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香蕉枯萎病菌遗传多态性及其致病力分化
被引量：
8
1
作者
刘文波
孙亮
+5 位作者
万三连
王
慕瑾
张宇
邬国良
缪卫国
郑服丛
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第17期71-78,F0002,共9页
为了明确我国香蕉主要种植区香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)的致病力及其遗传多态性,本研究采用对寄主鉴定和RAPD技术分析来自海南、广西、广东、福建、云南的FOC生理小种、致病力分化及遗传多态性。结合巴西蕉和...
为了明确我国香蕉主要种植区香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)的致病力及其遗传多态性,本研究采用对寄主鉴定和RAPD技术分析来自海南、广西、广东、福建、云南的FOC生理小种、致病力分化及遗传多态性。结合巴西蕉和粉蕉鉴定与RAPD技术,与香蕉枯萎病菌1号(FOC1)和4号生理小种(FOC4)对比,55个FOC菌株中,有28个菌株属于1号生理小种,海南10个、广西8个、广东4个、福建4个、云南2个;27个菌株属于4号生理小种,海南20个、广西4个、广东1个、福建1个、云南1个。强致病力菌株有23个菌株,中致病力菌株有15个,弱致病力菌株有17个;通过遗传多态性分析,9条引物PCR扩增供试菌株,共扩增出136条谱带,其中多态性的条带有126条,多态性位点频率为93.4%,在遗传阈值为0.68时,55个供试菌株与FOC1和FOC4划分为4个RAPD菌群,除1号生理小种BF26菌株单独形成Ⅳ菌群外,4号生理小种和其余1号生理小种均未单独形成菌群,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ菌群同时含有1号和4号生理小种。因此,我国香蕉种植区香蕉枯萎病菌仍以1号和4号生理小种为主,但是生理小种的遗传分化在分子水平上趋于复杂化,香蕉枯萎病菌群体具有丰富的多态性,其致病力的强弱和菌株遗传关系无直接的相关性,跟地理分布也没有相关性,香蕉枯萎病菌的遗传多态性可能更多依赖其寄主。这些结果为香蕉的抗病育种、品种的合理布局以及香蕉枯萎病的综合防治提供理论依据。
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关键词
香蕉枯萎病菌
生理小种
遗传多态性
RAPD
聚类分析
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职称材料
棉花角斑病菌hpaXm基因突变体与互补载体构建
被引量：
1
2
作者
王
慕瑾
刘悦
+2 位作者
孙超
缪卫国
郑服丛
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期75-81,共7页
为了分析研究Harpin蛋白转运途径,针对来自棉花角斑病菌的HpaXm,构建hpaXm基因突变体和互补载体,根据文献和GenBank中已登录的hpaXm基因全序列及其同源基因hpa1的序列,设计合成多对引物进行PCR扩增,并将扩增片段与载体相连接,用电转化...
为了分析研究Harpin蛋白转运途径,针对来自棉花角斑病菌的HpaXm,构建hpaXm基因突变体和互补载体,根据文献和GenBank中已登录的hpaXm基因全序列及其同源基因hpa1的序列,设计合成多对引物进行PCR扩增,并将扩增片段与载体相连接,用电转化的方式将构建成功的hpaXm基因敲除载体转化Xanthmonas citri subsp.malvacearum,然后测定hpaXm基因突变体在烟草上激发HR的能力。结果得到hpaXm基因上游序列349 bp,hpaXm基因下游序列465 bp;利用重叠PCR将hpaXm基因上下游序列融合,克隆到自杀载体pK18mob的酶切位点BamHI和EcoRI之间,并将pK18mobhpaXm上下游融合片段转化大肠杆菌E.coli DH5α,经卡那霉素平板筛选得到阳性转化子;将hpaXm基因敲除载体转化X.citri subsp.malvacearum,经PCR验证成功敲除hpaXm基因,并发现hpaXm基因突变体在烟草上激发HR的能力要弱于野生型菌株。扩增得到hpaXm基因片段402 bp和信号肽类似序列缺失hpaXm46-402基因片段360 bp,克隆到广宿主载体pHM1的KpnI和SacI酶切位点之间,并将pHM1hpaXm和pHM1hpaXm46-402转化E.coli DH5α,经壮观霉素平板筛选得到阳性转化子。重组质粒经PCR检测、测序鉴定及突变体在烟草上的表型验证,表明hpaXm基因突变体和互补载体构建成功,为hpaXm基因回复突变株的构建和进一步研究信号肽序列缺失对HpaXm蛋白转运的影响奠定了基础。
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关键词
HpaXm
信号肽类似序列
突变体
互补载体
下载PDF
职称材料
题名
香蕉枯萎病菌遗传多态性及其致病力分化
被引量：
8
1
作者
刘文波
孙亮
万三连
王
慕瑾
张宇
邬国良
缪卫国
郑服丛
机构
海南省热带生物资源可持续利用重点实验室/海南大学环境与植物保护学院
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第17期71-78,F0002,共9页
基金
国家重大基础研究计划项目(201C-1B111612)
国家自然科学基金(31160359)
