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云南省澜沧江下游地区虫媒病毒的调查研究 被引量:38
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作者 陶三菊 张海林 +9 位作者 杨冬荣 张云智 杨卫红 章域震 曹玉玺 徐丽宏 何英 陈伯权 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期322-326,F002,共6页
目的 了解云南澜沧江下游地区自然界虫媒病毒流行情况。方法 从云南澜沧江下游地区(澜沧县和思茅市)所属乡村采集蚊虫,分类后保存于液氮。经消毒、研磨、离心等处理后接种组织培养细胞分离病毒,并进行初步鉴定。结果从233份标本中,分离... 目的 了解云南澜沧江下游地区自然界虫媒病毒流行情况。方法 从云南澜沧江下游地区(澜沧县和思茅市)所属乡村采集蚊虫,分类后保存于液氮。经消毒、研磨、离心等处理后接种组织培养细胞分离病毒,并进行初步鉴定。结果从233份标本中,分离到22株致C6/36细胞病变的病毒,表现为细胞圆化、聚集、脱落。分离阳性率为9.4%(22/233)。经鉴定10株对乙醚和5’-磺脱氧尿苷抵抗,为无包膜双链RNA病毒,核酸电泳为12节段RNA病毒。9株对乙醚敏感,对5’-碘脱氧尿苷抵抗,为有膜RNA病毒,核酸电泳为10条带。Colti病毒95-75单克隆抗体与新分离的12节段RNA病毒的酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验呈阳性反应,而与10节段病毒呈阴性反应。3株病毒为对乙醚敏感,其中1株被乙型脑炎病毒A2株免疫腹水中和,并与A2免疫腹水荧光试验呈阳性反应;1株(云南92-4)与布尼亚病毒组特异免疫腹水的荧光试验和ELISA试验均为强阳性,而与甲病毒组特异性免疫腹水及黄病毒组的乙型脑炎病毒免疫腹水均呈阴性反应;经负染在电镜下观察毒粒呈圆形,直径约为(87.00±0.05)nm。外层可见表面突起。结论 从云南澜沧江下游地区采集的蚊标本分离到10株Colti病毒,9株环状病毒,1株为乙脑病毒,1株为布尼亚病毒,1株尚在研究中。 展开更多
关键词 云南 澜沧江 虫媒病毒 环状病毒属 脑炎病毒 布尼亚病毒
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河北省虫媒病毒分离鉴定 被引量:32
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作者 刘卫滨 +7 位作者 杨冬荣 梁勇 俊巍 张连山 刘家伟 陶三菊 吕新军 梁国栋 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期52-55,共4页
目的 研究河北省蚊虫携带虫媒病毒情况。方法 在蚊虫孳生地采集标本液氯保存,按照20—30只/组经无菌处理后研磨,研磨液离心后接种C6/36细胞,连续三代观察致细胞病变情况;对细胞病变阳性的分离物,进行血清学和分子生物学鉴定。结... 目的 研究河北省蚊虫携带虫媒病毒情况。方法 在蚊虫孳生地采集标本液氯保存,按照20—30只/组经无菌处理后研磨,研磨液离心后接种C6/36细胞,连续三代观察致细胞病变情况;对细胞病变阳性的分离物,进行血清学和分子生物学鉴定。结果 在河北省涉县两个村共采集蚊虫1310只,分46组进行处理,共获得13株阳性分离物,其中两株分离物经间接免疫荧光检测提示为甲病毒属成员,用甲病毒属特异性引物RT-PCR扩增阳性,经核酸序列测定证实该序列与Getah病毒(AY702913.1)同源性最高(98%),初步鉴定为Getah病毒,其他病毒分离物尚在鉴定。结论 本研究从河北省蚊虫标本中分离到Getah病毒,这是我国内陆地区首次分离到该病毒。 展开更多
关键词 虫媒病毒 病毒/分离和提纯
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甘肃省天水及陇南部分地区虫媒病毒调查 被引量:33
