磁珠快速提取乙型肝炎病毒DNA方法的建立及其应用研究 被引量：10

1

作者 陆佳飞 周科隆 王缦 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期843-850,共8页

目的建立一种基于磁珠法的快捷、简便、高纯度血液HBV DNA提取方法（以下简称磁珠法），为用于临床自动化定量检测的核酸诊断试剂研发提供技术支持。方法用科华生物公司内部5份HBV强阳性血清标本，先通过磁珠的磁性、悬浮性、HBV DNA提... 目的建立一种基于磁珠法的快捷、简便、高纯度血液HBV DNA提取方法（以下简称磁珠法），为用于临床自动化定量检测的核酸诊断试剂研发提供技术支持。方法用科华生物公司内部5份HBV强阳性血清标本，先通过磁珠的磁性、悬浮性、HBV DNA提取效果等对4种磁珠（A～D磁珠）进行筛选，并对磁珠用量（1～1．75μL／m1）、裂解液pH值（4～9）、洗涤液中是否加入乙醇和洗脱液带磁珠扩增等条件进行系统优化；并对建立的磁珠法线性范围、精密度、灵敏度、抗污染和抗干扰能力等技术性能进行评价。然后，分别用磁珠法与国内成熟的煮沸法定量检测100份HBV血清标本，用磁珠法与国际“金标准”Roche COBAS TaqManTest（以下简称Roche法）定量检测50份HBV血清标本，并比较分析3种方法的相关性。结果通过实验条件优选试验确定超顺磁A磁珠在物理性能和DNA提取效果都优于其他3种磁珠，磁珠最佳使用量为1．25μl／ml，裂解液最佳pH值为7—8，洗涤液中可去除乙醇成分，并可直接带磁珠进行扩增反应。通过平行检测5份公司内部HBV强阳性血清标本以及梯度稀释的血清标本确定磁珠法的线性范围为4×101～4×108 IU／ml，煮沸法为4×102-4×108 IU／ml；磁珠法检测灵敏度为30IU／ml，高于煮沸法（100IU／ml）；在低浓度HBV血清标本检测中，磁珠法的精密度（CV为6．0％）优于煮沸法（CV为11．9％）；磁珠法检测的假阳性率为0，而煮沸法假阳性率为3．1％，磁珠法抗污染能力优于煮沸法；煮沸法在标本中肝素钠含量达到62．5U／ml时，检出血清中HBV DNA含量明显下降，当肝素钠达1000U／ml时，无法检出HBV DNA，而肝素钠对磁珠法几乎无影响。同时，磁珠法和煮沸法平行检测100份临床HBV血清标本，磁珠法的阳性率（86％）高于煮沸法（74％），且2种方法的相关性较好（R2=0．948，P〈0� 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 DNA 病毒 磁力学

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促甲状腺素化学发光免疫定量检测试剂盒的研制 被引量：5

2

作者 王青 王缦 +2 位作者 魏东芝 陈寒柏 张黎明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期192-193,共2页

目的:研制人血清中促甲状腺素(TSH)的化学发光免疫检测试剂盒。方法:采用辣根过氧化物酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体(mAb),与固相包被的抗TSHα亚单位的另一mAb配对,以鲁米诺作为底物,采用两步法建立了双位点夹心法人血清TSH... 目的:研制人血清中促甲状腺素(TSH)的化学发光免疫检测试剂盒。方法:采用辣根过氧化物酶标记的抗TSHβ亚单位特异性单克隆抗体(mAb),与固相包被的抗TSHα亚单位的另一mAb配对,以鲁米诺作为底物,采用两步法建立了双位点夹心法人血清TSH的化学发光免疫定量分析法。结果:该方法灵敏度为0.0788mIU/L,批内CV平均为4.7%,批间CV平均为8.4%,平均回收率为93.05%。该检测与LH、FSH和HCG无交叉反应。部分实验样品的测试结果显示该试剂与国外同类试剂(雅培architect i2000)的测定结果明显相关(r=0.984)。结论:该方法具有较高的灵敏度、重复性和准确度,与其他同类产品相比简便、快捷、成本低,适于临床检测和科研应用。 展开更多

