番鸭细小病毒与鹅细小病毒PCR鉴别诊断方法的建立 被引量:33
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作者 刘家森 姜骞 +3 位作者 司昌德 韩凌霞 曲连东 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期469-472,共4页
根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞... 根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)的病毒培养物及其核酸进行扩增。结果,引物MDPVF1/R1仅特异性扩增出MDPV的900 bp核酸片段,引物GPVF1/R1仅特异性扩增出GPV的465 bp核酸片段。表明,建立的PCR方法可用于GPV和MDPV的鉴别诊断。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 鹅细小病毒 聚合酶链式反应 鉴别诊断
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鸭肝炎病毒Ⅰ型VP3基因的克隆及原核表达 被引量:11
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作者 刘家森 +5 位作者 姜骞 孟庆文 韩凌霞 司昌德 刘娣 曲连东 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期587-590,共4页
参照鸭肝炎病毒Ⅰ型(DHV-Ⅰ)的基因组序列设计并合成了1对引物。通过RT-PCR方法扩增获得了DHV-Ⅰ病毒161/79/V结构蛋白VP3基因,并将VP3基因片段插入pGEX-6p-1表达载体,转化E.coli Rosetta-gami(DE3)pLysS。SDS-PAGE分析表明,经用0.1mmol... 参照鸭肝炎病毒Ⅰ型(DHV-Ⅰ)的基因组序列设计并合成了1对引物。通过RT-PCR方法扩增获得了DHV-Ⅰ病毒161/79/V结构蛋白VP3基因,并将VP3基因片段插入pGEX-6p-1表达载体,转化E.coli Rosetta-gami(DE3)pLysS。SDS-PAGE分析表明,经用0.1mmol/LIPTG于16℃诱导表达后,菌体裂解产物有特异的、分子质量约52ku的目的蛋白条带。Western-blotting检测表明,表达产物与DHV-Ⅰ阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒Ⅰ型 VP3基因 克隆 原核表达
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3株鸭肝炎病毒Ⅰ型结构基因VP1的克隆及序列分析 被引量:10
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作者 刘家森 +6 位作者 姜骞 郭东春 司昌德 孟庆文 韩凌霞 刘娣 曲连东 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期952-957,共6页
通过RT-PCR方法扩增鸭肝炎病毒DHV-1:161/79/V、YH、HN株的VP1基因的核苷酸序列。系统发育分析表明,3株病毒与已发表的DHV-1结构基因VP1核苷酸和氨基酸的同源性分别为92.7%~96.9%和95.4%~96.6%,与DHV-1变异株核苷酸和氨基酸序列的相似... 通过RT-PCR方法扩增鸭肝炎病毒DHV-1:161/79/V、YH、HN株的VP1基因的核苷酸序列。系统发育分析表明,3株病毒与已发表的DHV-1结构基因VP1核苷酸和氨基酸的同源性分别为92.7%~96.9%和95.4%~96.6%,与DHV-1变异株核苷酸和氨基酸序列的相似性均分别低于75%和88%,表明3株病毒属于DHV-1,与变异株是不同的血清型。强毒DHV-1:161/79/V的VP1蛋白第49和第183位氨基酸为T和H,弱毒DHV-1:YH、HN为S和Q,推测这2处位点的改变可能与病毒的强弱有关 DHV-1和其变异株的VP1蛋白均没有保守的RGD序列 变异株N-DHV:90D、04G在第50和51位比DHV-1多2个氨基酸(Q和D),在第147和185位各缺失1个氨基酸(E和L),而在变异株DHV:AP-03337、AP-04009、AP-04114、AP-04203的第145和146位比DHV-1多了2个氨基酸(G、G) 不同血清型的鸭肝炎病毒在46-64位、95-149位、180-223位抗原指数差别较大,推测这些位点的改变可能影响病毒的生物学特性。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒(DHV) VP1基因 序列分析
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培养细胞污染支原体的PCR检测方法的建立及应用 被引量:10
