目的:对纤维连接蛋白(FN)包被和未包被两种方式培养的肠神经干细胞进行生物学特性比较,探索肠神经干细胞体外扩增合适的培养方式。方法:从孕15 d SD胎鼠肠管分离出肠神经干细胞,用FN包被和不包被两种方式原代培养第5天的神经球,通过形...目的:对纤维连接蛋白(FN)包被和未包被两种方式培养的肠神经干细胞进行生物学特性比较,探索肠神经干细胞体外扩增合适的培养方式。方法:从孕15 d SD胎鼠肠管分离出肠神经干细胞,用FN包被和不包被两种方式原代培养第5天的神经球,通过形态学、免疫荧光细胞化学及流式细胞仪检测对其生长状态、增殖及分化能力进行比较。结果:与包被组相比,未包被组的原代培养第5天的神经球呈半贴壁生长,球体形态较规则,球体中央开始变黑,神经球周边未形成大量放射状的神经丝;荧光镜下发现2组原代神经球的Nestin、Brd U都显阳性;包被组的球体周围放射状神经丝Tuj-1显阳性。流式细胞仪检测结果显示,与包被组的(12.67±2.16)%相比,未包被组的Nestin阳性细胞百分比显著增高,为(20.69±2.15)%(P<0.05);与包被组的(12.69±1.13)%相比,未包被组的Brd U标记的增殖细胞百分比显著增加,为(35.82±2.11)%(P<0.05);与包被组的(21.77±2.53)%相比,未包被组的Tuj-1阳性细胞百分比显著减少,为(10.67±1.14)%(P<0.05)。结论:未包被FN的体外培养加快了形成神经球的时间,且形态较规则,能较好地维持干细胞自我增殖,减少分化,适宜作为肠神经干细胞体外增殖培养方式。展开更多
文摘目的:对纤维连接蛋白(FN)包被和未包被两种方式培养的肠神经干细胞进行生物学特性比较,探索肠神经干细胞体外扩增合适的培养方式。方法:从孕15 d SD胎鼠肠管分离出肠神经干细胞,用FN包被和不包被两种方式原代培养第5天的神经球,通过形态学、免疫荧光细胞化学及流式细胞仪检测对其生长状态、增殖及分化能力进行比较。结果:与包被组相比,未包被组的原代培养第5天的神经球呈半贴壁生长,球体形态较规则,球体中央开始变黑,神经球周边未形成大量放射状的神经丝;荧光镜下发现2组原代神经球的Nestin、Brd U都显阳性;包被组的球体周围放射状神经丝Tuj-1显阳性。流式细胞仪检测结果显示,与包被组的(12.67±2.16)%相比,未包被组的Nestin阳性细胞百分比显著增高,为(20.69±2.15)%(P<0.05);与包被组的(12.69±1.13)%相比,未包被组的Brd U标记的增殖细胞百分比显著增加,为(35.82±2.11)%(P<0.05);与包被组的(21.77±2.53)%相比,未包被组的Tuj-1阳性细胞百分比显著减少,为(10.67±1.14)%(P<0.05)。结论:未包被FN的体外培养加快了形成神经球的时间,且形态较规则,能较好地维持干细胞自我增殖,减少分化,适宜作为肠神经干细胞体外增殖培养方式。