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作者 翟友刚 +4 位作者 许海魁 孟维珊 曹玉玺 付士红 梁国栋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期95-99,共5页
目的对甘肃省天水陇南部分地区的吸血蚊虫进行病毒分离与鉴定。方法2006年8月在当地采集蚊虫标本,分离病毒和对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定,以软件进行病毒的核苷酸序列比对和系统发生分析。结果分离到19株病毒,鉴定结果显示... 目的对甘肃省天水陇南部分地区的吸血蚊虫进行病毒分离与鉴定。方法2006年8月在当地采集蚊虫标本,分离病毒和对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定,以软件进行病毒的核苷酸序列比对和系统发生分析。结果分离到19株病毒,鉴定结果显示分离株GS10-2为盖塔病毒,GS42-2为版纳病毒,其余分离株为一种基因组约8 000核苷酸的未知RNA病毒。盖塔病毒分离株3’UTR中具有与已往中国分离株相同的缺失序列和3个特异核苷酸位点。版纳病毒分离株基因组第12片段的进化关系同其它中国分离株有明显差异,位于一条独立的进化枝中。结论在该地区分离到1株盖塔病毒、1株版纳病毒和17株未知RNA病毒;盖塔病毒与以往我国分离株的遗传关系密切,版纳病毒与我国其它地区分离株有明显差异,在进化上相对独立。 展开更多
关键词 虫媒病毒 盖塔病毒 版纳病毒 序列分析 系统发生
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从中国东北地区蚊标本首次分离到新亚型Colti病毒 被引量:24
4
作者 陶三菊 蔡增林 +5 位作者 杨冬荣 范永星 范秀娟 陈伯权 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期228-230,共3页
目的 从我国东北地区媒介蚊分离新虫媒病毒。方法 采用敏感的C636 和BHK21细胞分离病毒。结果 从68 份蚊标本中分离到两株Colti 病毒,经间接免疫荧光试验观察到新分离株与已知Colti 病毒TRT2 株免疫... 目的 从我国东北地区媒介蚊分离新虫媒病毒。方法 采用敏感的C636 和BHK21细胞分离病毒。结果 从68 份蚊标本中分离到两株Colti 病毒,经间接免疫荧光试验观察到新分离株与已知Colti 病毒TRT2 株免疫腹水呈阳性反应;PAGE显示新分离株均为12 节段双链RNA,其电泳带型为651,与TRT2 株(66) 明显不同。组织培养交叉中和试验观察到新分离株不能被已知Colti 病毒TRT2 株的免疫腹水中和,同样,新分离株的免疫血清亦不能中和TRT2 株。结论 从我国东北地区首次分离到的Colti 病毒可能为我国Colti 展开更多
关键词 COLTI病毒 呼肠孤病毒科 病毒学 RNA
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钛及钛合金焊接接头的组织、性能和断裂特性 被引量:19
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作者 《焊接》 2001年第11期27-29,共3页
研究了钛及钛合金经钨极氩弧焊焊接接头的显微组织、力学性能和冲击断裂特征。焊缝区的显微组织为片状或针状α组织 ,接头强度可达到基材水平 ,并有较高的塑性和韧性 。
关键词 钛合金 焊接 组织 性能 断裂 焊接接头
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我国分离的盖塔病毒衣壳蛋白基因和3′非翻译区分子特征研究 被引量:14
6
作者 翟友刚 +1 位作者 付士红 梁国栋 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期270-275,共6页