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作者 王银银 +3 位作者 任芳丽 张旭 田硕 张诚 《中国医药生物技术》 CSCD 2011年第4期295-298,共4页
在生物制剂的生产和研发领域,细胞培养扮演着极其重要的角色:用原代细胞或传代细胞制造疫苗;杂交瘤细胞制造单克隆抗体;基因工程或细胞生物学的研究等。然而支原体污染常常成为细胞培养的不速之客,严重影响着细胞及生物制剂的质量... 在生物制剂的生产和研发领域,细胞培养扮演着极其重要的角色:用原代细胞或传代细胞制造疫苗;杂交瘤细胞制造单克隆抗体;基因工程或细胞生物学的研究等。然而支原体污染常常成为细胞培养的不速之客,严重影响着细胞及生物制剂的质量。污染细胞最常见的支原体包括: 展开更多
关键词 污染支原体 培养细胞 PCR检测方法 应用 生物制剂 细胞培养 单克隆抗体 杂交瘤细胞
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鸭肝炎病毒Ⅰ型结构基因vp1的原核表达及其抗原性分析 被引量:4
5
作者 刘家森 +4 位作者 姜骞 孟庆文 韩凌霞 司昌德 曲连东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期618-621,共4页
通过RT-PCR方法克隆出DHV-1:161/79/V结构蛋白vp1基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中,测序结果为714bp。vp1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+),获得重组质粒pET-VP1,转入E.coli Rosetta-gami(DE3) pLysS,经IPTG诱... 通过RT-PCR方法克隆出DHV-1:161/79/V结构蛋白vp1基因片段,将其克隆到pMD18-T载体中,测序结果为714bp。vp1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,亚克隆到原核表达载体pET-32a(+),获得重组质粒pET-VP1,转入E.coli Rosetta-gami(DE3) pLysS,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果表明在大肠杆菌中表达了1个相对分子量约为47ku的融合蛋白(Trx-His-VP1),将此融合蛋白用His-Ni+亲和层析法进行纯化。Western blot分析表明,Trx-His-VP1能与DHV-1阳性血清发生特异性反应,说明表达的结构蛋白VP1具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒Ⅰ型 VP1基因 原核表达
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Ⅰ型鸭肝炎病毒的研究进展 被引量:2
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作者 张宇辉 +4 位作者 刘家森 姜骞 司昌德 曲连东 黄鹤 《畜牧兽医科技信息》 2008年第9期10-11,共2页
鸭病毒性肝炎是鸭的五大传染病之一,由于近年鸭肝炎(Ⅰ型)发病率的不断上升,以及变异株的不断出现,养鸭比较集中的地区都遭受了巨大的经济损失和严重的威胁。随着病毒基因组的测序的完成,为该病毒的研究有了一些新的认识和思路。本文从... 鸭病毒性肝炎是鸭的五大传染病之一,由于近年鸭肝炎(Ⅰ型)发病率的不断上升,以及变异株的不断出现,养鸭比较集中的地区都遭受了巨大的经济损失和严重的威胁。随着病毒基因组的测序的完成,为该病毒的研究有了一些新的认识和思路。本文从病毒的流行病学、基因组结构和功能以及病毒的检测方法等方面,阐述了DHV-I的最新研究进展,为该病的防治提供理论基础。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭病毒性肝炎 Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV—Ⅰ) 防治措施 病毒基因组
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雷珠单抗的临床应用进展 被引量:4
7
作者 朱红雨 连治国 +3 位作者 杨仲璠 徐明波 童玥 《当代医药论丛》 2018年第3期32-35,共4页
年龄相关性黄斑变性(AMD)患者多为老年人,其生活质量可受到严重的影响。雷珠单抗是由Ferrara等人研发的血管生成抑制剂。自从雷珠单抗被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗新生血管型AMD后,医学人员针对此药开展了很多的临床研究。本... 年龄相关性黄斑变性(AMD)患者多为老年人,其生活质量可受到严重的影响。雷珠单抗是由Ferrara等人研发的血管生成抑制剂。自从雷珠单抗被美国食品药品管理局(FDA)批准用于治疗新生血管型AMD后,医学人员针对此药开展了很多的临床研究。本文对雷珠单抗给药方案的发展、光动力疗法联合雷珠单抗治疗AMD的可行性、雷珠单抗的个体化用药方案及关于此药临床应用效果与临床试验效果之间的差异等方面进行综述。 展开更多
