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胶体金探针的制备与应用 被引量:12
1
作者 王福勇 王道 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 CAS 1991年第4期145-148,共4页
免疫标记技术是免疫学研究中的重要技术之一,近年来发展十分迅速。新的标记物和不同的标记方法不断推出,胶体金的问世不过十几年,但看来是十分有希望的标记物之一。本文从胶体金标记基本原理,标记方法和实际应用等方面对胶体金探针作了... 免疫标记技术是免疫学研究中的重要技术之一,近年来发展十分迅速。新的标记物和不同的标记方法不断推出,胶体金的问世不过十几年,但看来是十分有希望的标记物之一。本文从胶体金标记基本原理,标记方法和实际应用等方面对胶体金探针作了系统介绍。 展开更多
关键词 胶体金探针 制备 应用 免疫金标记
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用离子交换层析法纯化鸡蛋黄IgG 被引量:13
2
作者 杨德 王道 《华西医科大学学报》 CSCD 1991年第1期17-20,共4页
为解决鸡蛋黄IgG粗提物不纯的问题,作者试用DEAE离子交换层析法对其进行纯化。结果显示:鸡蛋黄IgG既可用0.1~0.6mol/L NaCl线性连续梯度从DEAE柱上首先洗脱出来,又可用含0.15mol/L NaCl的0.015mol/L Tris-HCl缓冲液(pH8.0)从DEAE离子... 为解决鸡蛋黄IgG粗提物不纯的问题,作者试用DEAE离子交换层析法对其进行纯化。结果显示:鸡蛋黄IgG既可用0.1~0.6mol/L NaCl线性连续梯度从DEAE柱上首先洗脱出来,又可用含0.15mol/L NaCl的0.015mol/L Tris-HCl缓冲液(pH8.0)从DEAE离子交换剂上选择性地洗脱下来。采用该法制得的鸡蛋黄IgG抗体制品,具有均一、纯度高和没有明显的抗体丢失等特点,而且本法简便、可靠、实用,有益于鸡蛋黄抗体系统的开发和利用。本法在所查国内外资料中,尚未见报道。 展开更多
关键词 鸡蛋黄抗体 免疫球蛋白 纯化
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黄曲霉毒素B_1人工抗原的高效率合成方法及抗体制备的研究 被引量:3
3
作者 王光建 鲁长豪 +1 位作者 王道 叶梅君 《中国公共卫生学报》 1995年第2期116-119,共4页
将AFTB1羧甲基肟制成活性酯,再与载体蛋白质结合制成AFTB1人工抗原。采用此法AFTB1羧甲基肟的利用率可达47%,偶联物的产率(以偶联物与AFTB1肟的质量比表示)达到10。用本法合成的AFTB1-BSA偶联物... 将AFTB1羧甲基肟制成活性酯,再与载体蛋白质结合制成AFTB1人工抗原。采用此法AFTB1羧甲基肟的利用率可达47%,偶联物的产率(以偶联物与AFTB1肟的质量比表示)达到10。用本法合成的AFTB1-BSA偶联物免疫家兔,获得了高效价的特异性抗血清,经间接竞争抑制ELISA法测定,产生50%抑制所需的AFTB1、B2、G1和G2浓度依次为12.8、57.6、28.7和>400ng/ml。本文还讨论了偶联物分子中AFTB1残基数目对免疫效果的影响。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 人工抗原 抗体 制备
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带有HBsAg表位内影像的单克隆抗独特型抗体的建立和鉴定 被引量:5
4
作者 王道 杨德 +3 位作者 何良修 蔡美英 牟家琬 田忆芳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第3期160-163,共4页
