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题名一种高效小鼠骨髓红系造血岛富集方法的建立
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作者
郑凌岳
王竟苇
佟静媛
石莉红
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机构
中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)北京协和医学院
天津医学健康研究院
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出处
《生物技术进展》
2024年第3期466-472,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(82225003,82100152,82300141)
医科院医学与健康科技创新工程项目(2021-I2M-1-073,2021-I2M-1-040)
+1 种基金
津门医学英才项目(TJSJMYXYC-D2-022)
重点实验室课题项目(Z23-10)。
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文摘
红系造血岛(erythroblastic island,EBI)是哺乳动物红细胞终末分化的独特微环境,EBI研究对于深入理解生理和病理条件下造血微环境的组成和变化至关重要。骨髓中EBI分布较为分散,现有富集方法的富集效果不尽如人意。研究旨在建立一种新的更高效的小鼠骨髓EBI富集方法。在前人研究的基础上进行了创新和优化,建立了以二次密度梯度沉降结合洗涤去除非EBI细胞团为核心的富集方法。通过细胞团形态观察、瑞氏吉姆萨染色、成像流式技术(imaging flow cytometry,IFC)等手段比较了该方法与现有富集方法的富集效果,在直接镜检和瑞氏吉姆萨染色中发现,方法4富集体系中少见单细胞,主要为以巨噬细胞为核心周围围绕红细胞的典型EBI结构。使用IFC技术对于F4/80、CD71以及CD11b进行分析,富集产物中约63.7%的细胞团为EBI,高出之前方法的最高标准(方法3),约38.4%。富集的EBI中发现巨噬细胞为CD11b^(-),且除红细胞外,部分EBI中存在CD11b^(+)细胞,与之前的研究相符。结果显示,该方法在没有造成EBI结构明显破坏的情况下,富集效果在去除单细胞以及非EBI细胞团等方面显著优于现有其他方法,适合对EBI纯度要求较高的研究,为造血微环境研究提供了有效的方法和手段。
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关键词
红系造血岛
红细胞
富集方法
成像流式
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Keywords
erythroblastic island
red blood cell
enrichment method
imaging flow cytometry
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分类号
Q462
[生物学—生理学]
R551.3
[医药卫生—血液循环系统疾病]
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