对我国海南省和河北省分离到的3株盖塔病毒(GETV)(M1、HB0215-3和HB0234)进行衣壳蛋白基因和3′UTR区序列测定,并分析比较该病毒的分子生物学遗传特征。首先应用逆转录聚合酶链反应扩增出病毒衣壳蛋白基因和3′UTR片段,纯化后连接... 对我国海南省和河北省分离到的3株盖塔病毒(GETV)(M1、HB0215-3和HB0234)进行衣壳蛋白基因和3′UTR区序列测定,并分析比较该病毒的分子生物学遗传特征。首先应用逆转录聚合酶链反应扩增出病毒衣壳蛋白基因和3′UTR片段,纯化后连接到载体中进行测序,然后用Clastal X和DNASTAR软件对测定的核苷酸和推测的氨基酸序列进行比较分析,用MEGA软件绘制系统发生树。3株病毒衣壳蛋白基因分别由801、804和804个核苷酸组成,分别编码267、268和268个氨基酸,3株病毒之间核苷酸和氨基酸序列同源性为97.6%-100%和97.8%-100%,与其他GETV分离株核苷酸同源性在95.4%-99.6%之间。3株病毒3′UTR分别由411、401和401个核苷酸组成,发现中国株存在10个(45-54位)核苷酸缺失和2个(64位、148位)特有的核苷酸位点。进化分析表明盖塔病毒之间的进化关系与分离年代相关,中国境内流行的盖塔病毒是相对独立的一个类群。 展开更多
关键词 盖塔病毒 衣壳蛋白基因 3′非翻译区 核苷酸序列 系统发生树
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我国首次分离巴泰病毒的分子生物学鉴定 被引量:16
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作者 付士红 孙肖红 +5 位作者 环宇 曹玉玺 刘卫滨 陶三菊 梁国栋 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期331-334,共4页
目的对从云南蚊虫中分离的YN924病毒进行分子生物学鉴定,从分子生物学水平明确其分类地位。方法扩增YN924病毒的S片段并测序,通过ClustalX(1.8)、Phylip、Treeview(3.2)软件对S片段的序列进行分析,并构建种系发生树;对S片段编码产物N蛋... 目的对从云南蚊虫中分离的YN924病毒进行分子生物学鉴定,从分子生物学水平明确其分类地位。方法扩增YN924病毒的S片段并测序,通过ClustalX(1.8)、Phylip、Treeview(3.2)软件对S片段的序列进行分析,并构建种系发生树;对S片段编码产物N蛋白及NSs蛋白的氨基酸顺序进行分析。结果用两对引物均可从YN924病毒扩增出产物,序列分析发现S片段与巴泰病毒(X73464)的同源性最高,为96.4%;N蛋白、NSs蛋白的氨基酸顺序与巴泰病毒的同源性分别为99.1%和98%。结论从云南分离的YN924病毒属于巴泰病毒,我国首次对该病毒进行分子生物学鉴定。 展开更多
关键词 巴泰病毒 种系发生 生物学鉴定方法
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中国首次分离到Kadipiro病毒 被引量:16
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作者 孙肖红 孟维珊 +6 位作者 付士红 冯云 翟友刚 静林 吕新军 梁国栋 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期173-177,共5页
在云南省西北部地区进行的虫媒病毒调查中,从三带喙库蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊中分别分离到5株病毒。全部病毒在C6/36细胞上产生细胞病变,而在BHK21细胞不产生细胞病变;电子显微镜观察可见病毒颗粒呈球形,直径约70nm(n=7),无包膜、表面... 在云南省西北部地区进行的虫媒病毒调查中,从三带喙库蚊、中华按蚊和骚扰阿蚊中分别分离到5株病毒。全部病毒在C6/36细胞上产生细胞病变,而在BHK21细胞不产生细胞病变;电子显微镜观察可见病毒颗粒呈球形,直径约70nm(n=7),无包膜、表面存在明显刺状突起;聚丙烯酰胺凝胶电泳显示分离的病毒为12节段双链RNA病毒,病毒基因组带形呈6-5-1分布;用Kadipiro病毒的特异性引物可以扩增到目的条带,基因组第12节段全长758nt,与Kadipiro病毒原型株JKT-7075的同源性为90%,遗传进化分析显示在云南蚊虫分离的5株病毒均为呼肠孤病毒科(Reoviridae)东南亚十二节段RNA病毒属(Seadornavirus)Kadipiro病毒。本文为我国Kadipiro病毒分离的首次报道。 展开更多
