硒抗病毒作用研究进展 被引量：9

1

作者 王易龙 杨陟华 朱茂祥 《中国公共卫生》 CSCD 北大核心 2021年第10期1580-1584,共5页

硒是人体必需微量元素,在体内以硒代半胱氨酸形式编码合成硒蛋白发挥作用。硒及硒蛋白具有抗氧化、免疫调节等广泛生理功能,缺硒与心脑血管疾病、癌症、糖尿病、神经系统疾病、自身免疫性疾病以及传染病等40多种人类疾病有关。硒营养状... 硒是人体必需微量元素,在体内以硒代半胱氨酸形式编码合成硒蛋白发挥作用。硒及硒蛋白具有抗氧化、免疫调节等广泛生理功能,缺硒与心脑血管疾病、癌症、糖尿病、神经系统疾病、自身免疫性疾病以及传染病等40多种人类疾病有关。硒营养状况与病毒性疾病密切相关,缺硒导致机体氧化还原及免疫调节失衡,促进病毒感染和复制。缺硒引起氧化应激增加病毒基因组突变率。感染病毒的宿主启动抗氧化和免疫应答反应消耗大量硒,病毒本身表达硒蛋白竞争宿主硒源的同时负反馈调节抑制病毒复制。硒作为治疗药物时,应综合考虑患者硒安全剂量水平以及不同硒化合物的毒性差异。最新研究提示硒状态与新型冠状病毒的感染和病程有关,未来需要结合更多的临床和基础研究数据,探索硒对新冠肺炎(COVID-19)在内的病毒感染疾病的影响。 展开更多

关键词 硒 硒蛋白 病毒硒学说 新型冠状病毒肺炎

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氡暴露小鼠损伤病理及肺组织免疫细胞反应

2

作者 王美玉 刘慧蒙 +3 位作者 王志鑫 郭浩鑫 王易龙 朱茂祥 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第2期156-163,共8页

为探索小鼠氡暴露后不同时间机体损伤及肺组织免疫细胞反应,将BALB/c雌性小鼠饲养于多功能氡室进行连续氡吸入.分别在暴露后15、30、60 d进行呼吸功能评价,采集外周血进行血细胞和血液生化指标检测,取肺组织进行病理形态观察,取T淋巴细... 为探索小鼠氡暴露后不同时间机体损伤及肺组织免疫细胞反应,将BALB/c雌性小鼠饲养于多功能氡室进行连续氡吸入.分别在暴露后15、30、60 d进行呼吸功能评价,采集外周血进行血细胞和血液生化指标检测,取肺组织进行病理形态观察,取T淋巴细胞及其亚群等免疫细胞活化测定.结果显示:氡暴露小鼠出现体质量下降、白细胞减少、电解质代谢紊乱、脂质代谢异常等明显毒性反应,观察到呼吸功能异常及肺组织不同程度病变,且早期肺组织炎性反应明显,主要表现在T淋巴细胞亚群失衡及其活化.这说明氡暴露小鼠存在明显机体不良反应.本研究可为氡吸入的危害评价与医学防护研究提供实验依据. 展开更多

关键词 氡暴露 肺损伤病理 呼吸功能 免疫细胞反应

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TGF-β3对辐射致肺上皮细胞损伤的保护作用及其机制研究

3

作者 鄢成名 杨陟华 +7 位作者 王易龙 耿爽 刘奔波 王志鑫 李倩 王美玉 郭浩鑫 朱茂祥 《军事医学》 CAS CSCD 2023年第1期20-25,共6页