关键词 黄斑变性 雷珠单抗 给药方案 联合疗法 个体化治疗
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藏一条清溪——《在心里藏一条清溪》读后感
8
作者 《美文(青春写作)》 2018年第9期44-45,共2页
一尘不染,一物不藏,一身清白。——李汉荣我曾经读到过一篇文章,写了一位卖花的老人。有一个片段至今仍像裹着月光的花香一般,萦绕心尖。有人问起老人卖花的原因,老太太绵绵地笑着,然后用浅浅的吴侬软语说:"今生卖花,来世漂亮。"
关键词 拾荒者
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老腔的颜色
9
作者 《美文(青春写作)》 2018年第9期45-46,共2页
老腔的颜色,就是黄土高原的颜色,是每一个陕西人的颜色。曾在老家听过一场民间艺人的老腔表演,极简陋:小小的戏台子与我一般高;又极淳朴:老人们吐出的丝缕烟雾,裹住旧锣上的红绸,烟雾之中,与人闲谈间,老腔已开场。一声嘶哑苍劲的怒吼... 老腔的颜色,就是黄土高原的颜色,是每一个陕西人的颜色。曾在老家听过一场民间艺人的老腔表演,极简陋:小小的戏台子与我一般高;又极淳朴:老人们吐出的丝缕烟雾,裹住旧锣上的红绸,烟雾之中,与人闲谈间,老腔已开场。一声嘶哑苍劲的怒吼突然在我耳畔炸开,四散燃烧在黄土地上。 展开更多
关键词 陕西人
原文传递
那年·那人
10
作者 《美文(青春写作)》 2018年第9期46-47,共2页
雨停了。夜色在水汽里氤氲起来,笔下的字仿佛也变得柔软而湿润。插上耳机,循环播放那首《儿时》:"我们就一天天长大,听磁带偶遇榕树下,白衬衫黄昏木吉他,年少不经事的脸颊……"思绪忽然飞得很远,流转在七岁那年的那片屋顶上……七岁... 雨停了。夜色在水汽里氤氲起来,笔下的字仿佛也变得柔软而湿润。插上耳机,循环播放那首《儿时》:"我们就一天天长大,听磁带偶遇榕树下,白衬衫黄昏木吉他,年少不经事的脸颊……"思绪忽然飞得很远,流转在七岁那年的那片屋顶上……七岁的我比同龄的女孩子野得多,衣衫上总是斑驳的泥点子,腿上总是一块一块的擦伤与淤青。 展开更多
关键词 中学生 作文 语文学习 阅读知识
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生命如海——梁衡散文《把栏杆拍遍》读后感
11
作者 《美文(青春写作)》 2018年第9期47-48,共2页
我不大喜欢从书店买来的书里自带的书签,上面带着各种小广告或者二维码。我喜欢自制书签,不同性格的书,一定要搭不同性格的书签,比如张爱玲的《半生缘》里,夹着一片风干了但依旧美艳的玫瑰花。最有趣的,是汪曾祺先生那本《人间有至味》... 我不大喜欢从书店买来的书里自带的书签,上面带着各种小广告或者二维码。我喜欢自制书签,不同性格的书,一定要搭不同性格的书签,比如张爱玲的《半生缘》里,夹着一片风干了但依旧美艳的玫瑰花。最有趣的,是汪曾祺先生那本《人间有至味》(专写美食)的书签。 展开更多
关键词 把栏杆拍遍
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初中生活第一课
12
作者 《中华活页文选(初一)》 2017年第3期93-94,共2页
“起立!跑步走!”口令员充满气势的声音响起,全班同学“唰”地起身,跑步人场。“准备了这么久,这次武术操比赛,拿一等奖没问题!”我自信满满地思索。想起平日训练时同学们整齐划一的动作、雄壮有力的口号、不停滴落的汗水,现在站... “起立!跑步走!”口令员充满气势的声音响起,全班同学“唰”地起身,跑步人场。“准备了这么久,这次武术操比赛,拿一等奖没问题!”我自信满满地思索。想起平日训练时同学们整齐划一的动作、雄壮有力的口号、不停滴落的汗水,现在站在赛场上,心里也是一番别样的感受。 展开更多
关键词 生活 初中 跑步
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鸭病毒性肝炎的流行与防制措施
13
作者 李爽 《养殖技术顾问》 2009年第2期114-115,共2页
鸭病毒性肝炎(DVH)是由鸭肝炎病毒(DHV)在雏鸭间引起的一种传播迅速、高度致死性的传染病,简称鸭肝炎。临床表现为雏鸭运动失调,死后呈现角弓反张,并以肝脏肿大及出血为主要病变特征。
关键词 鸭病毒性肝炎 防制措施 鸭肝炎病毒 运动失调 临床表现 病变特征 传染病 致死性
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重组胰岛素原在毕赤酵母中高效分泌表达的研究
14
作者 梁果义 +1 位作者 刘晓航 蔡祥胜 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期226-230,共5页