+2 种基金
国家农业产业技术体系建设(CARS-34-GW8)
教育部博士点基金(20104601110004)
海南大学科研启动资金(kyqd1006)
文摘
为了明确我国香蕉主要种植区香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC)的致病力及其遗传多态性,本研究采用对寄主鉴定和RAPD技术分析来自海南、广西、广东、福建、云南的FOC生理小种、致病力分化及遗传多态性。结合巴西蕉和粉蕉鉴定与RAPD技术,与香蕉枯萎病菌1号(FOC1)和4号生理小种(FOC4)对比,55个FOC菌株中,有28个菌株属于1号生理小种,海南10个、广西8个、广东4个、福建4个、云南2个;27个菌株属于4号生理小种,海南20个、广西4个、广东1个、福建1个、云南1个。强致病力菌株有23个菌株,中致病力菌株有15个,弱致病力菌株有17个;通过遗传多态性分析,9条引物PCR扩增供试菌株,共扩增出136条谱带,其中多态性的条带有126条,多态性位点频率为93.4%,在遗传阈值为0.68时,55个供试菌株与FOC1和FOC4划分为4个RAPD菌群,除1号生理小种BF26菌株单独形成Ⅳ菌群外,4号生理小种和其余1号生理小种均未单独形成菌群,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ菌群同时含有1号和4号生理小种。因此,我国香蕉种植区香蕉枯萎病菌仍以1号和4号生理小种为主,但是生理小种的遗传分化在分子水平上趋于复杂化,香蕉枯萎病菌群体具有丰富的多态性,其致病力的强弱和菌株遗传关系无直接的相关性,跟地理分布也没有相关性,香蕉枯萎病菌的遗传多态性可能更多依赖其寄主。这些结果为香蕉的抗病育种、品种的合理布局以及香蕉枯萎病的综合防治提供理论依据。
关键词
香蕉枯萎病菌
生理小种
遗传多态性
RAPD
聚类分析
Keywords
Fusarium oxysporumf.sp.cubene
Race
Genetic polymorphism
RAPD
Cluster analysis
分类号
S432.1 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
棉花角斑病菌hpaXm基因突变体与互补载体构建
被引量：
1
2
作者
王
慕瑾
刘悦
孙超
缪卫国
郑服丛
机构
海南省热带生物资源可持续利用重点实验室/海南大学环境与植物保护学院
出处
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期75-81,共7页
基金
国家自然科学基金(31360029
31160359)
+4 种基金
教育部博士点基金(20124601110004
20104601110004)
国家重大基础研究计划项目(2011CB111612)
国家农业产业技术体系建设项目(CARS-34-GW8)
海南大学科研启动资金(kyqd1006)
文摘
为了分析研究Harpin蛋白转运途径,针对来自棉花角斑病菌的HpaXm,构建hpaXm基因突变体和互补载体,根据文献和GenBank中已登录的hpaXm基因全序列及其同源基因hpa1的序列,设计合成多对引物进行PCR扩增,并将扩增片段与载体相连接,用电转化的方式将构建成功的hpaXm基因敲除载体转化Xanthmonas citri subsp.malvacearum,然后测定hpaXm基因突变体在烟草上激发HR的能力。结果得到hpaXm基因上游序列349 bp,hpaXm基因下游序列465 bp;利用重叠PCR将hpaXm基因上下游序列融合,克隆到自杀载体pK18mob的酶切位点BamHI和EcoRI之间,并将pK18mobhpaXm上下游融合片段转化大肠杆菌E.coli DH5α,经卡那霉素平板筛选得到阳性转化子;将hpaXm基因敲除载体转化X.citri subsp.malvacearum,经PCR验证成功敲除hpaXm基因,并发现hpaXm基因突变体在烟草上激发HR的能力要弱于野生型菌株。扩增得到hpaXm基因片段402 bp和信号肽类似序列缺失hpaXm46-402基因片段360 bp,克隆到广宿主载体pHM1的KpnI和SacI酶切位点之间,并将pHM1hpaXm和pHM1hpaXm46-402转化E.coli DH5α,经壮观霉素平板筛选得到阳性转化子。重组质粒经PCR检测、测序鉴定及突变体在烟草上的表型验证,表明hpaXm基因突变体和互补载体构建成功,为hpaXm基因回复突变株的构建和进一步研究信号肽序列缺失对HpaXm蛋白转运的影响奠定了基础。
关键词
HpaXm
信号肽类似序列
突变体
互补载体
Keywords
HpaXm
signal peptide similar sequences
mutant
complementary vector
分类号
S435.62 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
香蕉枯萎病菌遗传多态性及其致病力分化
刘文波
孙亮
万三连
王
慕瑾
张宇
邬国良
缪卫国
郑服丛
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013
8
下载PDF
职称材料
2
棉花角斑病菌hpaXm基因突变体与互补载体构建
王
慕瑾
刘悦
孙超
缪卫国
郑服丛
《广东农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
下载PDF
职称材料
已选择
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