目的探索转化生长因子-β3(TGF-β3)在辐射致肺上皮细胞损伤中的作用及其可能机制,为放射性肺损伤的防治提供实验依据。方法设计合成并筛选Ⅱ型转化生长因子-β受体(TGFBR2)的小干扰RNA(siRNA),用于细胞TGFBR2干涉;将体外培养的人支气... 目的探索转化生长因子-β3(TGF-β3)在辐射致肺上皮细胞损伤中的作用及其可能机制,为放射性肺损伤的防治提供实验依据。方法设计合成并筛选Ⅱ型转化生长因子-β受体(TGFBR2)的小干扰RNA(siRNA),用于细胞TGFBR2干涉;将体外培养的人支气管上皮细胞(Beas-2B细胞)及其TGFBR2干涉细胞随机分为对照组、5 ng/ml TGF-β3处理组(TGF-β3组)、6 Gy60Co-γ射线单次照射组(6 Gy组)、6 Gy60Co-γ射线单次照射+5 ng/ml TGF-β3处理组(6 Gy+TGF-β3组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组胶原蛋白和TGFBR2的表达,RT-qPCR和Western印迹检测上皮间质转化(EMT)相关标志物平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期。结果(1)TGF-β3对辐射诱发的细胞胶原蛋白表达增高有明显抑制作用,并可降低辐射所致细胞EMT相关标志物α-SMA基因和蛋白水平的异常高表达,有效保护辐射所致肺组织细胞纤维化改变;(2)TGF-β3可抑制辐射诱导的细胞TGFBR2异常高表达,并对辐射诱发的细胞凋亡和细胞周期G2/M期阻滞均有明显保护作用;(3)对细胞TGFBR2干涉后,TGF-β3对辐射所致细胞凋亡和细胞周期G2/M期阻滞的保护作用丧失,抑制辐射所致肺上皮细胞损伤。结论TGF-β3通过TGFBR2保护辐射损伤的肺上皮细胞。 展开更多

关键词 转化生长因子-Β3 Ⅱ型转化生长因子-β受体 电离辐射 肺上皮细胞损伤 肌动蛋白类 细胞凋亡 细胞周期

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^(60)Coγ射线照射的小鼠肺上皮MLE-12细胞分泌的外泌体对T淋巴细胞的活化作用

4

作者 王志鑫 王美玉 +4 位作者 郭浩鑫 杜丽 王易龙 杨陟华 朱茂祥 《国际放射医学核医学杂志》 2023年第4期220-228,共9页

目的探讨小鼠肺上皮MLE-12细胞(简称MLE-12细胞)受到^(60)Coγ射线照射后分泌的外泌体介导的T细胞活化。方法将MLE-12细胞分为对照组和^(60)Coγ射线照射组(2、4、6和8 Gy),采用超速离心法分别从其培养液的上清液中提取外泌体,应用透射... 目的探讨小鼠肺上皮MLE-12细胞(简称MLE-12细胞)受到^(60)Coγ射线照射后分泌的外泌体介导的T细胞活化。方法将MLE-12细胞分为对照组和^(60)Coγ射线照射组(2、4、6和8 Gy),采用超速离心法分别从其培养液的上清液中提取外泌体,应用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析技术确定外泌体的形态结构和数量特征,采用蛋白质印迹法(WB)检测外泌体中溶酶体相关膜蛋白3(CD63)、四次跨膜蛋白28(CD81)、肿瘤易感基因101蛋白(TSG101)、Ⅰ型内质网膜蛋白(Calnexin)的表达,采用流式细胞术(FCM)检测外泌体表面Ⅰ类主要组织相容性复合体(MHCⅠ)、Ⅱ类主要组织相容性复合体(MHCⅡ)、免疫调节蛋白B7-1(CD80)和免疫调节蛋白B7-2(CD86)的表达水平。将从小鼠脾脏中分离出来的初始T细胞分别与对照组MLE-12细胞(简称NC MLE-12)分泌的外泌体(简称exo/NC-MLE)、6 Gyγ射线照射组的MLE-12细胞(简称IR MLE-12)分泌的外泌体(简称exo/IR-MLE)共培养,采用FCM检测T细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)及其活化指标T细胞特定表面糖蛋白CD28和早期活化抗原1(CD69)的变化;将初始T细胞分别与NC MLE-12、IR MLE-12和外泌体抑制剂GW4869处理组的MLE-12细胞共培养,采用FCM检测T细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)及其活化指标CD28和CD69的变化。2组间比较采用两独立样本t检验,多组间比较采用方差分析法,组间两两比较采用Bonferroni调整法。结果MLE-12细胞分泌的外泌体显示出典型的一面凹陷的茶托样结构,粒径为30~150 nm;WB结果显示,与MLE-12细胞相比,其外泌体中特异性标志物CD63、CD81和TSG101高表达,而阴性标志物Calnexin低表达。与对照组相比,在6 Gyγ射线照射后不同时间,单个MLE-12细胞分泌的外泌体数量于24、48 h时均增加(t=5.36、6.66,均P<0.05);在不同剂量γ射线照射后24 h,单个MLE-12细胞分泌的外泌体数量增加的现象具有剂量-效应关系,在照射剂量为6、8 Gy时,� 展开更多