关键词 促甲状腺激素(TSH) 化学发光免疫分析法 试剂盒

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实时荧光PCR法快速检测乙型肝炎病毒基因YMDD突变株 被引量：6

3

作者 陈建 王缦 +2 位作者 陈华 王卓莹 华兵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期333-335,342,共4页

目的建立一种敏感、特异、快速的实时荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒基因YMDD突变株的方法,为临床治疗提供指导。方法设计引物和TaqMan-MGB探针,利用TaqMan-MGB探针技术,建立实时荧光定量PCR法。检测临床HBV-YMDD变异标本36份和野生型HBV... 目的建立一种敏感、特异、快速的实时荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒基因YMDD突变株的方法,为临床治疗提供指导。方法设计引物和TaqMan-MGB探针,利用TaqMan-MGB探针技术,建立实时荧光定量PCR法。检测临床HBV-YMDD变异标本36份和野生型HBV标本20份,并将其YMDD变异结果与DNA测序结果进行比较。结果该方法检测灵敏度为101拷贝/μl;特异性为100%;最低检测限度为101DNA拷贝/30μl反应体系;实时荧光PCR方法测得YMDD野生株20份,变异株36份,与DNA测序结果完全一致,符合率为100%。结论应用TaqMan-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测YMDD变异株基因,具有灵敏、特异和精确等优点,对临床监测拉米夫定耐药具有重要意义。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 实时荧光PCR TAQMAN-MGB探针 YMDD变异株

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溴结构域蛋白4抑制剂GSK525762A对急性B淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响及可能机制 被引量：4

4

作者 王缦 陈翀 +5 位作者 徐杰 王力 宋旭光 张焕新 曾令宇 徐开林 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期528-532,共5页

目的 探究溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂对急性B淋巴细胞白血病细胞生物学行为的影响及可能机制.方法 用BRD4抑制剂GSK525762A抑制急性B淋巴细胞白血病细胞株RS4; 11细胞BRD4活性,并以急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞作对照.采用CC... 目的 探究溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂对急性B淋巴细胞白血病细胞生物学行为的影响及可能机制.方法 用BRD4抑制剂GSK525762A抑制急性B淋巴细胞白血病细胞株RS4; 11细胞BRD4活性,并以急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞作对照.采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;用Annexin Ⅴ/7-AAD标记,流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测抗凋亡基因c-myc、Bcl-2、CDK6和促凋亡基因Bad、Bak、Bax的转录水平;Western blot检测Bcl-2及Bak蛋白的表达.结果 不同浓度GSK525762A对RS4; 11细胞增殖均有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,作用48、72 h其半数抑制率分别为6.174和1.996 μmol/L.与DMSO处理组比较,GSK525762A处理后RS4; 11细胞c-myc、Bcl-2、CDK6mRNA转录水平降低,而Bad、Bak、Bax mRNA转录水平升高,且Bcl-2蛋白表达水平下调,Bak蛋白表达水平上调.而GSK525762A对Jurkat细胞的增殖抑制作用并不明显.结论 GSK525762A可抑制RS4; 11细胞的增殖,并促进其凋亡;该作用可能通过下调Bcl-2表达,诱导白血病细胞凋亡而实现的. 展开更多

关键词 溴结构域蛋白4抑制剂 RS4 11细胞 细胞增殖

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SH2D1A基因p.Pro101Leu突变的XLP-1继发噬血细胞综合征伴中枢神经系统受累1例并文献复习

