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临床依赖利福平分支杆菌的初步研究 被引量:17
1
作者 钟敏 温博海 +3 位作者 王易伟 王安 陈荣 陈炜 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第1期73-75,F003,共4页
目的 研究依赖利福平分支杆菌〔1〕(依R菌 )菌株的依R程度、菌落及菌体的形态特点 ,以期为依R菌的定义和鉴定提供依据。方法 从分支杆菌菌株库中选出在含R培养基中生长更旺盛的 2 2株菌株 ,用L -J氏培养基复苏培养。选取单个菌落接种... 目的 研究依赖利福平分支杆菌〔1〕(依R菌 )菌株的依R程度、菌落及菌体的形态特点 ,以期为依R菌的定义和鉴定提供依据。方法 从分支杆菌菌株库中选出在含R培养基中生长更旺盛的 2 2株菌株 ,用L -J氏培养基复苏培养。选取单个菌落接种不同R浓度的培养基中培养 ;对不同实验管 (对照管、R管 )中的菌落进行计数、称重、形态观察 ,并作抗酸染色观察菌体形态。结果  2 2株依R菌经菌种鉴定均为结核分支杆菌。依R菌对R的依赖性仅限于某个浓度范围 (R :5 0~6 0 0 μg/ml) ;不同的菌株其依赖范围不同 ,但大都在R10 0~ 30 0 μg/ml范围内生长最旺盛。依R管与非依R管 (对照管 )中菌落(菌体 )形态均有明显的差异 ,其菌落重量差为 2 .2~ 5倍。结论 目前我们所发现的依R菌株均为结核分支杆菌。依R菌对R的依赖为相对依赖。分支杆菌在含R培养基中菌落生长更旺盛和菌体粗大、浓染的特征 。 展开更多
关键词 分支杆菌 利福平 依赖利福平生长 形态
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依赖利福平结核分枝杆菌的分子生物学研究 被引量:15
2
作者 钟敏 温博海 +4 位作者 陈荣 陈炜 王易伟 王安 钟明 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期42-45,共4页
目的 从分子生物学的角度研究依赖利福平结核分枝杆菌 (依R菌 )。方法 采用DNA自动测序仪 ,对菌株rpoB基因片段 ( 319bp)的序列进行分析 ;采用随机扩增DNA聚丙酰胺凝胶电泳 (RAPD PAG)指纹分型法 ,对菌株的DNA指纹进行分型 ;采用SDS... 目的 从分子生物学的角度研究依赖利福平结核分枝杆菌 (依R菌 )。方法 采用DNA自动测序仪 ,对菌株rpoB基因片段 ( 319bp)的序列进行分析 ;采用随机扩增DNA聚丙酰胺凝胶电泳 (RAPD PAG)指纹分型法 ,对菌株的DNA指纹进行分型 ;采用SDS聚丙酰胺凝胶蛋白电泳法 ,对菌株的菌体蛋白进行分析。结果  30株依R菌rpoB基因的突变率为 96 7% ( 2 9/ 30 ) ,37株耐利福平结核分枝杆菌 (耐R菌 )为 81 1% ( 30 / 37) (P <0 0 1) ,依R菌和耐R菌的突变高发位点均为 5 31位( 37/ 5 9,6 3 2 % ;)密码子、突变 ,其次为 5 16位 ( 13/ 5 9,2 2 8% )和 5 2 6位 ( 7/ 5 9,12 3% ) ;依R菌和耐R菌两组菌株的DNA指纹结果可分为 5种类型 ,其中以Ⅱ型 ( 31/ 6 7,46 2 % )、Ⅰ型 ( 2 0 / 6 7,2 9 9% )和Ⅲ型 ( 13/ 6 7,19 4% )为主 ;3种主要类型的指纹在两组菌株中的分布无明显特殊性 ;依R菌在含R管和对照管中的菌体蛋白电泳图谱有 76 7% ( 2 3/ 30 )的不同 ,其在含R管中菌体蛋白表达丰富 ,且在分子量 310 0 0~ 43 0 0 0间有一宽带 ;37株耐R菌其两管的菌体蛋白电泳图谱各自均相同。结论 依R菌和耐R菌的基因型密切相关 ;依R菌的蛋白表达可依赖于R。 展开更多
关键词 利福平 结核分枝杆菌 分子生物学 结核病 基因
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检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究 被引量:16
