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题名小鼠羊水间充质干细胞的分离、培养及鉴定
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作者
吴航飞
王康淳
潘崎
程颖
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机构
中国医科大学附属第一医院器官移植科暨肝胆外科
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出处
《器官移植》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期67-73,共7页
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基金
辽宁省教育厅科学研究项目(FWZR2020002)。
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文摘
目的探讨小鼠羊水间充质干细胞(AF-MSC)的分离、培养及鉴定。方法在无菌条件下获取孕鼠子宫,收集羊水后进行过滤和离心,对沉淀细胞团进行培养并传代。观察AF-MSC的形态,分析AF-MSC的增殖特点,采用流式细胞术鉴定AF-MSC的表面标志物,检测AF-MSC的三系分化能力及冷冻复苏后的细胞活力。结果小鼠AF-MSC呈典型的梭形,融合度>80%时会出现典型的漩涡状结构。小鼠AF-MSC传代培养无明显潜伏期,培养2~3 d进入对数增长期,增长速度最快,之后增殖速度减慢,进入平台期。AF-MSC表达干细胞抗原(Sca)-1、CD29、CD44,不表达CD34、CD45。小鼠AF-MSC成骨分化后,矿化结晶被茜素红染成深红色的点状;成软骨分化后,分泌的酸性粘多糖被阿利新蓝染成淡蓝色;成脂分化后,胞质脂滴被油红O染成红色。细胞冷冻复苏后存活率>95%,生长状态良好,6 d时增殖能力高于冻存前(P<0.05),其他时间增殖能力与冻存前比较,差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论本实验成功分离了小鼠AF-MSC,过程简便、成本低,且分离的细胞可随传代次数的增加而纯化,冻存不影响其增殖能力。
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关键词
间充质干细胞
羊水
细胞提取
细胞鉴定
细胞增殖
细胞冻存
小鼠
成骨分化
成软骨分化
成脂分化
干细胞抗原
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Keywords
Mesenchymal stem cell
Amniotic fluid
Cell extraction
Cell identification
Cell proliferation
Cell cryopreservation
Mouse
Osteogenic differentiation
Chondrogenic differentiation
Adipogenic differentiation
Stem cell antigen
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分类号
R617
[医药卫生—外科学]
R392.2
[医药卫生—临床医学]
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