关键词 辐射 肺泡上皮细胞 外泌体 T淋巴细胞 抗原呈递

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用于铀污染去除的接枝4-磺酸杯[6]芳烃的棉纤维制备

5

作者 郭浩鑫 王易龙 +11 位作者 郑泽宝 刘坤璐 黄荣清 郑志兵 黄波 王志鑫 王美玉 刘奔波 陈果 王旭 杨陟华 朱茂祥 《中国辐射卫生》 2023年第6期603-610,共8页

目的 基于杯芳烃对铀酰离子的特异性络合作用,合成一种接枝杯芳烃磺酸基衍生物的棉纤维,用于铀污染的吸附去除。方法 采用化学接枝的方法在棉纤维上与溴异丁酰溴(BIBB)、甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)、4-磺酸杯[6]芳烃(S-C[6]a)逐步反应,... 目的 基于杯芳烃对铀酰离子的特异性络合作用,合成一种接枝杯芳烃磺酸基衍生物的棉纤维,用于铀污染的吸附去除。方法 采用化学接枝的方法在棉纤维上与溴异丁酰溴(BIBB)、甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)、4-磺酸杯[6]芳烃(S-C[6]a)逐步反应,通过扫描电子显微镜(SEM)、X射线光电子能谱(XPS)、红外光谱(FTIR)表征其结构。使用Franz扩散池模拟皮肤污染,激光液体荧光法测定铀含量。结果 SEM、XPS、FTIR表征结果显示棉纤维与4-磺酸杯[6]芳烃成功接枝;4-磺酸杯[6]芳烃棉纤维对硝酸铀酰溶液吸附的最适pH为4.0,时间为20 min,吸附剂用量为20 mg,吸附过程更符合伪二级动力学吸附,4-磺酸杯[6]芳烃棉纤维在溶液中的吸附率为78.46%,对皮肤铀污染的去污效率为81.72%。结论 成功合成了4-磺酸杯[6]芳烃棉纤维,且4-磺酸杯[6]芳烃棉纤维对可溶性铀的吸附和皮肤铀污染去除有显著效果。 展开更多