3
作者 钟敏 温博海 +3 位作者 陈荣 王安 蹇锐 王易伟 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期38-41,共4页
目的 建立聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法 ,并评价其临床应用的价值。方法 依据结核分枝杆菌rpoB基因的耐利福平决定区设计引物 ,用PCR从临床分离株和直接从痰标本中扩增rpoB基因片段 ;... 目的 建立聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法 ,并评价其临床应用的价值。方法 依据结核分枝杆菌rpoB基因的耐利福平决定区设计引物 ,用PCR从临床分离株和直接从痰标本中扩增rpoB基因片段 ;对扩得的rpoB基因片段做DNASSCP分析 ,并随机测定rpoB片段的序列。结果 PCR从所有 2 12株结核分枝杆菌中均扩得 2 3 0bp片段 ,13 5份抗酸染色阳性的痰标本中 ,有 113份扩得阳性片段 ( 83 .7% )。在SSCP分析中 ,14 0份经L J药敏试验检测为利福平耐受的结核分枝杆菌 ,有 13 0份有rpoB基因突变 (符合率为 92 .9% ) ,72份经L J药敏试验检测为利福平敏感的菌 ,有 67份的rpoB基因无突变 (符合率为 93 .1% )。测序分析发现 5 7份经SSCP检测为突变的rpoB片段均有序列改变 ,10份经SSCP分析为无突变的有 8份无序列改变 ,SSCP与测序结果的符合率为 94 .0 %。在本研究的菌株中 ,耐多药结核病 (MDR TB)占 76.4 % ( 10 7/14 0 ) ,有 92 .5 % ( 99/ 10 7)耐多药菌株经SSCP检测有rpoB突变。结论 建立的PCR SSCP分析方法 ,是一种较准确和稳定的检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的方法 ,可用于临床快速分析患者结核分枝杆菌对利福平的耐药性 ,并可作为MDR 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 利福平 聚合酶链反应 单链构象多态现象 基因突变 RPOB基因 PCR-SSCP
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结核分枝杆菌随机扩增多态性DNA指纹分型技术及应用研究 被引量:12
4
作者 钟敏 王安 +5 位作者 钟明 娄乐山 温博海 陈炜 陈荣 蹇锐 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期91-94,共4页
目的 探讨重庆地区结核病分子流行病学的发展趋势。方法 建立随机扩增多态性DNA聚丙酰胺凝胶电泳 (RAPD PAGE)指纹分型法 ;采用 1对随机引物对重庆地区 2 87例肺结核患者41 6株结核分枝杆菌进行DNA指纹分型。结果  41 6株分离菌株其... 目的 探讨重庆地区结核病分子流行病学的发展趋势。方法 建立随机扩增多态性DNA聚丙酰胺凝胶电泳 (RAPD PAGE)指纹分型法 ;采用 1对随机引物对重庆地区 2 87例肺结核患者41 6株结核分枝杆菌进行DNA指纹分型。结果  41 6株分离菌株其DNA指纹可分为 7种类型 ,以Ⅰ型 (35 .5 % )、Ⅱ型 (2 9 3 % )和Ⅲ型 (2 2 .6 % )为主 ,其中 2 0~ 39岁和 40~ 49岁年龄组的初治患者在 3型中分别占 58.0 %和 46 .2 %。在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中初治患者分别占 52 .0 %、46 .4%和 58.5 % ,至少耐利福平和异烟肼 (MDR)的初治患者又分别占的 1 1 .3 %、35 .9%和 2 4 .3 % ,至少耐利福平和其他药物的多重耐药株在 3型中占 2 1 .7% (初治 )。结论 RAPD PAGE指纹分型法 ,是一种简便、特异、敏感、重复性好的菌株分型方法 ,可用于结核病分子流行学的研究 ;以Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型为主的结核分枝杆菌正在重庆及周边地区的人群中传播 ; 展开更多