5

作者 王缦 黄宗宣 陶艳玲 《临床血液学杂志》 CAS 2024年第5期361-365,共5页

为提高对X-连锁淋巴细胞增殖性疾病1型(X-linked lymphoproliferative disease 1,XLP-1)的认识,扩充我国XLP-1的病例数据,现回顾诊治的1例XLP-1患者的临床资料,并查阅相关文献,从而总结该病的临床特征、诊断及治疗等。本例患者有阳性家... 为提高对X-连锁淋巴细胞增殖性疾病1型(X-linked lymphoproliferative disease 1,XLP-1)的认识,扩充我国XLP-1的病例数据,现回顾诊治的1例XLP-1患者的临床资料,并查阅相关文献,从而总结该病的临床特征、诊断及治疗等。本例患者有阳性家族史,故在首次感染即完善基因筛查,发现SH2D1A c.302C>T(p.P101 L)半合子突变,来自母亲。该患者早期仅表现为抗生素可控制的感染,直到确诊后10个月出现EBV相关噬血细胞综合征(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH),按HLH-1994方案化疗,病情缓解,但因持续EB病毒血症,并出现中枢神经系统受累,予挽救化疗后行造血干细胞移植,现患儿健康存活。故对于有阳性家族史者,以及诊断为HLH或淋巴瘤、低丙种球蛋白的男性患儿应行SH2D1A基因突变的筛查,一旦确诊为XLP-1,应尽早行造血干细胞移植。 展开更多

关键词 XLP SH2D1A基因突变 噬血细胞综合征 EB病毒 造血干细胞移植

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乙肝表面抗原突变体的表达及其初步应用 被引量：3

6

作者 祝长城 罗春贞 王缦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1136-1139,共4页

目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM ... 目的:构建和表达乙肝表面抗原(HBsAg)突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。方法:利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot分析,利用AxSYM HBsAgV2(Abbott)酶免试剂盒检测重组表面抗原的活性。结果:通过序列分析确定突变体构建成功,SDS-PAGE显示突变体能在毕赤酵母中有效表达,在Western blot试验中HBsAg突变体被特异性多克隆抗体识别,相对分子质量(Mr)约为38000,AxSYM试剂盒检测结果表明HBsAg突变体具有一定生物活性。结论:利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体,对于目前市售试剂盒的质量控制和临床应用有较高的实用价值。 展开更多

关键词 乙肝表面抗原突变体 毕赤酵母 免疫反应性

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巨细胞病毒感染PCR检测方法的建立 被引量：3

7

作者 王卓莹 王缦 +1 位作者 陈华 陈建 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期231-234,共4页

目的建立检测巨细胞病毒污染的PCR检测方法，并制备检测试剂盒。方法采用TaqMan探针，选择保守序列CMV-pp65设计引物，荧光定量病毒载量；对试剂盒进行敏感性、重复性和特异性等测试；对31份临床阳性血清标本和106份正常献血者血浆标本... 目的建立检测巨细胞病毒污染的PCR检测方法，并制备检测试剂盒。方法采用TaqMan探针，选择保守序列CMV-pp65设计引物，荧光定量病毒载量；对试剂盒进行敏感性、重复性和特异性等测试；对31份临床阳性血清标本和106份正常献血者血浆标本进行检测，并与国内同类试剂盒进行比较。结果该试剂盒检测线性定量范围可达202～3．6×10^9copies／ml，敏感性为360copies／ml，CV值在1％左右，特异性高，临床标本检测的符合率为100％。本试剂盒与国内已上市试剂盒比较，具有较好的相关性、更高的敏感性和更宽的定量检测范围。结论制备的试剂盒特异性和敏感性均较高，适用于临床上的病毒检测。 展开更多

关键词 巨细胞病毒 聚合酶链式反应 敏感性 特异性

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高甘油三酯-极低密度脂蛋白在大鼠腹腔巨噬细胞结合部位的初步探讨 被引量：1