关键词 铀污染 杯芳烃 皮肤去污

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γ射线胸部照射小鼠早期肺组织的免疫细胞反应 被引量：4

6

作者 郗停停 耿爽 +4 位作者 孙泽文 王易龙 杨陟华 潘秀颉 朱茂祥 《国际放射医学核医学杂志》 2020年第5期286-290,共5页

目的探索γ射线胸部照射小鼠早期肺组织免疫相关T淋巴细胞反应。方法将112只C57BL/6雄性小鼠[6~8周龄,(20±2)g]采用随机数字表法随机分为14组(照射组和对照组各7组),每组8只。照射组小鼠进行单次20 Gy 60Coγ射线胸部照射,分别在... 目的探索γ射线胸部照射小鼠早期肺组织免疫相关T淋巴细胞反应。方法将112只C57BL/6雄性小鼠[6~8周龄,(20±2)g]采用随机数字表法随机分为14组(照射组和对照组各7组),每组8只。照射组小鼠进行单次20 Gy 60Coγ射线胸部照射,分别在照射后第3、12小时和第1、2、3、7、14天用流式细胞仪检测肺组织的白细胞、T淋巴细胞(CD3+)及其CD4+和CD8+亚群、调节性T细胞(Treg)等免疫细胞比例的变化。两组间比较采用t检验。结果照射后的小鼠肺组织白细胞显著降低(t=3.446~7.781,均P<0.01);CD3+T细胞在照射后早期(第3小时至第2天)降低明显(t=4.413~15.430,均P<0.01);Treg(CD4+CD25+Foxp3+)显著升高(t=2.813~4.406,均P<0.05);CD4+在照射后早期(第3小时和第12小时)减少(t=5.019、4.912,均P<0.01),1 d后恢复至对照组水平;CD8+在照射后早期(第3小时和第12小时)无明显变化,第1天和第3天降低明显(t=6.736、4.738,均P<0.01),第7天后升高(t=7.537、3.903,均P<0.01);CD4+/CD8+比值在照射后12 h内降低(t=5.624、4.083,均P<0.01),第1天和第3天升高明显(t=13.410、5.702,均P<0.01),但7 d后又下降(t=5.505、3.928,均P<0.01)。结论胸部照射小鼠早期肺组织免疫相关细胞呈现各种不同变化,这可能与辐射导致免疫细胞损伤以及机体应激反应产生的免疫应答有关。 展开更多

关键词 辐射 电离 肺损伤 免疫反应 T淋巴细胞 调节性

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补体在放射性肺损伤中的作用与机制 被引量：2

7

作者 耿爽 李倩 +8 位作者 郗停停 王美玉 郭浩鑫 王志鑫 毕晓光 鄢成名 杨陟华 王易龙 朱茂祥 《中国辐射卫生》 2022年第5期535-541,共7页

目的探明补体在^(60)Coγ射线单次20 Gy胸部照射所致小鼠放射性肺损伤中的作用。方法^(60)Coγ射线单次20 Gy胸部照射C57BL/6小鼠,观察早期(15 d内)肺组织炎性反应和后期(30 d、180 d)肺纤维化,ELISA测定照射后1 d、3 d、7 d、15 d、30 ... 目的探明补体在^(60)Coγ射线单次20 Gy胸部照射所致小鼠放射性肺损伤中的作用。方法^(60)Coγ射线单次20 Gy胸部照射C57BL/6小鼠,观察早期(15 d内)肺组织炎性反应和后期(30 d、180 d)肺纤维化,ELISA测定照射后1 d、3 d、7 d、15 d、30 d、180 d肺组织C2、C3a、C4、C5b-9含量,RT-PCR检测Beas-2B细胞照射后补体mRNA的表达。结果照射后小鼠放射性肺损伤表现为早期炎性反应和晚期纤维化。补体C2、C4和C5b-9复合物在照射后早期(3 d或7 d)增高(P<0.05),可能与照射引起的炎性反应有关。补体C3a在照射后3~180 d均明显高于对照组水平,提示其与放射性肺损伤关系密切。照射细胞中,补体C2、C3的mRNA表达增高,而C4、C5的mRNA水平无变化。结论不同补体在放射性肺损伤中的反应存在差异,其中补体C3a与放射性肺损伤关系极为密切,提示通过调控补体C3a及其受体可能是防治放射性肺损伤的新途径。 展开更多

关键词 补体 ^(60)Coγ射线 放射性肺损伤

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辐射诱导树突状细胞促进Treg分化及肺上皮间充质转化 被引量：3

8

作者 孙泽文 梁鑫 +6 位作者 郗停停 贺琦多 杨陟华 王易龙 顾永清 潘秀颉 朱茂祥 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期502-506,共5页