为了提高胰岛素在酵母的分泌表达效率,首先合成了胰岛素原基因,并在其序列的N端引入了一段引导肽,构建成p PICZα-A-Pro-INS重组分泌型表达载体。将表达载体线性化处理后电击转化毕赤酵母GSll5感受态细胞,筛选获得分泌型高表达工程菌株... 为了提高胰岛素在酵母的分泌表达效率,首先合成了胰岛素原基因,并在其序列的N端引入了一段引导肽,构建成p PICZα-A-Pro-INS重组分泌型表达载体。将表达载体线性化处理后电击转化毕赤酵母GSll5感受态细胞,筛选获得分泌型高表达工程菌株,重组蛋白的表达水平为300 mg/L,占分泌总蛋白的40%左右。该结果表达明引导肽的存在对于在毕赤酵母中高效表达胰岛素的基因至关重要。 展开更多
关键词 胰岛素 毕赤酵母 高效表达 引导肽
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肉鸡马立克氏病的流行病学、临床表现、诊断及防控措施 被引量:2
15
作者 《现代畜牧科技》 2017年第11期89-89,共1页
马立克氏病是目前流行较广泛的一种病毒性传染疾病,根据侵害的部位不同分为神经型、内脏型、眼型和皮肤型,有的鸡还会混合感染,危害极大。对于该病的诊断方法主要根据临床症状及病理变化,同时结合实验室诊断来确诊,最佳的预防措施是进... 马立克氏病是目前流行较广泛的一种病毒性传染疾病,根据侵害的部位不同分为神经型、内脏型、眼型和皮肤型,有的鸡还会混合感染,危害极大。对于该病的诊断方法主要根据临床症状及病理变化,同时结合实验室诊断来确诊,最佳的预防措施是进行免疫接种。 展开更多
关键词 肉鸡 马立克氏病 病原 流行 临床症状 病理变化 诊断方法 防控措施
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蛋鸡传染性鼻炎的流行病学、临床症状、诊断及其防控 被引量:1
16
作者 《现代畜牧科技》 2017年第10期110-110,共1页
鸡传染性鼻炎是副鸡嗜血杆菌引起的一种呼吸道疾病,发病率和传染性高。该病主要危害育成鸡和产蛋鸡,导致蛋鸡的生长发良受阻、产蛋率下降,蛋的品质下降,使蛋鸡的死淘率增加,造成严重经济损失。对该病的防治需加强鸡群饲养管理,采取有效... 鸡传染性鼻炎是副鸡嗜血杆菌引起的一种呼吸道疾病,发病率和传染性高。该病主要危害育成鸡和产蛋鸡,导致蛋鸡的生长发良受阻、产蛋率下降,蛋的品质下降,使蛋鸡的死淘率增加,造成严重经济损失。对该病的防治需加强鸡群饲养管理,采取有效防控措施。 展开更多
关键词 蛋鸡 传染性鼻炎 病原 流行 临床症状 病理变化 诊断方法 防控
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鹅副黏病毒病的临床症状、实验室检验及其防控 被引量:1
17
作者 《现代畜牧科技》 2017年第12期81-81,共1页
鹅副黏病毒病是近几年新发现的一种急性病毒性传染病,是由于感染鹅副黏病毒而发生,且任何年龄的鹅都能够感染。病鹅主要是免疫系统、消化系统、神经系统出现症状和病变。该病具有较高的发病率和病死率,能够广泛传播,是一种较难控制且会... 鹅副黏病毒病是近几年新发现的一种急性病毒性传染病,是由于感染鹅副黏病毒而发生,且任何年龄的鹅都能够感染。病鹅主要是免疫系统、消化系统、神经系统出现症状和病变。该病具有较高的发病率和病死率,能够广泛传播,是一种较难控制且会严重危害养鹅业的传染病之一,应采取有效的防控措施。 展开更多
关键词 副黏病毒病 发病特点 临床症状 实验室诊断 鉴别诊断 防控措施
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鸡传染性法氏囊的流行特点与防制现状 被引量:1
18
作者 张卓 李爽 《养殖技术顾问》 2009年第4期148-148,共1页
鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)是危害中国乃至世界养禽业健康发展的重要疫病原,变异株和超强毒株的流行给该病的预防和控制带来了严峻的挑战。本文综述了鸡传染性法氏囊病(IBD)目前的流行特点及防制现状,并对今后的防制工作进行展望。
关键词 鸡传染性法氏囊病毒 鸡传染性法氏囊病 疫苗
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那一支春天的歌
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作者 《美文(青春写作)》 2018年第9期49-49,共1页
翠色的柳枝在风中婆娑,抖落下一片"沙沙"的韵角,雀儿在清透的阳光里,唱着一直属于春天的歌。四月天,阳光正好,清风徐来。随妈妈回老家,探望刚做了手术的奶奶。病房里浓郁的消毒水的味道包裹着奶奶蜡黄的脸。奶奶信佛四十年有余。分明... 翠色的柳枝在风中婆娑,抖落下一片"沙沙"的韵角,雀儿在清透的阳光里,唱着一直属于春天的歌。四月天,阳光正好,清风徐来。随妈妈回老家,探望刚做了手术的奶奶。病房里浓郁的消毒水的味道包裹着奶奶蜡黄的脸。奶奶信佛四十年有余。分明是亏了大气的身体,鸡汤、骨头汤这些最补身子的,依然一口也不吃,因此,恢复得格外缓慢。 展开更多
关键词 消毒水 骨头汤 阳光 包裹
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