8

作者 王缦 庄庆祺 梅美珍 《上海医科大学学报》 CSCD 1990年第5期392-397,共6页

从高甘油三酯(HTG)大鼠动物模型中获取纯度较高、并有生物活性的高甘油三酯-极低密度脂蛋白(HTG-VLDL)。用乳过氧化物酶法^(121)Ⅰ标记HTG-VLDL,并将此^(125)Ⅰ-HTG-VLDL与正常大鼠腹腔巨噬细胞在体外共同培养,测得^(125)I-HTG-VLDL在... 从高甘油三酯(HTG)大鼠动物模型中获取纯度较高、并有生物活性的高甘油三酯-极低密度脂蛋白(HTG-VLDL)。用乳过氧化物酶法^(121)Ⅰ标记HTG-VLDL,并将此^(125)Ⅰ-HTG-VLDL与正常大鼠腹腔巨噬细胞在体外共同培养,测得^(125)I-HTG-VLDL在该细胞的吸收,降解的时间曲线、剂量曲线及竞争抑制曲线。实验结果表明:^(125)Ⅰ-HTG-VLDL与鼠腹腔巨噬细胞的结合与降解具有时间饱和性、剂量饱和性及竞争抑制现象。提示鼠腹腔巨噬细胞表面可能存在能与HTG-VLDL结合并具受体性质的结合部位。HTG-VLDL可能通过受体途径的介导进入鼠腹腔巨噬细胞中代谢。 展开更多

关键词 甘油三酯 脂蛋白 腹腔 巨噬细胞

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中国共产党与中国人权进步

9

作者 张桂森 李海红 +2 位作者 刘瑞芬 王缦 刘兵 《领导之友》 2001年第3期19-21,共3页

关键词 人权 中国共产党 中国人民 国家富强 民族独立 崇高理想 追求 美好 历史

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慢病毒介导的人凝血因子Ⅷ高效真核表达系统的建立

10

作者 宋旭光 曹江 +6 位作者 曾令宇 张焕新 程海 王缦 王力 陈翀 徐开林 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期757-761,共5页

目的应用慢病毒载体系统建立高效稳定表达人凝血因子Ⅷ（FⅧ）的细胞株并评估该表达系统的生物安全性。方法构建携带人B区缺失FⅧ（BDDhFⅧ）和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照pXZ9，包装并浓缩慢病毒颗粒。体外... 目的应用慢病毒载体系统建立高效稳定表达人凝血因子Ⅷ（FⅧ）的细胞株并评估该表达系统的生物安全性。方法构建携带人B区缺失FⅧ（BDDhFⅧ）和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照pXZ9，包装并浓缩慢病毒颗粒。体外感染中国地鼠卵巢（CHO）细胞后72h取培养上清，ELISA法测定FⅧ抗原表达水平，一期促凝法测定FⅧ活性，RT-PCR检测感染后CHO细胞中FN的转录。检测载体复制能力以评估安全性。结果成功构建携带BDDhFⅧ和绿色荧光蛋白基因的慢病毒转移质粒BDDhFⅧ／pXZ9及对照质粒pXZ9，并制备出高滴度的慢病毒。该慢病毒载体可高效感染CHO细胞，感染后72h培养上清中FⅧ抗原浓度为（1724．9±283．7）mU／ml，FⅧ活性为（10．58±1．55）％，RT-PCR检测到BDDhFⅧ基因的转录。感染后的CHO细胞未检测到gag基因的表达，培养上清中也未检测到病毒。结论慢病毒可以介导人FⅧ在CHO细胞内高效表达；该表达系统不产生子代病毒，具有良好的生物安全性。 展开更多

关键词 慢病毒属 因子Ⅷ 真核表达 中国地鼠卵巢细胞

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面对越位的家长,你该怎么办

11

作者 王缦 《江苏教育》 2016年第63期62-63,共2页

家长干涉班主任工作不是一件坏事,但是它需要我们班主任教师用智慧去解决一些由此带来的负面影响。这不仅要求我们认真分析家长类型、家长“越位”的原因,还要进行必要的疏导,将家长越位变成家校共育的契机。

关键词 班主任 班级管理 家长越位

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关于小学语文教学中课堂应变能力的思考

12

作者 王缦 《华夏教师》 2018年第26期66-67,共2页

在小学语文课堂教学中难免会有一些意想不到的事情发生,这就是平常所说的课堂意外。有课堂意外并不可怕,可怕的是我们没有相应的应变能力。因此,本文主要对衡量课堂应变能力的标准,以及如何提升小学语文教师的课堂应变能力,进行了分析阐... 在小学语文课堂教学中难免会有一些意想不到的事情发生,这就是平常所说的课堂意外。有课堂意外并不可怕,可怕的是我们没有相应的应变能力。因此,本文主要对衡量课堂应变能力的标准,以及如何提升小学语文教师的课堂应变能力,进行了分析阐述,并提出小学语文教师必须不断提高自身素质,才能适应社会发展对教师能力的需要。 展开更多