本文采用鼠单克隆抗-HBs(Ab_1)作抗原免疫同系鼠,取免疫鼠的脾细胞与SP_2/0骨髓瘤细胞融合,经过反复筛选、克隆化获得两株(B_3,C_2)持续分泌单克隆的抗独特型抗体其(Ab_2)。对其中之一B_3作了深入鉴定。B_3的Ig类型为IgG,亚类为IgG_2a... 本文采用鼠单克隆抗-HBs(Ab_1)作抗原免疫同系鼠,取免疫鼠的脾细胞与SP_2/0骨髓瘤细胞融合,经过反复筛选、克隆化获得两株(B_3,C_2)持续分泌单克隆的抗独特型抗体其(Ab_2)。对其中之一B_3作了深入鉴定。B_3的Ig类型为IgG,亚类为IgG_2a。核型分析结果染色体数为106条。通过ELISA抑制试验对B_3进行鉴定,发现B_3一方面能与纯化HBsAg发生阳性的竞争性抑制,另一方面又能与不同来源的抗-HBs发生结合,出现阳性的中和抑制。无论竞争性抑制还是中和抑制,都呈现剂量依赖关系。将B_3Ig免疫同系鼠,经一次免疫后就能诱导出具有抗-HBs活性的抗-抗-独特型抗体(Ab_3)。以上结果表明:B_3株杂交瘤细胞所分泌的单克隆抗独特型抗体是带有HBsAg表位内影像的单克隆抗体。并对B_3Ig的可能应用意义进行了讨论。 展开更多
关键词 单克隆抗体 独特型抗体 内影象
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黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
5
作者 王光建 牟家琬 +2 位作者 王道 鲁长豪 叶梅君 《华西医科大学学报》 CSCD 1995年第3期275-278,共4页
以自己合成的黄曲霉毒素B_1一人血清白蛋白(AFTB_1-HSA)偶联物免疫BALB/c鼠,应用杂交瘤技术,建立了两株能持续分泌抗AFTB_1单克隆抗体(AFTB_1McAb)的杂交瘤细胞株,命名为IB5和2F1,接... 以自己合成的黄曲霉毒素B_1一人血清白蛋白(AFTB_1-HSA)偶联物免疫BALB/c鼠,应用杂交瘤技术,建立了两株能持续分泌抗AFTB_1单克隆抗体(AFTB_1McAb)的杂交瘤细胞株,命名为IB5和2F1,接种BALB/c鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ELISA鉴定McAb的反应特异性,使McAb与固相黄曲霉毒素B_1一牛血清白蛋白(AFTB_1-BSA)结合产生50%抑制所需的AFTB_1、B_2、G_1、G_2浓度依次为:1B54.0、36.9、23.3、403.3ng/ml,2F12.4、2.6、2.8、4。7ng/ml。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 单克隆抗体 制备 鉴定
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用高价人抗HBs在人体内诱导产生抗HBs 被引量:4
6
作者 胡其乐 牟家琬 +4 位作者 王道 赵宗蓉 王泓 刘文方 余蓉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期179-182,共4页
本文探讨用外源性人抗HBs在人体通过免疫网络诱导产生自身的抗HBs的可能性。志愿者经多次注射人高价抗HBs(Ab_1)后,体内产生了Ab_2,进而产生出特异性与Ab_1相同的Ab_3;当Ab_3水平升高时,Ab_2水平下降。此结果证实了人体内独特型网络的... 本文探讨用外源性人抗HBs在人体通过免疫网络诱导产生自身的抗HBs的可能性。志愿者经多次注射人高价抗HBs(Ab_1)后,体内产生了Ab_2,进而产生出特异性与Ab_1相同的Ab_3;当Ab_3水平升高时,Ab_2水平下降。此结果证实了人体内独特型网络的存在及其活跃的调节功能,表明用于被动免疫的人抗HBs在人体也能通过激活独特型网络产生主动免疫保护作用。此外,本文的结果还提示,注射人抗HBs后,人体内产生的Ab_2可模拟HBsAg,使常规的HBsAg检查出现假阳性结果。 展开更多
关键词 人抗HBs 被动免疫 主动免疫
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人类孕激素受体单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:2
7
作者 黄薇 曹泽毅 +2 位作者 韩字研 李明远 王道 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期107-108,共2页