关键词 结核分支杆菌 DNA指纹法 流行病学 研究 随机扩增多态性 结核病
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依赖利福平结核分支杆菌在无利福平条件下的生长情况研究 被引量:12
5
作者 钟敏 王易伟 +4 位作者 孙川龙 尹慧国 王安 钟明 娄乐山 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期588-590,I001,共4页
目的 探讨依赖利福平结核分支杆菌 (依R菌 )在无R条件下的生长情况。方法 取初步研究的典型依R菌株 ,挑取最佳R浓度管中的单个菌落 ,制备 1 0 - 4mg/ml菌液 ,分别接种于L J和 1 2B液体培养基 ,37℃培养 ;对比观察不同试验管细菌的生... 目的 探讨依赖利福平结核分支杆菌 (依R菌 )在无R条件下的生长情况。方法 取初步研究的典型依R菌株 ,挑取最佳R浓度管中的单个菌落 ,制备 1 0 - 4mg/ml菌液 ,分别接种于L J和 1 2B液体培养基 ,37℃培养 ;对比观察不同试验管细菌的生长速度、特点以及光镜、电镜下的菌体形态。结果 L J培养有R管 2周可见菌落 ,无R管 3周才见到细小菌落 ;1 2B液体培养 ,前者 9天获得阳性指数 ,后者需 1 3天。有R管中菌落生长粗大、凸起、花菜样、易刮取和乳化 ;无R管中菌落生长细小、扁平、荷包蛋样、不易刮取和乳化。光镜下有R管菌体粗大、深染 ;无R管菌体细小、浅染 ,且大小不等。透射电镜下有R管菌体细胞壁完整 ,无R管菌体细胞壁缺陷。 展开更多
关键词 依赖利福平结核分支杆菌 利福平 细胞壁缺陷细菌 细菌培养
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依赖利福平菌肺结核43例临床分析 被引量:9
6
作者 钟明 钟敏 +5 位作者 娄乐山 温博海 王安 曹沙莉 孙川龙 尹慧国 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2003年第2期104-106,共3页
目的 探讨依赖利福平 (R)结核分支杆菌肺结核的临床特征、产生原因及防治对策。方法对实验室诊断为依赖R菌的肺结核患者进行治疗和随访追踪 ,对其临床资料进行回顾性分析。结果(1 ) 43依赖R菌肺结核患者中 ,年龄 2 0~ 3 9岁的占 60 .5... 目的 探讨依赖利福平 (R)结核分支杆菌肺结核的临床特征、产生原因及防治对策。方法对实验室诊断为依赖R菌的肺结核患者进行治疗和随访追踪 ,对其临床资料进行回顾性分析。结果(1 ) 43依赖R菌肺结核患者中 ,年龄 2 0~ 3 9岁的占 60 .5 % (2 6/ 43 ) ,40~ 5 9岁的占 2 0 .9% (9/ 43 ) ;病灶范围≥ 3个肺野的占 88.4% (3 8/ 43 ) ,病变性质以干酪空洞为主的占 5 8.1 % (2 5 / 43 ) ;耐药种类≥ 3种抗结核药的占 88.4% (3 8/ 43 ) ,≥ 2种的为 1 0 0 % (4 3 / 43 ) ,至少耐异烟肼和利福平的耐多药肺结核(MDR -TB)占 74.4% (3 2 / 43 )。 (2 ) 5例初始患者均为MDR -TB ,且化疗全部失败 ;3 8例复治患者化疗失败率达 5 2 .6% (2 0 / 3 8) ,利福霉素类药物交替使用或不规则用药的占 76.3 %。结论  (1 )依赖R菌肺结核以病情重 ,耐多药 ,化疗效果差和预后不良为主要临床特征。 (2 )肺结核患者长期不合理或不规则用利福霉素类药 ,可能是产生依赖R菌的主要原因。 (3 )建立结核菌耐药性检测的快速方法 ,并应用于临床 。 展开更多
关键词 依赖性 利福平菌 肺结核 临床分析 结核分支杆菌 诊断 治疗