目的探讨树突状细胞经60Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventio... 目的探讨树突状细胞经60Co-γ射线照射后激活调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)的能力,以及在Treg诱导的上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。方法免疫磁珠分选的小鼠CD4+CD25-常规T细胞(conventional T cells,Tcon)与60Co-γ线照射(6 Gy)后的树突状细胞共培养,72 h后采用流式术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例。通过磁珠分选后的Treg与小鼠肺上皮细胞系MLE-12共培养72 h后取MLE-12细胞,免疫荧光和Western印迹技术检测上皮标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和细胞表面蛋白C(prosurfactant protein C,Spc)以及间充质标志蛋白N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)和波形蛋白(vimentin)的表达。结果免疫磁珠法分选小鼠脾Treg比例>90%,效果良好;树突状细胞照后抗原提呈功能增强,能显著诱导Tcon分化为Treg; Western印迹和免疫荧光实验证明,Treg能明显促进上皮标志E-cad和Spc表达下调,间充质标志N-cad和vimentin表达升高。结论树突状细胞照射后能显著诱导Treg分化,而Treg能明显诱导肺上皮细胞发生EMT。 展开更多

关键词 辐射 电离 抗原提呈 T淋巴细胞 调节性 上皮间充质转化 钙黏着糖蛋白 肺纤维化

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干涉谷胱甘肽S-转移酶P1加重辐射诱导的肺细胞损伤 被引量：3

9

作者 贺琦多 马娜 +7 位作者 杜乐辉 杨陟华 王易龙 孙泽文 俞伟 黄祥 朱茂祥 曲宝林 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第5期385-388,共4页

目的探讨谷胱甘S-转移酶P1(GSTP1)与放射性肺损伤关系及相关机制。方法应用人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)细胞,针对GSTP1 mRNA序列设计筛选两条有效的RNA干扰;转染后为实验组(siRNA-1、siRNA-2),转染阴性对照siRNA者为阴性对照组(NC)。... 目的探讨谷胱甘S-转移酶P1(GSTP1)与放射性肺损伤关系及相关机制。方法应用人正常肺上皮细胞系(BEAS-2B)细胞,针对GSTP1 mRNA序列设计筛选两条有效的RNA干扰;转染后为实验组(siRNA-1、siRNA-2),转染阴性对照siRNA者为阴性对照组(NC)。蛋白免疫印迹法(WB)检测GSTP1蛋白表达;1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)检测GST酶的活性;DCFH-DA探针孵育,利用流式细胞术检测活性氧平均荧光强度(MFI);Annexin-v/PI染料孵育,利用流式细胞术检测细胞凋亡;MTT法检测细胞活性,并绘制生长曲线;WB检测上皮间充质转化(EMT)相关指标。结果照射后活性氧检测MFI实验组较阴性对照组高(6774.66±399.60∶8759.00±256.96∶9 967.67±735.11,P<0.05)。实验组凋亡细胞比例较阴性对照组高(12.3±1.16∶17.38±1.65∶22.88±1.20,P<0.05);MTT法测吸光度(A)值实验组较阴性对照组低;实验组EMT程度高于对照组细胞。结论干涉肺上皮细胞GSTP1蛋白表达,照射后会提高细胞内活性氧水平、凋亡细胞比例,并进一步降低细胞增殖速率,此外肺上皮细胞的EMT发生更加显著。GSTP1蛋白含量下降可能导致辐射诱导肺细胞损伤加重,并促进EMT发生。 展开更多

关键词 肺上皮细胞系/照射 氧化应激 凋亡 上皮间充质转化

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TGF—β3通过抑制上皮间质转化拮抗放射陛肺纤维化 被引量：2