人类孕激素受体单克隆抗体的制备与鉴定黄薇,曹泽毅,韩字研,李明远,王道若孕激素受体(PR)是一种细胞内受体,在妇产科内分泌疾病和妇科肿瘤中,该受体的存在与否及含量,与疾病的诊断、治疗密切相关。因此,PR的测定受到关注... 人类孕激素受体单克隆抗体的制备与鉴定黄薇,曹泽毅,韩字研,李明远,王道若孕激素受体(PR)是一种细胞内受体,在妇产科内分泌疾病和妇科肿瘤中,该受体的存在与否及含量,与疾病的诊断、治疗密切相关。因此,PR的测定受到关注。以往测定PR的方法主要为生物化学... 展开更多
关键词 孕激素 受体 单克隆抗体 制备 鉴定
原文传递
抗麻风杆菌酚糖脂1末端三糖的单克隆抗体的制备 被引量:3
8
作者 王道 牟家琬 +3 位作者 蒋中华 李明远 肖丽英 王波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期151-154,共4页
将麻风杆菌特异性抗原酚糖脂Ⅰ(phenolic glycolipid I,PGL-I)包被在明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minisota)表面,制成免疫原、脾脏内免疫BALB/c鼠,取免疫鼠脾脏制成脾细胞悬液,与Sp2/0细胞按常法融合,选择性培养。凡有克隆生长的,对其... 将麻风杆菌特异性抗原酚糖脂Ⅰ(phenolic glycolipid I,PGL-I)包被在明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minisota)表面,制成免疫原、脾脏内免疫BALB/c鼠,取免疫鼠脾脏制成脾细胞悬液,与Sp2/0细胞按常法融合,选择性培养。凡有克隆生长的,对其上清,用人工合成、含PGL-I末端三糖的人工半合成抗原——NT-O-BSA作ELISA进行筛选。从中选择了一株对PGL-I末端三糖表位特异的单克隆抗体——E_(10)F_1进行了初步鉴定。E_(10)F_1的Ig亚类为IgG3,与大多数抗糖抗体的Ig亚类一致。经ELISA及斑点免疫吸附试验鉴定,E_(10)F_1仅与PGL-I包被的明尼苏达沙门氏菌出现阳性反应,不与明尼苏达沙门氏菌、BSA、BCG、耻垢分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌发生反应。证明单克隆抗体E_(10)F_1所识别的抗原表位为PGL-I分子末端三糖,也是麻风杆菌的特异性抗原表位。文中对制备抗糖的单克隆抗体的实验设计进行了讨论。 展开更多
关键词 麻风杆菌 酚糖酯I 单克隆抗体
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单克隆抗体亲和柱分离荧光法测定花生和玉米中黄曲霉毒素B_1的研究 被引量:2
9
作者 王光建 鲁长豪 +1 位作者 叶梅君 王道 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1995年第8期933-936,共4页
本文建立了用单克隆抗体亲和柱分离荧光法测定花生和玉米中黄曲霉毒B1的方法,用60%甲醇提取样品中的AFT,经氢氧化铁沉淀除去大部分杂质,通过亲和柱将ATFB1进一步与杂质分离,甲醇洗脱后加溴处理,测定荧光强度,与标准... 本文建立了用单克隆抗体亲和柱分离荧光法测定花生和玉米中黄曲霉毒B1的方法,用60%甲醇提取样品中的AFT,经氢氧化铁沉淀除去大部分杂质,通过亲和柱将ATFB1进一步与杂质分离,甲醇洗脱后加溴处理,测定荧光强度,与标准比较定量。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 荧光法 食品分析 花生 玉米
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1990年国外独特型免疫网络研究概况 被引量:1
10
作者 李明远 王道 《国外医学(免疫学分册)》 CAS 北大核心 1992年第1期19-21,共3页