关键词 小学语文 课堂教学 应变能力

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无典型临床特征的家族性噬血细胞综合征3型1例并文献复习

13

作者 王缦 陶艳玲 《临床输血与检验》 CAS 2023年第2期269-272,共4页

目的提高对家族性噬血细胞综合征3型的认识。方法结合1例3型家族性噬血细胞综合征患者的临床资料分析及文献复习,探讨该病的临床特点、诊断及治疗方法等。结果家族性噬血细胞综合征3型临床表现多样,有时无典型噬血细胞综合征(hemophagoc... 目的提高对家族性噬血细胞综合征3型的认识。方法结合1例3型家族性噬血细胞综合征患者的临床资料分析及文献复习,探讨该病的临床特点、诊断及治疗方法等。结果家族性噬血细胞综合征3型临床表现多样,有时无典型噬血细胞综合征(hemophagocytic lymphohistiocytosis,HLH)症状、体征及实验室检查特点,临床诊断困难,目前基因测序是诊断和鉴别诊断最合适的方法,但治疗上仍以化疗和造血干细胞移植为主。结论家族性噬血细胞综合征3型临床罕见、临床表现多样,对无阳性家族史、长期发热、肝脾肿大、血细胞减少而诊断难以明确者应想到患本病的可能,应积极完善基因检测协助诊断。 展开更多

关键词 FHL-3 UNC13D 基因突变 发热 肝脾肿大 血细胞减少

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丙氨酸氨基转移酶干化学检测方法的建立及试纸条的制备 被引量：1

14

作者 田漪 陈汉艳 王缦 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第7期881-883,共3页

目的建立一种以丙酮酸氧化酶法为反应原理的丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)干化学检测方法,并制备试纸条。方法试纸条由扩散层、底物层和显色层组成,包被有反应试剂,用反射式光度计测定ALT活性。对制备的试纸条进行各... 目的建立一种以丙酮酸氧化酶法为反应原理的丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase,ALT)干化学检测方法,并制备试纸条。方法试纸条由扩散层、底物层和显色层组成,包被有反应试剂,用反射式光度计测定ALT活性。对制备的试纸条进行各项验证。结果试纸条测定罗氏低、高值质控品的批内变异系数分别为7.4%和4.9%;线性范围为10～1 000 U/L;试纸条测定肝素锂抗凝全血及其血浆的结果差异无统计学意义(P>0.05);标本中胆红素≤257μmol/L,抗坏血酸≤50 mg/L,丙酮酸≤0.5 mmol/L时,ALT测定结果不受影响;建立的干化学法与国际临床化学联合会(IFCC)推荐的方法相关性良好(r=0.988 9);试纸条的95%置信区间参考范围为0～40 U/L。结论建立的干化学法反应迅速,结果准确,操作简便,适用于ALT的即时检验。 展开更多

关键词 丙氨酸氨基转移酶 干化学法 丙酮酸氧化酶

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HIV-1 gp41重组抗原的表达及其免疫反应性检测 被引量：1

15

作者 张昕 梁权 王缦 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期230-233,共4页

为了在大肠杆菌中表达具有良好免疫反应性的HIV-1gp41重组抗原,本实验运用基因工程技术,经PCR扩增gp41的主要抗原表位序列,BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后与E3质粒连接,转化克隆宿主菌DH5α,再提取重组质粒进一步转化表达宿主菌BL21(DE3),经IPT... 为了在大肠杆菌中表达具有良好免疫反应性的HIV-1gp41重组抗原,本实验运用基因工程技术,经PCR扩增gp41的主要抗原表位序列,BamHⅠ、XhoⅠ双酶切后与E3质粒连接,转化克隆宿主菌DH5α,再提取重组质粒进一步转化表达宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白,纯化后标记HRP,通过双抗原夹心酶联免疫方法检测其免疫反应性和特异性。结果表明,获得的HIV-1gp41重组抗原能够与相应抗体特异性结合,与多种无关抗体间无交叉反应,对825份HIV阴性标本检测无错检。检测结果说明该重组抗原具有良好的免疫反应性,在HIV-1抗体诊断试剂中具有潜在的应用价值,为进一步研究gp41抗原奠定了基础。 展开更多

