目的观察靶向抑制livin基因后结肠癌细胞HCT116对伊立替康敏感性的变化。方法采用脂质体包裹方法将载体介导的靶向livin基因的短发夹干扰RNA(a short hairpin RNA,shRNA)转入结肠癌细胞HCT116,48h后蛋白印迹方法检测RNA干扰的生物学效应...目的观察靶向抑制livin基因后结肠癌细胞HCT116对伊立替康敏感性的变化。方法采用脂质体包裹方法将载体介导的靶向livin基因的短发夹干扰RNA(a short hairpin RNA,shRNA)转入结肠癌细胞HCT116,48h后蛋白印迹方法检测RNA干扰的生物学效应,应用伊立替康0.01、0.1、1、10μg/mL梯度浓度作用于结肠癌细胞,24 h后MTT方法检测抑制livin基因表达后结肠癌细胞对伊立替康的敏感性变化,分光光度法检测结肠癌细胞内凋亡相关因子caspase-3活性的改变。结果靶向livin的shRNA有效地抑制了结肠癌细胞HCT116内livin基因的表达,抑制livin基因表达后结肠癌细胞对伊立替康的敏感性得到明显提高,细胞内的caspase-3活性显著增强。结论靶向抑制livin基因表达后能够激活细胞凋亡信号通路,增强伊立替康的抗结肠癌作用。展开更多
文摘目的观察靶向抑制livin基因后结肠癌细胞HCT116对伊立替康敏感性的变化。方法采用脂质体包裹方法将载体介导的靶向livin基因的短发夹干扰RNA(a short hairpin RNA,shRNA)转入结肠癌细胞HCT116,48h后蛋白印迹方法检测RNA干扰的生物学效应,应用伊立替康0.01、0.1、1、10μg/mL梯度浓度作用于结肠癌细胞,24 h后MTT方法检测抑制livin基因表达后结肠癌细胞对伊立替康的敏感性变化,分光光度法检测结肠癌细胞内凋亡相关因子caspase-3活性的改变。结果靶向livin的shRNA有效地抑制了结肠癌细胞HCT116内livin基因的表达,抑制livin基因表达后结肠癌细胞对伊立替康的敏感性得到明显提高,细胞内的caspase-3活性显著增强。结论靶向抑制livin基因表达后能够激活细胞凋亡信号通路,增强伊立替康的抗结肠癌作用。