有关独特型免疫网络的研究,在国外越来越广泛和深入。本文根据医学光盘检索搜集到1990年国外有关独特型免疫网络研究的资料,包括自身免疫性疾病、肿瘤、微生物学与寄生虫学、生物受体与器官移植等五个方面。希望有助于同道们了解该年度... 有关独特型免疫网络的研究,在国外越来越广泛和深入。本文根据医学光盘检索搜集到1990年国外有关独特型免疫网络研究的资料,包括自身免疫性疾病、肿瘤、微生物学与寄生虫学、生物受体与器官移植等五个方面。希望有助于同道们了解该年度这一领域研究的动向。 展开更多
关键词 免疫网络 独特型 国外
全文增补中
两种鸡蛋黄IgG提取方法的对比研究 被引量:2
11
作者 杨德 王道 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1990年第3期263-266,共4页
从免疫鸡的蛋黄中提取特异性IgG抗体,是一条简便而廉价的制备诊断用抗体制品的途径。作者建立并比较了两种鸡蛋黄IgG提取方法。结果显示,两法均可从每毫升超免疫鸡的蛋黄中提取到16~17mg IgG制品,而且法Ⅱ提取之蛋黄IgG制品的纯度和抗... 从免疫鸡的蛋黄中提取特异性IgG抗体,是一条简便而廉价的制备诊断用抗体制品的途径。作者建立并比较了两种鸡蛋黄IgG提取方法。结果显示,两法均可从每毫升超免疫鸡的蛋黄中提取到16~17mg IgG制品,而且法Ⅱ提取之蛋黄IgG制品的纯度和抗体活性比法Ⅰ高。由于法Ⅰ和法Ⅱ提取的蛋黄IgG制品分别含有22%和16%的无关蛋白质,因此,如需高纯度蛋黄IgG制品,还须对其进一步纯化。 展开更多
关键词 鸡免疫球蛋白 蛋黄抗体 提取
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抗HEL抗独特型抗体制备及酶功能模拟初探
12
作者 李明远 肖玉 +4 位作者 肖丽英 李虹 蒋中华 牟家琬 王道 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期229-232,共4页
用针对鸡卵清溶菌酶(HEL)不同表位的鼠单克隆抗体(MAb1)免疫同系小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过筛选,克隆化,获得了多株分泌单克隆抗独特型(MAb2)抗体的杂交瘤细胞株,其中用抗HEL酶... 用针对鸡卵清溶菌酶(HEL)不同表位的鼠单克隆抗体(MAb1)免疫同系小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经过筛选,克隆化,获得了多株分泌单克隆抗独特型(MAb2)抗体的杂交瘤细胞株,其中用抗HEL酶活性中心的MAb1诱导产生的MAb2中有两株可以模拟HEL的溶菌活性。其溶菌活性在单独作用时较弱,混合作用时增强,但均明显弱于HEL本身。结果表明:在以酶分子作抗原的免疫网络中的确存在可以模拟酶生物学功能的抗独特型抗体(即Ab2β),为模拟酶的研究开辟了又一条途径。 展开更多
关键词 生物学模拟 抗独特型抗体 鸡卵清溶菌酶 制备
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用人抗HBs在体内诱导主动免疫的研究 被引量:1
13
作者 贾文祥 牟家琬 +4 位作者 胡其乐 赵宗容 王道 赵壁修 刘文方 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第3期246-249,共4页
作者对103名健康志愿者注入高价人抗HBs(Ab_1)3次后,观测其体内产生的抗独特性抗体(Ab_2)和抗-抗-独特性抗体(Ab_3)水平的动态变化。结果发现,当Ab_3水平升高时,则Ab_2水平下降。从而再一次证明用于被动免疫的人抗HBs,可以激活体内独特... 作者对103名健康志愿者注入高价人抗HBs(Ab_1)3次后,观测其体内产生的抗独特性抗体(Ab_2)和抗-抗-独特性抗体(Ab_3)水平的动态变化。结果发现,当Ab_3水平升高时,则Ab_2水平下降。从而再一次证明用于被动免疫的人抗HBs,可以激活体内独特型免疫网络,诱导出主动免疫的保护效果。 展开更多
关键词 独特型网络 乙型肝炎病毒 免疫学
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分泌抗人聚白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其应用 被引量:1