关键词 Kadipiro病毒 分离 鉴定
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新疆分离的0507JS60鉴定为辽宁病毒 被引量:14
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作者 吕新军 吕志 +6 位作者 孙肖红 付士红 童苏祥 张松 Attoui H 梁国栋 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期438-442,共5页
0507JS60是从中国新疆喀什地区采集的库蚊标本分离的病毒株,可以在C6/36细胞上稳定传代。电镜观察显示完整病毒颗粒呈球形,直径55nm(n=10),无包膜,衣壳表面壳粒结构非常清晰。基因组核酸电泳显示基因组包括12条双链RNA(Double stranded ... 0507JS60是从中国新疆喀什地区采集的库蚊标本分离的病毒株,可以在C6/36细胞上稳定传代。电镜观察显示完整病毒颗粒呈球形,直径55nm(n=10),无包膜,衣壳表面壳粒结构非常清晰。基因组核酸电泳显示基因组包括12条双链RNA(Double stranded RNA,dsRNA)片段。病毒第12基因片段序列测定结果显示该片段全长760bp(GenBankID:FJ157354),具有长度为525bp的单一开放读码框(Single open reading frame,ORF),编码长度为174个氨基酸的蛋白,分子量约18.9kD。病毒第12基因片段序列比对显示与辽宁病毒(Liaoning virus,LNV)核酸序列同源性大于89,氨基酸序列同源性大于91。病毒第12基因片段系统进化分析显示该病毒与LNV病毒位于同一进化分枝内,与LNV-NE9712病毒株进化关系更接近。0507JS60经系统鉴定为LNV,这是首次在东北以外的地区分离到该病毒。 展开更多
关键词 辽宁病毒 新疆 蚊虫
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Banna病毒TaqMan探针法RT-PCR检测方法的建立 被引量:8
10
作者 徐丽宏 曹玉玺 +8 位作者 何丽芳 何英 付士红 孙肖红 环宇 刘卫滨 力华 梁国栋 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期47-51,共5页
目的建立Banna病毒核酸特异的快速、敏感的TaqMan探针RT-PCR检测方法。方法首先对从GenBank中检索到的所有Banna病毒的序列进行同源性分析及引物、探针的设计。病毒在BHK21细胞或C6/36细胞上繁殖扩增后提取病毒RNA和逆转录。以cDNA为模... 目的建立Banna病毒核酸特异的快速、敏感的TaqMan探针RT-PCR检测方法。方法首先对从GenBank中检索到的所有Banna病毒的序列进行同源性分析及引物、探针的设计。病毒在BHK21细胞或C6/36细胞上繁殖扩增后提取病毒RNA和逆转录。以cDNA为模板分别进行TaqMan探针法RT-PCR和传统的PCR检测,并对方法的种内广谱性和特异性、检测灵敏性以及用于蚊虫和临床标本的适用性等进行评价。结果Banna病毒核酸特异的TaqMan探针RT-PCR检测方法具有较好的种内广谱性和特异性,可以检出所有12株Banna病毒,而其他虫媒病毒如辛德毕斯病毒、乙型脑炎病毒、batai病毒和环状病毒检测结果均为阴性。与传统PCR相比,敏感性高100倍以上,可以检出每50μl标本中含有0·5CCID50的Banna病毒。单链RNA变性条件(65℃)进行逆转录使检测结果的敏感性比99℃变性法最少低10倍。病毒在室温保存1天和4℃保存1周后,检出敏感性会比原来低10倍左右。该方法在检测模拟感染Banna病毒的人血清标本以及蚊虫标本时,均显示出较好的特异性。112份蚊标本中检出6份标本阳性,4份可疑阳性,病毒分离结果3份阳性。结论本实验成功建立了Banna病毒特异性核酸的TaqMan探针RT-PCR检测方法,并初步证实可用于血清标本和媒介蚊虫标本的检测,为开展Banna病毒的流行监测及临床早期诊断提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 虫媒病毒 Taq聚合酶 聚合酶链反应