关键词 HIV-1 跨膜蛋白gp41 重组抗原 酶联免疫吸附法

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前列腺特异性抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定

16

作者 倪晓涛 王缦 王春华 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第1期17-20,共4页

目的筛选出针对总前列腺特异性抗原（t—PSA）等克分子的抗体对，及针对游离前列腺特异性抗原（f-PSA）灵敏度高线性好的抗体对。方法以前列腺特异性抗原（PSA）为免疫原免疫6～8周龄BALB／C小鼠，4次免疫后取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细... 目的筛选出针对总前列腺特异性抗原（t—PSA）等克分子的抗体对，及针对游离前列腺特异性抗原（f-PSA）灵敏度高线性好的抗体对。方法以前列腺特异性抗原（PSA）为免疫原免疫6～8周龄BALB／C小鼠，4次免疫后取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，以PSA为包被抗原，通过间接ELISA法和有限稀释法筛选阳性细胞株。建株细胞通过F1代小鼠制备腹腔积液，纯化的单抗经间接ELISA法相加实验分析抗体与抗原表位结合位点，将单抗分类，双抗体夹心法ELISA筛选出合适的抗体对，利用国际标准品PSA WH096／668和PSAWH096／670鉴定等克的抗体对。结果共获得88株稳定分泌PSA单克隆抗体的细胞株，经免疫特性鉴定后得到2对t-PSA等克的单抗，2对f-PSA的单抗，这6株单抗活性稳定，特异性强，灵敏度高，抗体对具有良好的线性。结论该试验成功筛选出所需的抗体对，尤其适用于精确度、灵敏度要求较高的化学发光免疫分析法，为其定量分析人血清中的PSA提供了很好的原料。 展开更多

关键词 总前列腺特异性抗原(t-PSA) 游离前列腺特异性抗原(f—PSA) 单克隆抗体 抗体对 等克反应

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神经纤维瘤病Ⅰ型伴急性髓系白血病1例

17

作者 寇睿 陶艳玲 +4 位作者 胡田田 黄宗宣 王缦 张文莉 王志铁 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2021年第6期370-371,375,共3页

1病例资料患儿,男,6岁,主因“面色发黄、乏力1个月”于2021年1月就诊于我院。患儿为第2胎第2产,生长发育无异常,平素体健。患儿父亲全身可见8块咖啡牛奶斑,最大者4.5 cm×2.5cm,左侧眼睑下垂,躯干部可扪及数个皮下结节。患儿姐姐全... 1病例资料患儿,男,6岁,主因“面色发黄、乏力1个月”于2021年1月就诊于我院。患儿为第2胎第2产,生长发育无异常,平素体健。患儿父亲全身可见8块咖啡牛奶斑,最大者4.5 cm×2.5cm,左侧眼睑下垂,躯干部可扪及数个皮下结节。患儿姐姐全身皮肤同样可见咖啡牛奶斑。入院查体:重度贫血貌,全身皮肤可见20块咖啡牛奶斑,最大者4.5 cm×3.0cm,腋下可见雀斑样色素沉着,躯干、四肢未扪及皮下结节。全身浅表淋巴结无明显肿大。 展开更多