14
作者 蔡美英 张子康 +6 位作者 牟家琬 汪成孝 尹廷渊 李明远 刘玲 赵宗蓉 王道 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1989年第2期134-136,共3页
作者成功地获得了持续稳定分泌抗人聚白蛋白(PHSA)的单克隆抗体(McAb)细胞株。用^(125)I标记该McAb,采用敏感性高的RIA法对HBsAg阳性和阴性血清中老化的白蛋白分子进行了探测。结果发现PHSA主要存在于HBsAg阳性血清中。此工作为乙型肝... 作者成功地获得了持续稳定分泌抗人聚白蛋白(PHSA)的单克隆抗体(McAb)细胞株。用^(125)I标记该McAb,采用敏感性高的RIA法对HBsAg阳性和阴性血清中老化的白蛋白分子进行了探测。结果发现PHSA主要存在于HBsAg阳性血清中。此工作为乙型肝炎病毒(HBV)与循环中PHSA结合的可能性提供了实验依据。 展开更多
关键词 单克隆抗体 白蛋白 杂交瘤
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HBsAg阳性血清中抗-抗-HBs抗体检测的初步报告 被引量:1
15
作者 李明远 牟家琬 +2 位作者 王道 赵宗蓉 王远萍 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第4期374-376,共3页
作者设计了测定人血清中抗-抗-HBs(Ab_2)的ELISA法,并用该法对23例无自觉症状,HBsAg阳性的血清进行了检测,其中5例为Ab_2阳性,阳性率为21.7%。任选Ab_2阳性中的3份标本,Ab_2阴性中的2份标本进行了免疫电镜检查,前者均未查见HBV颗粒,后... 作者设计了测定人血清中抗-抗-HBs(Ab_2)的ELISA法,并用该法对23例无自觉症状,HBsAg阳性的血清进行了检测,其中5例为Ab_2阳性,阳性率为21.7%。任选Ab_2阳性中的3份标本,Ab_2阴性中的2份标本进行了免疫电镜检查,前者均未查见HBV颗粒,后者中有1份查见HBV颗粒.提示.在常规的HBsAg检测中,有可能存在具有HBsAg内影像作用的抗-抗-HBs的干扰。 展开更多
关键词 乙型肝炎 表面抗原 抗体 测定
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具有抗-HBs结合活性的单克隆抗-抗独特型抗体的制备和鉴定 被引量:1
16
作者 周聪 王道 +1 位作者 蔡美英 牟家琬 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期151-154,共4页
B_3为我室建立的带有HBsAg表位内影像的单克隆抗独特型抗体(mAb_2)。本文采用脾脏内和尾静脉内注射途径,用B_3免疫BALB/c鼠,获得了具有抗-HBs结合活性的同系单克隆抗-抗独特型抗体(mAb_3)3B_8株。这一结论基于以下两点观察:(1)3B_8能与... B_3为我室建立的带有HBsAg表位内影像的单克隆抗独特型抗体(mAb_2)。本文采用脾脏内和尾静脉内注射途径,用B_3免疫BALB/c鼠,获得了具有抗-HBs结合活性的同系单克隆抗-抗独特型抗体(mAb_3)3B_8株。这一结论基于以下两点观察:(1)3B_8能与纯化的HBsAg结合。纯化的HBsAg或抗-HBs均能以剂量依赖形式抑制这一结合;(2)3B_8能以剂量依赖形式抑制抗-HBs与B_3的结合。小鼠在从未接触HBsAg的情况下,单独用B_3免疫,获得了具有抗-HBs结合活性的单克隆抗-抗独特型抗体3B_8,进一步证明我室过去建立的mAb_2B_3株,确实带有HBsAg表位内影像。 展开更多
关键词 抗-HBS 单克隆抗体 制备 鉴定
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蛋白质表位分析的方法介绍
17
作者 肖丽英 王道 《国外医学(免疫学分册)》 CAS 北大核心 1993年第1期29-33,共5页
蛋白质抗原表位分析的方法对于基础理论和临床研究都是十分重要的.本文归纳总结了近年来用于蛋白质抗原表位分析的几种方法,并对每种方法的特点作了客观的评价.