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Colti病毒抗原制备、保存及其在检测患者血清Colti病毒抗体中的应用 被引量:10
11
作者 陶三菊 +5 位作者 曹玉玺 杨冬荣 徐丽宏 何英 陈伯权 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期232-235,共4页
目的 获得较高滴度和稳定的Colti病毒抗原 ,进一步开展Colti病毒感染的血清学诊断。方法 用C6 36细胞培养Colti病毒 ,于不同时间收获后进行病毒滴度测定。病毒经聚乙二醇(PEG)纯化浓缩后抗原分别保存于 - 2 0℃和 4℃备用。利用该抗... 目的 获得较高滴度和稳定的Colti病毒抗原 ,进一步开展Colti病毒感染的血清学诊断。方法 用C6 36细胞培养Colti病毒 ,于不同时间收获后进行病毒滴度测定。病毒经聚乙二醇(PEG)纯化浓缩后抗原分别保存于 - 2 0℃和 4℃备用。利用该抗原采用ELISA法检测患者血清标本的Colti病毒抗体。结果 在制备Colti病毒抗原时 ,以细胞培养 3~ 4周的病毒滴度最高 ,经PEG纯化浓缩的抗原于 - 2 0℃和 4℃条件下 ,保存 6个月 ,其抗原滴度仍保持在较高水平。特别是加入甘油的抗原无论在 - 30℃ ,还是在 4℃下 ,甚至可保存 2年。用这些抗原 ,检测疑似乙型脑炎或病毒性脑炎患者标本 114 1份 ,Colti病毒IgM抗体阳性 130例 ,阳性率为 11.4 % (130 114 1) ,特别是检测广州市儿童医院患者标本 4 1份 ,9份Colti病毒抗体阳性 ,阳性率为 2 2 .0 % ,其中 5例临床诊断为病毒性脑炎。结论 为建立检测Colti病毒抗体及诊断试剂盒提供了较稳定的抗原 ,Colti病毒可能是引起我国夏、秋季脑炎的又一重要病原。 展开更多
关键词 COLTI病毒 抗原 制备 保存 血清学诊断
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我国Colti病毒基因分型的研究 被引量:10
12
作者 徐丽宏 陶三菊 +5 位作者 曹玉玺 杨冬荣 何英 陈伯权 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期346-350,共5页
目的 对我国分离的Colti病毒进行基因分型。方法 采用针对Colti病毒B2亚组第9和12片段和B1亚组第12片段的3对引物,对我国近年来分离的Colti病毒利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行基因分型。同时对北京分离株BJ95-75和云南分离株Y... 目的 对我国分离的Colti病毒进行基因分型。方法 采用针对Colti病毒B2亚组第9和12片段和B1亚组第12片段的3对引物,对我国近年来分离的Colti病毒利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行基因分型。同时对北京分离株BJ95-75和云南分离株YN-6的PCR产物进行了克隆测序及同源性分析。结果 Colti病毒北京分离株BJ95-75、云南分离株YN-6、-67-1、-68-1、-69、-70-1、-70-2、-90、-92-2、-93病毒用B2亚组特异引物12-854-S/12-B2-R均能得到相对分子质量为850 bp的特异条带,用针对于第9片段的B2亚组引物9-JKT-S/9-JKT-R均得到了相对分子质量为492 bp的特异条带。