关键词 皮下结节 急性髓系白血病 重度贫血貌 咖啡牛奶斑 眼睑下垂 病例资料 色素沉着 浅表淋巴结

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人血清中总前列腺特异性抗原化学发光免疫分析法的建立

18

作者 王雅果 王缦 彭波 《现代检验医学杂志》 CAS 2010年第1期46-48,共3页

目的建立一种定量分析人血清中总前列腺特异性抗原（t—PSA）的化学发光免疫分析方法。方法采用生物素和碱性磷酸酶分别标记捕获抗体与检测抗体，与样本中的抗原形成免疫复合物，然后通过链霉亲和素与生物素的反应被链霉亲和素标记的磁... 目的建立一种定量分析人血清中总前列腺特异性抗原（t—PSA）的化学发光免疫分析方法。方法采用生物素和碱性磷酸酶分别标记捕获抗体与检测抗体，与样本中的抗原形成免疫复合物，然后通过链霉亲和素与生物素的反应被链霉亲和素标记的磁微粒捕获，利用碱性磷酸酶与发光底物的反应建立了双单抗夹心法检测人血清中t—PSA的化学发光免疫分析方法。结果标准品对WHO96／670国际标准品进行溯源，同时检测血清样本，线性回归方程为y=0．9434X-0．1605，相关系数r=0．99。选择具有等摩尔分子反应性的单抗，对不同存在形式的PSA检测偏差在士3％以内。病人血清样本的测试结果与雅培architecti2000化学发光试剂盒检测结果显著相关，相关系数r=0．989。结论该方法具有较高的灵敏度和重复性，检测结果准确，提高了国产同类试剂的竞争力，同时比同类进口试剂成本低，适于临床检测和科研应用。 展开更多

关键词 总前列腺特异性抗原(t—PSA) 等摩尔分子反应 PSA WHO国际标准品 溯源性 化学发光免疫分析法

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快速定量检测血清尿素含量干化学方法的建立

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作者 宁绍华 朱世成 王缦 《现代检验医学杂志》 CAS 2010年第1期49-51,共3页

目的建立一种快速定量检测人体血清尿素含量的干化学方法。方法设计尿素干化学试纸的结构，确定测试原理和方法，利用自主开发的配套仪器对试纸条的性能进行评价：包括精密度、准确度、线性，并与液体分析法进行方法学比较。结果研制的... 目的建立一种快速定量检测人体血清尿素含量的干化学方法。方法设计尿素干化学试纸的结构，确定测试原理和方法，利用自主开发的配套仪器对试纸条的性能进行评价：包括精密度、准确度、线性，并与液体分析法进行方法学比较。结果研制的干化学试纸的测试时间为100s；批内和日间精密度分别为3．79％～6．41％和6．06%～6.46％；回收率为102．7％；线性范围2．38～42．86mmol／L；干化学法（Y）与脲酶-谷氨酸脱氢酶法进行方法学比较相关性良好，线性回归方程Y=1．0129X＋0．1477，R^2=0．9852。结论研究建立的尿素干化学测试方法测试快速、准确、方便，测试结果与常规液体生化方法相关性良好，申报注册后可以推广至医院急诊使用。 展开更多

关键词 尿素 干化学法 急诊生化检测

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HIV-1gp41蛋白的表达及其免疫反应性

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作者 梁权 罗春贞 +1 位作者 毛培菊 王缦 《中国医药生物技术》 CSCD 2011年第6期415-419,共5页

目的高效表达HIV-1gp41基因片段,满足生产HIV体外检测试剂的需要。方法以含HIV-1gp41基因的质粒X1为模板,采用PCR方法扩增出gp41基因,克隆入E1载体构建重组表达质粒E1-1,转化E.coliBL21DE3感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)... 目的高效表达HIV-1gp41基因片段,满足生产HIV体外检测试剂的需要。方法以含HIV-1gp41基因的质粒X1为模板,采用PCR方法扩增出gp41基因,克隆入E1载体构建重组表达质粒E1-1,转化E.coliBL21DE3感受态细胞,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,使用镍螯合琼脂糖亲和层析柱(Ni-NTAAgaros)纯化重组蛋白,通过ELISA法检测重组蛋白的免疫反应性和特异性。结果 SDS-PAGE鉴定结果表明,重组E1-1蛋白获得了正确的表达;纯化的重组E1-1蛋白纯度>95%;ELISA检测结果表明,重组E1-1蛋白具有较优的免疫反应性和特异性。结论成功表达出具有较高免疫反应性的重组E1-1蛋白,可应用于HIV体外检测试剂。 展开更多

关键词 HIV-1 蛋白质类 免疫活性

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