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序列分析重庆地区耐利福平结核分支杆菌的rpoB基因突变 被引量:5
7
作者 陈荣 温博海 +3 位作者 钟敏 陈炜 王安 王易伟 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期20-22,27,共4页
目的 研究重庆地区结核分支杆菌对利福平 (R)的耐受与rpoB基因突变的关系。方法 PCR扩增 6 7株分离自重庆地区肺结核患者的耐R结核分支杆菌的rpoB基因片段 (319bp) ;测定扩增片段的序列 ,并与野型株序列作对比分析。 结果  6 7株临... 目的 研究重庆地区结核分支杆菌对利福平 (R)的耐受与rpoB基因突变的关系。方法 PCR扩增 6 7株分离自重庆地区肺结核患者的耐R结核分支杆菌的rpoB基因片段 (319bp) ;测定扩增片段的序列 ,并与野型株序列作对比分析。 结果  6 7株临床分离的耐R株中 ,8株 (12 % )无变异 ,5 9株 (88% )有突变 ,突变涉及 8个氨基酸位点。突变有 14种类型 ,4 9株(83% )的突变为单个密码子取代 ,9株为双密码子取代 ,1株为 3个碱基 (一个密码子 )插入 ,未检出碱基缺失。突变高发位点为 5 31位 (37/ 5 9)密码子 ,其次为 5 16位 (13/ 5 9)和 5 2 6位 (7/ 5 9)。 3株菌在 4 77位的谷氨酸 (Glu) ,天冬氨酸 (Asp)突变为首次发现。结论 重庆地区结核分支杆菌耐利福平的发生与rpoB基因的突变密切相关 ,突变的类型与国外的报告基本相似。PCR扩增和产物测序将是临床检测结核分支杆菌耐利福平和耐多药的一种迅速。 展开更多
关键词 序列分析 重庆地区 利福平 结核分支杆菌 RPOB基因 基因突变 结核病
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BACTEC系统对依赖利福平结核分支杆菌生长与耐药性的分析 被引量:6
8
作者 王易伟 钟敏 王安 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2002年第3期146-149,共4页
目的 探讨依赖利福平结核分支杆菌 (依R菌 )在BACTEC系统中的生长特征 ,以便用该系统鉴定依R菌。方法 选取L -J法初步鉴定的依R菌 ,制成菌液 (10 -4 mg ml)分别以 0 .1ml接种于含不同利福平 (R)浓度 (1~ 384 μg ml)的 7H - 12液体... 目的 探讨依赖利福平结核分支杆菌 (依R菌 )在BACTEC系统中的生长特征 ,以便用该系统鉴定依R菌。方法 选取L -J法初步鉴定的依R菌 ,制成菌液 (10 -4 mg ml)分别以 0 .1ml接种于含不同利福平 (R)浓度 (1~ 384 μg ml)的 7H - 12液体培养基中培养 ,用BACTEC法测定不同实验瓶生长指数 (GI) ,判断耐药性 ,并对培养物称重及进行形态 (抗酸染色 )观察。结果  (1)耐药性 ,依R菌在R 1~ 96 μg ml 10个浓度中均耐药 ,R 192 μg ml临界 ,384 μg ml敏感。 (2 )菌体重量 ,R6、8、10、12、2 4 μg ml各瓶细菌重量 (分别为 87、12 5、116、10 4、6 5mg)明显高于对照瓶 (35mg) ,重量比为 1.9~3.6 ,平均 2 .9,其余各耐药瓶与对照瓶无明显差别。 (3)培养物涂片抗酸染色 ,可见各R瓶内结核分支杆菌菌体比对照瓶粗大、染色质深、染色颗粒明显 ,以R 8μg ml瓶最为典型。 结论 依R菌在含R(6~ 2 4 μg ml)环境中生长旺盛 。 展开更多
关键词 结构分支杆菌 利福平 治疗
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肺结核化疗中痰菌涂阳培阴若干问题探讨 被引量:2
9
作者 钟则风 肖雄伟 +2 位作者 彭育珩 钟敏 王安 《中国防痨杂志》 CAS 1991年第3期126-127,共2页