而Colti病毒东北分离株NE97-12、NE97-31及对照病毒如环状病毒YN-99、乙脑病毒YN-151-1未能扩出特异条带。所有Colti病毒分离株及病毒对照用B1亚组特异引物12-B1-S/12-B1-R均未见特异条带。BJ95-75、YN-6这2株病毒第12片段核苷酸序列与B2亚组其他毒株间的同源性达到89.4%以上,特别是与中国早期分离株Banna病毒,其同源性达到98.9%以上;2株病毒第9片段的核苷酸序列与属于B2a型的Banna病毒的同源性可达到99.2%和96.5%,和JKT6423病毒的同源性也能达到84.0%,而与属于B2b型的JKT6969和JKT7043相应片段核苷酸序列的同源性只有53.0%左右。结论 展开更多
关键词 中国 COLTI病毒 基因分型 核苷酸
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预氧化快速气体渗氮新工艺 被引量:11
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作者 代立新 马占坡 《金属热处理》 CAS CSCD 北大核心 1997年第9期30-31,共2页
预氧化快速气体渗氮新工艺甘肃天水锻压机床厂(天水741020)代立新马占坡甘肃工业大学机械系王焕琴一般气体渗氮工艺由于周期长、能耗大、成本高,影响其广泛应用。为此,我们试验了预氧化多段变温快速气体渗氮新工艺,对剪板机... 预氧化快速气体渗氮新工艺甘肃天水锻压机床厂(天水741020)代立新马占坡甘肃工业大学机械系王焕琴一般气体渗氮工艺由于周期长、能耗大、成本高,影响其广泛应用。为此,我们试验了预氧化多段变温快速气体渗氮新工艺,对剪板机、折弯机的柱塞、导杆及齿轮等零件进... 展开更多
关键词 预氧化 气体渗氮 渗氮
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Colti病毒的分离及其生物学性状 被引量:9
14
作者 陶三菊 何英 +4 位作者 陈伯权 赵子江 杨冬荣 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期363-365,共3页
1994年夏秋季从北京郊区采集的蚊子中分离到两株Colti病毒(北京95-70和北京95-75)。病毒在C6/36细胞引起明显的细胞病变,但在BHK-21和Vero细胞未见明显病变。对5’-碘脱氧尿苷和乙醚抵抗,表明... 1994年夏秋季从北京郊区采集的蚊子中分离到两株Colti病毒(北京95-70和北京95-75)。病毒在C6/36细胞引起明显的细胞病变,但在BHK-21和Vero细胞未见明显病变。对5’-碘脱氧尿苷和乙醚抵抗,表明为无包膜RNA病毒;对酸敏感,在pH3.0条件下病毒滴度降低3.5~4.5个对数以上。聚丙烯酰胺凝胶电泳显示病毒基因组为12节段RNA,两株病毒的电泳带型完全相同,与1991年分离的Colti病毒TRT2株带型基本一致,皆为6-6带型,但仔细比较至少有8条带的迁移率存在着细微差别。组织培养交叉中和试验表明,新分离株与TRT2株的抗原性未见明显差异,可能属同一血清型。病毒在C6/36细胞繁殖可能造成持续感染。 展开更多
关键词 COLTI病毒 呼肠病毒科/分离 蚊/病毒学 RNA.病毒
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一种引起脑炎、无名热的新病毒——Colti病毒的发现 被引量:8
15
作者 陶三菊 徐普庭 +5 位作者 陈伯权 杨冬荣 徐丽宏 宋立亭 游志勇 《医学研究杂志》 2006年第2期32-33,共2页
关键词 COLTI病毒 新病毒 无名热 脑炎 澜沧江下游地区 病毒分离 首次报道 西双版纳 脑脊液 版纳猪
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在内蒙古蚊虫中分离到版纳病毒 被引量:8
16
作者 曹玉玺 付士红 +6 位作者 田兆丰 何英 环宇 杨红梅 涛波 梁国栋 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期106-108,共3页