10

作者 胡蝶 杨陟华 +6 位作者 王易龙 罗祥智 潘秀颉 姚振江 徐龙 顾永清 朱茂祥 《国际放射医学核医学杂志》 2018年第2期129-134,共6页

目的 检测分析放射性肺纤维化过程中上皮间质转化（EMT）情况，探索转化生长因子β3（TGF-β3）是否通过EMT途径抑制放射性肺纤维化的发生。方法 将180只C57BL/6雌性小鼠按体重完全随机分为对照组、单纯照射组（简称照射组）和照射＋TGF... 目的 检测分析放射性肺纤维化过程中上皮间质转化（EMT）情况，探索转化生长因子β3（TGF-β3）是否通过EMT途径抑制放射性肺纤维化的发生。方法 将180只C57BL/6雌性小鼠按体重完全随机分为对照组、单纯照射组（简称照射组）和照射＋TGF-β3组（简称TGF-β3组），照射组和TGF-β3组经20 Gy 60Co γ射线单次胸部照射后，分别腹腔注射0.5 mL 0.9%的生理盐水和TGF-β3（1 μg/kg），每周1次，于照射后1、3和6个月活杀，用苏木素-伊红（HE）染色、Masson三色染色后观察肺组织病理学改变，用免疫组化法检测肺组织EMT相关的上皮标志物紧密连接蛋白（ZO-1）和间质标志物N-钙粘蛋白（N-cadherin）的表达，用Mann-Whitney U秩和检验和Fisher确切概率法对结果进行统计分析。结果 HE和Masson染色结果显示，照射能够引起小鼠肺泡壁增厚、肺泡间隔明显增宽、肺泡结构严重破坏、胶原纤维大量沉积等典型纤维化病理改变；照射后3和6个月，与照射组比较，TGF-β3组小鼠肺纤维化病变明显减轻，差异有统计学意义（Z=-2.562、-2.807，均P〈0.05），胶原沉积显著减少，差异有统计学意义（Z=2.442、2.529，均P〈0.05）。免疫组化结果显示，与对照组比较，照射后1、3和6个月，小鼠肺组织ZO-1的表达量明显减少，差异有统计学意义（Z=4.492、5.831、6.064，均P〈0.05），N-cadherin的表达量显著增高，差异有统计学意义（Z=-3.269、-5.520、-6.063，均P〈0.05）；与照射组比较，TGF-β3组ZO-1表达量显著增高，差异有统计学意义（Z=-2.881、-4.220、-5.695，均P〈0.05），而N-cadherin表达量显著减少，差异有统计学意义（Z=4.546、3.560、4.919，均P〈0.05）。结论 TGF-β3可通过抑制EMT拮抗放射性肺纤维化。 展开更多

关键词 特发性肺纤维化 辐射损伤 实验性 转化生长因子Β3 上皮间质转化

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DC细胞在辐射损伤抗原递呈及T细胞活化中的作用 被引量：1

11

作者 李倩 耿爽 +8 位作者 鄢成名 郭浩鑫 王志鑫 王美玉 刘奔波 王旭 王易龙 杨陟华 朱茂祥 《中国辐射卫生》 2022年第6期657-662,668,共7页

目的利用体外细胞共培养技术模拟体内肺组织微环境,探索树突状细胞(DC)在辐射损伤细胞的抗原提呈作用。方法^(60)Coγ射线照射的小鼠肺上皮细胞(MLE-12)与骨髓来源DC和/或脾T淋巴细胞培养48 h,流式细胞术检测DC细胞共刺激分子CD80/86和... 目的利用体外细胞共培养技术模拟体内肺组织微环境,探索树突状细胞(DC)在辐射损伤细胞的抗原提呈作用。方法^(60)Coγ射线照射的小鼠肺上皮细胞(MLE-12)与骨髓来源DC和/或脾T淋巴细胞培养48 h,流式细胞术检测DC细胞共刺激分子CD80/86和抗原肽识别复合物MHCⅠ/Ⅱ表达水平,T细胞活化标志CD69/28/152表达水平以及CD4^(+)和CD8^(+)亚群细胞数。结果^(60)Coγ射线照射的MLE-12细胞凋亡率呈剂量依赖性增高,明显刺激DC细胞CD80/86和MHC II表达,但对T细胞无直接活化作用;6 Gy照射的MLE-12细胞与DC细胞和T淋巴细胞共培养48 h,T细胞CD69和CD28表达增加,CD4^(+)和CD8^(+)亚群细胞数均明显高于对照组,同时DC细胞出现CD86和MHCI特异性高表达。结论辐射损伤细胞可刺激DC细胞抗原提呈功能,并对T细胞进行活化。 展开更多

关键词 电离辐射 肺上皮细胞 树突状细胞 T细胞 抗原提呈

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线粒体内膜蛋白质mitofilin干涉慢病毒的构建及应用 被引量：1

