腹腔镜袖状胃切除术治疗病态性肥胖症合并2型糖尿病的疗效及相关因素分析 被引量：12

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作者 王孝珑 祝林 +3 位作者 葛宏 吴建林 杨晓平 刘志民 《腹腔镜外科杂志》 2021年第3期165-171,共7页

目的:探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)治疗病态性肥胖症合并2型糖尿病的临床疗效,并分析影响疗效的相关因素。方法:回顾分析2013年7月至2018年7月为45例病态性肥胖症合并2型糖尿病患者行LSG的临床资料及随访情况,分析手术对患者体重及血糖... 目的:探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)治疗病态性肥胖症合并2型糖尿病的临床疗效,并分析影响疗效的相关因素。方法:回顾分析2013年7月至2018年7月为45例病态性肥胖症合并2型糖尿病患者行LSG的临床资料及随访情况,分析手术对患者体重及血糖的控制情况,并应用单因素与多因素Logistic回归分析影响体重及血糖控制效果的相关因素。结果:45例手术均顺利完成,术后随访1年,患者体重、空腹血糖呈下降趋势,34例减肥效果佳或良好(额外体重减轻百分率≥50%),28例2型糖尿病治疗明显有效,有效率为62.2%。单因素Logistic回归分析显示,BMI、遵循术后指导及术后胃饥饿素水平影响LSG治疗病态性肥胖症的疗效(P<0.05);额外体重减轻百分率、吸烟、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、术后胆汁酸水平影响LSG对2型糖尿病的疗效(P<0.05)。多因素回归分析显示,BMI、是否遵循术后指导及术后胃饥饿素水平是LSG对病态性肥胖疗效的独立影响因素(P<0.05);额外体重减轻百分率、吸烟及胰岛素抵抗指数是LSG对2型糖尿病疗效的独立影响因素(P<0.05)。结论:LSG不仅治疗病态性肥胖症疗效确切,对于合并的2型糖尿病也有明显缓解作用,值得推广应用。 展开更多

关键词 肥胖症 糖尿病 2型 袖状胃切除术 腹腔镜检查

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术前营养风险筛查对腹腔镜辅助结直肠癌患者术后恢复的影响 被引量：12

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作者 王孝珑 吴建林 +7 位作者 雷森 田峰 祝林 曹策 张成才 徐其佐 石光锋 刘志民 《腹腔镜外科杂志》 2019年第3期220-225,共6页

目的:探讨结直肠癌患者术前营养风险筛查(NRS)对腹腔镜根治手术后恢复的影响,分析导致预后不良的因素。方法:回顾分析2015年1月至2017年8月为120例结直肠癌患者行腹腔镜辅助结直肠癌根治性切除术的临床资料,通过进行NRS 2002营养风险筛... 目的:探讨结直肠癌患者术前营养风险筛查(NRS)对腹腔镜根治手术后恢复的影响,分析导致预后不良的因素。方法:回顾分析2015年1月至2017年8月为120例结直肠癌患者行腹腔镜辅助结直肠癌根治性切除术的临床资料,通过进行NRS 2002营养风险筛查,将患者分为对照组(NRS 2002<3分,不存在营养风险)与观察组(NRS 2002≥3,存在营养风险),比较术前两组患者营养状况,分析术前营养状况对术后并发症及近期疗效的影响。采用单因素、多因素logistic回归分析对术后并发症的危险因素进行分析。结果:两组患者术前BMI、前白蛋白、总胆固醇及淋巴细胞数差异有统计学意义(P<0.05),术后各并发症发生率差异无统计学意义(P>0.05),但总并发症发生率差异有统计学意义(P<0.05);两组腹腔引流量、排气时间、住院费用、病重率及60 d再入院率差异均无统计学意义(P>0.05);观察组术后输血量、输白蛋白量、手术前后体重差、术后住院时间高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。单因素与多因素logistic回归分析显示,吸烟、糖尿病及术前存在营养风险是术后发生并发症的独立危险因素。结论:与术前不存在营养风险的患者相比,存在营养风险的患者术后并发症多,近期疗效差。术前应充分纠正患者营养状况,以减少并发症的发生,促进术后患者康复。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 营养风险筛查 腹腔镜检查 术后恢复