目的鉴定内蒙古通辽市分离的虫媒病毒。方法使用血清学及分子生物学方法鉴定内蒙古蚊虫标本分离的病毒,对毒株的部分核苷酸序列进行测定,应用Clustal X软件做碱基配对分析,MEGA软件完成病毒进化分析,DNAStar软件包中的MegAlign完成... 目的鉴定内蒙古通辽市分离的虫媒病毒。方法使用血清学及分子生物学方法鉴定内蒙古蚊虫标本分离的病毒,对毒株的部分核苷酸序列进行测定,应用Clustal X软件做碱基配对分析,MEGA软件完成病毒进化分析,DNAStar软件包中的MegAlign完成核苷酸和氨基酸同源性分析。结果在内蒙古通辽市采集凶小库蚊标本分离的病毒经过血清学和分子生物学实验鉴定为版纳病毒(Banna virus,BAV),与版纳病毒部分中国分离株位于同一进化分支中,病毒第12片段核苷酸同源性为89.6%~98.4%,氨基酸同源性为90.4%~98.6%。结论在内蒙古凶小库蚊标本中分离到版纳病毒。 展开更多
关键词 科蜱病毒属 种系发生 序列分析
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河南省唐河县分离到基因1型乙型脑炎病毒 被引量:8
17
作者 环宇 郝宗宇 +8 位作者 付士红 张爱梅 曹玉玺 宋付党 李林红 何英 唐青 梁国栋 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期83-86,共4页
目的从河南省唐河县采集的蚊虫标本中分离乙型脑炎病毒(JEV)并确定其基因分型及E基因区段氨基酸序列特征。方法对2004年采集蚊虫标本进行病毒分离,对新分离的乙脑病毒进行生物学、血清学及分子生物学鉴定。逆转录聚合酶链反应(RT-PC... 目的从河南省唐河县采集的蚊虫标本中分离乙型脑炎病毒(JEV)并确定其基因分型及E基因区段氨基酸序列特征。方法对2004年采集蚊虫标本进行病毒分离,对新分离的乙脑病毒进行生物学、血清学及分子生物学鉴定。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增新分离JEV的PrM、E区段核苷酸序列,测序后应用Clustal X软件做碱基配对分析,MEGA3.1完成病毒进化分析,GENEDOS(3.2)软件完成氨基酸位点分析。结果共采集3722只蚊虫标本,包括:库蚊、骚扰阿蚊、伊蚊及按蚊。从库蚊标本中分离到3株属于基因1型的乙脑病毒,E区段核苷酸和氨基酸与减毒活疫苗株SA14-14-2株的同源性分别为86.9%-87.7%,氨基酸同源性为95.2%-97.0%,存在12处共同的氨基酸位点差异。结论从河南省唐河县首次分离到基因1型的乙脑病毒。E基因与疫苗株相比有部分氨基酸差异,但现行疫苗株理论上可以保护新分离乙脑病毒。 展开更多
关键词 脑炎病毒 日本 基因分型 种系发生
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甘肃省分离的版纳病毒具有显著地域特征 被引量:8
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作者 翟友刚 +7 位作者 于德山 李国太 蒋建祥 贾玉新 阎峻 何英 付士红 梁国栋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期304-309,共6页
目的对2007年在甘肃省平凉地区农村人房、猪舍和牛棚采集的蚊虫中分离的版纳病毒进行鉴定并对病毒基因组第12片段进行测序和分析。方法2007年8月在平凉市采集蚊虫标本,对标本进行病毒分离并对分离物进行系统鉴定,测定分离到的版纳病毒... 目的对2007年在甘肃省平凉地区农村人房、猪舍和牛棚采集的蚊虫中分离的版纳病毒进行鉴定并对病毒基因组第12片段进行测序和分析。方法2007年8月在平凉市采集蚊虫标本,对标本进行病毒分离并对分离物进行系统鉴定,测定分离到的版纳病毒第12片段序列,以软件进行病毒的序列比对、同源性和系统发生分析。结果共采集到蚊虫标本2926只,从中分离到11株致C6/36细胞产生规律病变的分离物,其中3株能引起BHK-21细胞病变。鉴定结果显示共分离到9株版纳病毒。RNA-PAGE结果显示9株版纳病毒基因组带型与对照株BJ95-75的一致,但第6片段与对照相比稍小。新分离版纳病毒第12片段核苷酸序列同源性在99.5%~100%之间,与其他分离株的同源性为88.6%~97.6%(核苷酸)和85.5%~97.1%(氨基酸)。基于版纳病毒第12片段核苷酸序列的系统发生分析显示,甘肃省分离株处于中国株进化支中的一个独立分支,与其它地区分离株具有明显的差异。结论再次从甘肃省的蚊虫标本中分离到多株版纳病毒,基因序列和系统发生分析显示甘肃省分离株在进化上相对独立,具有显著的地域特征,可能属于版纳病毒中的一个新亚型。 展开更多