关键词 蛋白 抗原 表位分析
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用单克隆Anti-Id代替HBsAg检测抗-HBs的探讨 被引量:1
18
作者 李虹 王道 牟家琬 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1993年第2期167-170,共4页
根据Jerne的独特型-抗独特型网络理论,本文研究用单克隆Anti-Id代替常规检测中的HBsAg,建立一种新的检测抗-HBs的方法。该法用Anti-Id作为包被抗体,HRP标记的羊抗人IgG检测被检血清中被结合的抗-HBs。实验结果表明,本法具有良好的敏感性... 根据Jerne的独特型-抗独特型网络理论,本文研究用单克隆Anti-Id代替常规检测中的HBsAg,建立一种新的检测抗-HBs的方法。该法用Anti-Id作为包被抗体,HRP标记的羊抗人IgG检测被检血清中被结合的抗-HBs。实验结果表明,本法具有良好的敏感性(0.5μg/ml)和特异性,而且安全、简便,试剂来源丰富,尤其适用于检测那些抗原不易获得,不易纯化或抗原传染性强的疾病。 展开更多
关键词 单克隆抗体 ELISA 乙型肝炎病毒
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一次融合同时获得抗独特型和抗抗独特型单克隆抗体的杂交瘤
19
作者 王道 杨德 何良修 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期97-100,共4页
本文在研制带有HBsAg表位内影象的单克隆抗独特型抗体的过程中,用抗-HBs单克隆抗体(Ab_1)免疫同系鼠,除筛选分泌Ab_2β的杂交瘤细胞外,还同时设计了筛选分泌Ab_3的杂交瘤。结果在一次免疫,一只免疫鼠的脾脏细胞,一次融合实验中,同时获... 本文在研制带有HBsAg表位内影象的单克隆抗独特型抗体的过程中,用抗-HBs单克隆抗体(Ab_1)免疫同系鼠,除筛选分泌Ab_2β的杂交瘤细胞外,还同时设计了筛选分泌Ab_3的杂交瘤。结果在一次免疫,一只免疫鼠的脾脏细胞,一次融合实验中,同时获得了分泌Ab_2β及Ab_3抗体的杂交瘤细胞株。本文报告筛选Ab_3的方法及对Ab_3所作的免疫化学鉴定。结果获得一株分泌Ab_3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为M4。证明Ab_3具有Ab_1的特异性。这一结果不仅提示独特型网络的确在同一个体内客观存在,而且也为研制单克隆抗独特型抗体杂交瘤提供了一条简单、经济、事半功倍的经验。 展开更多
关键词 抗独特型 抗抗独特型 单克隆抗体
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抗人类免疫缺陷病毒的新制剂——硫酸葡聚糖和肝素
20
作者 李明远 王道 《国外医学(微生物学分册)》 北大核心 1991年第6期248-250,共3页
迄今为止,抗人类免疫缺陷病毒(HIV)的药物除叠氮胸苷(AZT)获准临床使用外,尚无其他可供治疗的药物。自1987年起,有关硫酸葡聚糖和肝素的抗HIV的首次报道后,引起了学者们的重视,报道也不断增多,其作用机理正进一步阐明,尽管尚存在抗凝血... 迄今为止,抗人类免疫缺陷病毒(HIV)的药物除叠氮胸苷(AZT)获准临床使用外,尚无其他可供治疗的药物。自1987年起,有关硫酸葡聚糖和肝素的抗HIV的首次报道后,引起了学者们的重视,报道也不断增多,其作用机理正进一步阐明,尽管尚存在抗凝血副作用和其他毒性问题,目前还缺乏体内药物的有效监测手段等,但已有了克服这些困难的可喜的苗子。因而,它有可能成为AIDS治疗的一种新制剂。 展开更多
关键词 艾滋病毒 硫酸葡聚糖 肝素
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