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NRP-1在胃癌组织及细胞系中的表达及临床意义 被引量：9

3

作者 张立 张迪 +5 位作者 周培华 王孝珑 王炜 陈南征 李孝彬 孙学军 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期82-86,共5页

目的研究神经纤毛蛋白1(NRP-1)在胃癌组织的表达,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理因素的关系及可能的临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测180例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织标本NRP-1表达,用免疫印迹方法检测胃癌组织及不同分化... 目的研究神经纤毛蛋白1(NRP-1)在胃癌组织的表达,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理因素的关系及可能的临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测180例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织标本NRP-1表达,用免疫印迹方法检测胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞NRP-1表达,K-M生存曲线和多因素回归模型用于分析胃癌预后。结果胃癌组织中NRP-1表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001),胃癌组织中NRP-1高表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、AJCC分期、T分期呈正相关(P<0.05)。多因素生存分析表明高表达NRP-1是胃癌患者总生存期的独立预后因子。结论过表达NRP-1可能在胃癌进展中发挥着重要作用,过表达NRP-1可作为生物标志物预测胃癌患者的不良预后。 展开更多

关键词 神经纤毛蛋白-1(NRP-1) 胃癌 免疫组织化学 免疫印迹 生存曲线 多因素回归模型

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腹腔镜袖状胃切除术对肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征中期疗效的临床研究 被引量：7

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作者 葛宏 吴建林 +5 位作者 苏莉莉 王孝珑 雷森 刘志民 宋斌 陈佑生 《腹腔镜外科杂志》 2020年第2期94-99,共6页

目的:探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)对肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAHS)的疗效,并分析其影响因素。方法:回顾分析2017年1月至2018年7月行腹腔镜袖状胃切除术的37例肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者的临床资料及随访资料,分析此... 目的:探讨腹腔镜袖状胃切除术(LSG)对肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAHS)的疗效,并分析其影响因素。方法:回顾分析2017年1月至2018年7月行腹腔镜袖状胃切除术的37例肥胖型阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患者的临床资料及随访资料,分析此术式对患者体重及OSAHS的控制情况,并采用单因素与多因素Logistic回归分析影响体重及OSASH控制效果的相关因素。结果:共37例患者完成手术并定期随访至术后12个月,患者术后体重指数呈下降趋势,额外体重减轻百分率达73.2%;阻塞性睡眠呼吸暂停综合征治疗有效率达91.89%,呼吸暂停低通气指数、夜间最低血氧浓度较术前均呈现明显改善趋势;单因素分析显示,性别、体重、额外体重减轻百分率、吸烟可影响LSG对OSAHS的疗效(P<0.05),额外体重减轻百分率、吸烟是影响LSG治疗病态性肥胖疗效的独立因素之一。结论:LSG可有效降低肥胖患者多余体重,具有可靠的减重疗效,同时对OSAHS患者具有良好的中期疗效,吸烟及额外体重减轻百分率可能是影响手术疗效的因素。 展开更多

关键词 肥胖症 睡眠呼吸暂停 阻塞性 袖状胃切除术 腹腔镜检查 临床研究

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上调miR-181a对胃癌细胞AGS增殖和凋亡的影响 被引量：6

5

作者 余钧辉 孙学军 +4 位作者 郑见宝 王孝珑 魏光兵 高琪 王恺 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期652-657,共6页