关键词 版纳病毒 VP12 序列分析 系统发生
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从滇西北地区首次分离到版纳病毒 被引量:7
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作者 孙肖红 付士红 +5 位作者 静林 吕新军 何英 翟友刚 梁国栋 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期495-498,共4页
目的对滇西北地区分离的版纳病毒进行系统鉴定,明确与云南其他地区分离株的差异。方法对2005、2006年从滇西北地区分离的3株版纳病毒进行形态学、基因组带型和分子生物学鉴定,测定第12片段核苷酸序列,进行序列的同源性和系统进化分... 目的对滇西北地区分离的版纳病毒进行系统鉴定,明确与云南其他地区分离株的差异。方法对2005、2006年从滇西北地区分离的3株版纳病毒进行形态学、基因组带型和分子生物学鉴定,测定第12片段核苷酸序列,进行序列的同源性和系统进化分析。结果从2005、2006年滇西北蚊虫标本中分离到的3株版纳病毒为直径约70nm、无包膜、有双层衣壳的球形颗粒,基因组带型为6-6分布。3株版纳病毒间第12片段核苷酸序列同源性为99%,与云南其他地区和印度尼西亚版纳病毒毒株的最大同源性分别为98%和90%;系统进化分析显示滇西北分离株和云南其他地区分离株共同形成一个分枝;第12片段编码的氨基酸序列比较发现我国版纳分离株和印度尼西亚毒株间存在共同的氨基酸残基差异。结论首次从滇西北地区蚊虫中分离到3株版纳病毒,基因序列分析显示滇西北分离株和云南其他地区分离株同源性较高。 展开更多
关键词 版纳病毒 系统进化分析 形态学 分子生物学
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在我国北方涉县首次检测到盖塔病毒 被引量:5
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作者 梁勇 张连山 +9 位作者 刘永为 峻巍 董运强 志强 翟友刚 刘卫滨 杨冬荣 陶三菊 梁国栋 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第9期2121-2123,共3页
目的:确定从河北省涉县蚊体中分离到的病毒种类。方法:采集三带喙库蚊标本,液氮运输和保存,10只为一组研磨后接种C6/36细胞分离病毒。病毒株分别采用乙醚试验、免疫荧光试验和分子生物学试验进行毒株鉴定。结果:采集到蚊标本1290只,标... 目的:确定从河北省涉县蚊体中分离到的病毒种类。方法:采集三带喙库蚊标本,液氮运输和保存,10只为一组研磨后接种C6/36细胞分离病毒。病毒株分别采用乙醚试验、免疫荧光试验和分子生物学试验进行毒株鉴定。结果:采集到蚊标本1290只,标本处理后接种细胞47批,病毒分离结果得到13株阳性分离物(毒株),经乙醚试验和免疫荧光试验初步鉴定HB0215-3和HB0234两株病毒为披膜病毒科甲病毒属成员,再经RT-PCR、核酸序列测定和分析,证实两株病毒核酸与国际基因库中的AY702913和NC-006558盖塔病毒同源性最高,被进一步鉴定为盖塔病毒。结论:该研究从河北省涉县三带喙库蚊中分离到了盖塔病毒,这是我国内陆地区北方首次分离到。 展开更多
关键词 盖塔病毒 甲病毒属 病毒分离 序列测定和分析
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