本文就近10年住院的90例肺结核,分析其涂阳培阴现象频率、与用药关系及预后。结果其频率为3.6%;强力化疗组较非强力化疗组出现早而多;75.6%发生于化疗开始2个月,87.8%发生于3个月以内,疗程结束涂、培均为阴性;其细菌学复发与耐药有... 本文就近10年住院的90例肺结核,分析其涂阳培阴现象频率、与用药关系及预后。结果其频率为3.6%;强力化疗组较非强力化疗组出现早而多;75.6%发生于化疗开始2个月,87.8%发生于3个月以内,疗程结束涂、培均为阴性;其细菌学复发与耐药有关。本文并就其避免检出误差和临床对策做了探讨。 展开更多
关键词 肺结核 结核杆菌 涂阳培阴
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力克肺疾与异烟肼、对氨基水杨酸钠的交叉耐药性试验 被引量:1
10
作者 沈丽 孔德平 +2 位作者 娄乐山 王安 王宇 《中国药业》 CAS 2002年第2期50-51,共2页
目的:了解力克肺疾(DIP)对耐异烟肼(INH)及耐对氨基水杨酸钠(PAS)菌株的交叉耐药情况,作为耐药病人对3种药物的选择依据。方法:对临床所获得18株痰分枝结核杆菌采用罗氏绝对浓度间接法进行3种药物的平行药物敏感... 目的:了解力克肺疾(DIP)对耐异烟肼(INH)及耐对氨基水杨酸钠(PAS)菌株的交叉耐药情况,作为耐药病人对3种药物的选择依据。方法:对临床所获得18株痰分枝结核杆菌采用罗氏绝对浓度间接法进行3种药物的平行药物敏感试验。结果:DIP、INH、PAS的耐药率分别为26.5%、51.4%、29.9%,耐INH或耐PAS菌株中对DIP的耐药符合率分别为44.18%、85.6%。结论:对已耐INH的肺结核病人仍有55.82%对DIP敏感,困此,此类病人半数以上可选择DIP作为一个敏感的新药。 展开更多
关键词 力克肺疾 耐药试验 对氨基水杨酸钠 抗结核药物 异烟肼
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非结核分支杆菌肺病8例误诊分析 被引量:1
11
作者 张春智 娄乐山 +1 位作者 钟敏 王安 《临床肺科杂志》 2000年第4期306-307,共2页
关键词 非结核分支杆菌肺病 误诊分析 非结核分支杆菌病 肺结核病 抗酸杆菌 肺结核患者 抗酸染色 抗结核药物 痰培养 痰涂片
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随机扩增DNA指纹分型分析耐利福平结核分支杆菌的传播
12
作者 陈炜 钟敏 +5 位作者 温博海 陈荣 钟明 娄乐山 王安 蹇锐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期942-944,共3页
目的 对临床分离菌株进行鉴定,分析耐利福平结核分支杆菌是否在人群中传播。方法 采用一对随机引物(P15’-CCGGGGCCGGTTC;P2 5’-CCGCCCACCGAC),对从重庆地区肺结核病人痰标本中分离到的100... 目的 对临床分离菌株进行鉴定,分析耐利福平结核分支杆菌是否在人群中传播。方法 采用一对随机引物(P15’-CCGGGGCCGGTTC;P2 5’-CCGCCCACCGAC),对从重庆地区肺结核病人痰标本中分离到的100株耐利福平结核分支杆菌的 DNA进行随机PCR扩增,根据扩增产物的DNA电泳指纹进行分型。结果100株耐利福平结核分枝杆菌的DNA指纹可分为6种类型,以Ⅱ、Ⅰ和Ⅲ型为主,它们分别占40%、31%和25%;这3型菌株有1/4是从初治结核病人的痰标本中分离,而在20-39岁年龄段则有1/3是从初治结核病人的痰标本中分离。结论 随机扩增DNA指纹是一种简便、敏感、重复性好的菌株分型方法,可用于耐药性结核病流行监测。重庆地区结核病的流行很可能与耐利福平结核分支杆菌的传播有关。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 利福平 耐药 DNA指纹 结核病
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蒸汽锤改为空气锤的理论技术分析