目的探讨miR-181a对胃癌细胞增殖、周期及凋亡的影响及其作用机制。方法荧光实时定量PCR检测5种胃癌细胞及人胃黏膜细胞系GES-1中miR-181a的表达情况,以及胃癌细胞AGS瞬时转染miR-181amimic后miR-181a的表达情况;MTT法和流式细胞仪检测... 目的探讨miR-181a对胃癌细胞增殖、周期及凋亡的影响及其作用机制。方法荧光实时定量PCR检测5种胃癌细胞及人胃黏膜细胞系GES-1中miR-181a的表达情况,以及胃癌细胞AGS瞬时转染miR-181amimic后miR-181a的表达情况;MTT法和流式细胞仪检测上调miR-181a表达对胃癌细胞AGS增殖、周期和凋亡等生物学行为的影响;Western blot检测上调miR-181a后细胞周期调控蛋白(CDC25A、cyclinA2、cyclinD1、p21)和凋亡相关蛋白(Bcl-2和Bax)的表达变化。结果与人胃黏膜细胞系GES-1比较,miR-181a在人胃癌细胞株SGC-7901和MKN28表达升高(P均<0.01),在MGC-803、BGC-823、AGS表达差异无统计学意义(P均>0.05);瞬时转染miR-181amimic后,胃癌细胞AGS中miR-181a的表达明显上调(P<0.05);转染miR-181amimics后AGS细胞增殖明显,G0/G1期细胞减少,S期细胞明显增多,细胞凋亡明显减弱(P均<0.05)。Western blot结果显示,上调miR-181a后胃癌细胞AGS中CDC25A、cyclinA2和Bcl-2表达升高(P均<0.05),cyclinD1和p21表达差异没有统计学意义(P>0.05),Bax表达降低(P<0.05)。结论上调miR-181a可以促进胃癌细胞AGS增殖,其作用机制可能与CDC25A、CyclinA2表达升高有关;上调miR-181a可抑制胃癌细胞凋亡,其作用机制可能与Bcl-2表达升高及Bax表达降低有关。 展开更多

关键词 miR-181a 胃癌 增殖 凋亡 细胞周期

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下调尾型同源盒基因-2对结肠癌细胞的侵袭及迁移能力的影响及其机制 被引量：3

6

作者 郑见宝 祁杰 +6 位作者 王训凯 李孝彬 王孝珑 陈南征 余钧辉 韩阳 孙学军 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期492-496,共5页

目的观察下调尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探讨CDX2基因在结肠癌发生发展过程中的作用及机制。方法构建CDX2RNAi慢病毒载体,并转染人结肠癌SW480、HT29细胞,应用Western blotting及qRT-PCR技术检测CDX... 目的观察下调尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探讨CDX2基因在结肠癌发生发展过程中的作用及机制。方法构建CDX2RNAi慢病毒载体,并转染人结肠癌SW480、HT29细胞,应用Western blotting及qRT-PCR技术检测CDX2基因的干扰效率;应用Transwell及划痕实验检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞侵袭、迁移能力的影响;Western blotting及RT-PCR检测下调CDX2表达对SW480、HT29细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因(E-cadherin、ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail)表达的影响。结果构建的CDX2RNAi慢病毒载体可有效地抑制SW480、HT29细胞中CDX2基因的表达;转染LV-CDX2-shRNA组与转染空病毒组(LV-NT-shRNA)及空白对照组相比,侵袭、迁移能力显著增强(P<0.05);且E-cadherin表达下降,ZEB-1、Vimentin、Twist、Snail表达均升高。结论下调CDX2可诱导EMT发生,从而增强结肠癌细胞的侵袭迁移能力。 展开更多

关键词 尾型同源盒基因-2(CDX2) 结肠癌 侵袭 迁移 上皮-间质转化(EMT)

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shRNA干扰CDX2基因表达对裸鼠结直肠癌肝转移瘤的影响 被引量：2

7

作者 郑见宝 李孝彬 +5 位作者 孙学军 王孝珑 王炜 魏光兵 陈南征 王恺 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期646-650,共5页