12

作者 王珊 王易龙 +1 位作者 詹轶群 于淼 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期685-691,共7页

目的构建线粒体内膜蛋白质mitofilin的慢病毒干涉载体,初步研究mitofilin在体内体外的生物学功能。方法将靶向人mitofilin基因的短发夹RNA(shRNA)序列克隆到慢病毒核心质粒pSicoR中,瞬时转染HEK293T细胞筛选出有效的干涉片段,并进行慢... 目的构建线粒体内膜蛋白质mitofilin的慢病毒干涉载体,初步研究mitofilin在体内体外的生物学功能。方法将靶向人mitofilin基因的短发夹RNA(shRNA)序列克隆到慢病毒核心质粒pSicoR中,瞬时转染HEK293T细胞筛选出有效的干涉片段,并进行慢病毒的包装。病毒感染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,Western印迹检测mitofilin蛋白的干涉效果。15 Gyγ射线照射刺激病毒感染的HeLa细胞,流式细胞术检测细胞凋亡。利用尾静脉大容量快速注射法将慢病毒注射入C57BL/6J小鼠体内,6.5 Gyγ射线照射刺激,蓝色温和电泳联合胶内酶活性染色分析,检测呼吸链复合体Ⅴ活性变化。结果与结论成功构建具有mitofilin干涉效果的慢病毒干涉载体并获得了稳定干涉mitofilin的HeLa细胞株。构建的慢病毒能有效下调HeLa细胞和小鼠肝脏细胞mitofilin蛋白的表达。干涉mitofilin表达可增加γ射线诱导的细胞凋亡,降低γ射线刺激下小鼠肝细胞线粒体呼吸链复合体Ⅴ的活性。所构建的干涉慢病毒能够广泛应用于mitofilin在体内和体外的功能研究。 展开更多

关键词 线粒体内膜蛋白 慢病毒 凋亡 线粒体 ATP合酶

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基于半导体制冷器件的小型温度控制系统 被引量：1

13

作者 李航 廖桂潘 +1 位作者 王易龙 刘教瑜 《自动化信息》 2008年第11期38-39,37,共3页

本文介绍了基于半导体制冷器件的小型温度控制系统的设计思想以及实现方法。重点研究了半导体制冷器件的基本原理、系统构成、以及PID控制方法的单片机（SCM）实现。系统经实际测试，温度可在-2．5℃到60℃范围内设定，设定精度0．1℃... 本文介绍了基于半导体制冷器件的小型温度控制系统的设计思想以及实现方法。重点研究了半导体制冷器件的基本原理、系统构成、以及PID控制方法的单片机（SCM）实现。系统经实际测试，温度可在-2．5℃到60℃范围内设定，设定精度0．1℃，超调量不超过2℃，稳定后最大波动0．5℃以下。采用此方法设计的小型温度控制系统摒弃了传统使用压缩机的制冷技术而采用半导体制冷器件，因而具有控制灵活，控制精度高的优点，并显著降低了成本。能够满足生物、医学以及一些工业领域对小型恒温箱的要求，具有一定的推广应用价值和市场前景。 展开更多

关键词 半导体制冷器件 温度控制 PID控制

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薪酬设计的五大原则 被引量：5

14

作者 王易龙 《企业管理》 北大核心 2010年第6期51-51,共1页

公平原则 公平是薪酬设计的基础，只有在员工认为薪酬设计是公平的前提下，才可能产生认同感和满意度，才可能产生薪酬的激励作用。公平原则是制定薪酬体系首要考虑的一个重要原则，薪酬系统是否公平，会直接反映在员工工作的努力程度... 公平原则 公平是薪酬设计的基础，只有在员工认为薪酬设计是公平的前提下，才可能产生认同感和满意度，才可能产生薪酬的激励作用。公平原则是制定薪酬体系首要考虑的一个重要原则，薪酬系统是否公平，会直接反映在员工工作的努力程度和工作态度上。 展开更多

关键词 薪酬设计 公平原则 员工工作 薪酬体系 薪酬系统 工作态度 努力程度 满意度

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