13
作者 王安 《锻压机械》 1995年第3期48-50,共3页
结合工厂蒸汽锤改为空气锤的实践,从热力学理论出发,探讨了锻锤在不同工作介质(蒸汽或压缩空气)时的工作状态及其对作功能力的影响,分析介绍了几项关键的技术措施。同时,对蒸汽锤改为空气锤后的综合经济效益作了简要介绍。
关键词 蒸汽锤 空气锤 技术改造 锻锤
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蒸汽锤改空气锤的技术分析及措施
14
作者 王安 《设备管理与维修》 1995年第4期13-14,共2页
一、蒸汽锤改空气锤技术的可行性分析 1.锻锤在不同工作介质时状态分析 我厂使用的蒸汽锤,大至16t模锻锤,小至250kg自由锻锤,均是以蒸汽作为工作介质而设计的,能否用压缩空气代替蒸汽而又保持原设计能力不变呢?根据热力学理论,气体传递... 一、蒸汽锤改空气锤技术的可行性分析 1.锻锤在不同工作介质时状态分析 我厂使用的蒸汽锤,大至16t模锻锤,小至250kg自由锻锤,均是以蒸汽作为工作介质而设计的,能否用压缩空气代替蒸汽而又保持原设计能力不变呢?根据热力学理论,气体传递能量的大小是与其状态有关的,即与状态参数比容(单位质量的物质所占有的容积,以V表示)、压力(物质垂直作用于器壁单位面积上之力, 展开更多
关键词 锻锤 蒸汽锤 空气锤 技术分析
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结核分支杆菌利福平及利福喷丁平行药敏测试87株结果分析 被引量:8
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作者 钟敏 刘清华 +3 位作者 杨小红 方启雪 沈丽 王安 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期411-411,共1页
关键词 结核分支杆菌 利福平 利福喷丁 平行药敏试验
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临床依赖利福平分支杆菌的初步研究 被引量:4
16
作者 钟敏 温博海 +3 位作者 王易伟 王安 陈荣 陈炜 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第8期504-504,共1页
关键词 肺结核 临床依赖利福平分支杆菌 研究 鉴定
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氧气湿化瓶污染情况调查 被引量:2
17
作者 沈丽 王安 李宁 《临床肺科杂志》 2001年第3期94-94,共1页
关键词 氧气湿化瓶 污染 调查
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养兔慎用植物饲料
18
作者 王安 《专业户》 2002年第2期47-47,共1页
家兔的养殖,当今在农村发展较快,给养殖户带来较好的效益。但家兔养殖,有些植物是不能作为饲料的.一旦被家兔采食,会造成中毒,甚至死亡。不能饲喂的植物有:蒲公英、夹竹桃、菠菜、酸模、柳叶、柳芽、地枣(绵枣)。
关键词 植物饲料 种类 安全性 饲料中毒 急救措施
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白大衣携带病原菌调查
19
作者 沈丽 王安 《临床肺科杂志》 2001年第3期94-94,共1页
关键词 白大衣 携带病原菌 医院内感染
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522株痰分支杆菌对DIP、INH、PAS药敏试验探讨
20
作者 杨晓梅 沈丽 +2 位作者 孔德萍 王宇 王安 《临床肺科杂志》 2002年第2期47-47,共1页
关键词 分支杆菌 抗结核药物 细菌耐药 DIP INH PAS 药敏试验
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