目的:建立人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型,探讨干扰尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2,CDX2)基因表达对结直肠癌肝转移瘤的影响。方法:通过慢病毒载体将CDX2-shRNA体外转染人结直肠癌细胞SW480、HT29,筛选建立稳定干扰CDX2基因表... 目的:建立人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型,探讨干扰尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2,CDX2)基因表达对结直肠癌肝转移瘤的影响。方法:通过慢病毒载体将CDX2-shRNA体外转染人结直肠癌细胞SW480、HT29,筛选建立稳定干扰CDX2基因表达细胞株和阴性病毒细胞株;将稳定干扰CDX2基因表达的结直肠癌细胞(SW480-KD、HT29-KD)、空白对照细胞(SW480-CON、HT29-CON)和阴性对照细胞(SW480-NC、HT29-NC)接种到裸鼠脾下极包膜内,建立裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型,每天称量裸鼠体质量并观察其摄食、活动及精神情况;50 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝转移瘤情况。结果:成功构建裸鼠结直肠癌肝转移模型,H-E染色确认为结直肠癌肝转移。各细胞干扰组(SW480-KD、HT29-KD)裸鼠体质量明显低于相应空白对照组和阴性对照组[SW480-KD:(15.02±2.00)vs(18.00±2.48)、(18.03±2.05)g;F=3.761,P<0.05;HT29-KD:(15.39±2.16)vs(17.96±2.48)、(18.30±1.87)g;F=3.721,P<0.05]。SW480-KD组肝转移瘤数目明显多于SW480-CON组和SW480-NC组[(57.83±22.56)vs(29.50±16.90)、(28.20±15.40)个;F=4.197,P<0.05];HT29-KD组肝转移瘤数目明显多于HT29-CON组和HT29-NC组[(56.83±29.16)vs(26.40±12.76)、(21.00±11.50)个;F=4.467,P<0.05)]。结论:脾注射法裸鼠肝转移模型可作为体内研究基因功能的理想模型;干扰CDX2基因表达可促进结直肠癌SW480和HT29细胞在体内的转移。 展开更多

关键词 干扰尾型同源盒基因2 短发夹RNA 结直肠癌 动物模型

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尾型同源盒转录因子2 shRNA慢病毒表达载体的构建及其转染对结肠癌细胞生长的影响 被引量：1

8

作者 王训凯 郑见宝 +3 位作者 孙学军 王孝珑 余钧辉 李孝斌 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期529-534,共6页

目的:构建尾型同源盒转录因子2(CDX2)shRNA慢病毒表达载体,并观察下调CDX2基因其对结肠癌细胞生长的影响。方法:根据CDX2 m RNA序列设计shRNA,并合成shRNA的互补序列,通过连接酶链接到GV248载体上,用测序方法鉴定阳性克隆后,将构建好的... 目的:构建尾型同源盒转录因子2(CDX2)shRNA慢病毒表达载体,并观察下调CDX2基因其对结肠癌细胞生长的影响。方法:根据CDX2 m RNA序列设计shRNA,并合成shRNA的互补序列,通过连接酶链接到GV248载体上,用测序方法鉴定阳性克隆后,将构建好的慢病毒表达载体与慢病毒包装载体用Lpofectamine 2000共转染293T细胞,产生慢病毒颗粒并用稀释法进行滴度测定。将CDX2 shRNA慢病毒表达载体转染人结肠癌细胞SW480、HT29后,分别用q RT-PCR和Western blot检测CDX2 m RNA及蛋白水平,CCK8实验及克隆形成实验检测细胞增殖能力。结果:DNA测序鉴定证实,CDX2 shRNA表达片段正确插入GV248载体中,包装后的病毒滴度为1×109TU/m L;SW480、HT29细胞转染CDX2-shRNA慢病毒表达载体后,CDX2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(均P<0.05),但细胞的增殖与克隆形成能力无明显改变(均P>0.05)。结论:成功构建shRNA慢病毒表达载体,其转染结肠癌细胞后能有效地抑制CDX2基因的表达;下调CDX2基因对人结肠癌细胞的增殖无明显影响。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 基因 同源盒 RNA干扰

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5HRE联合CEAp靶向调控RASSF1A基因对SGC7901胃癌细胞株抑制作用的研究 被引量：1

9

作者 周培华 孙学军 +8 位作者 郑见宝 王炜 王孝珑 陈南征 魏光兵 范渊 李孝彬 王训凯 禄韶英 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2015年第10期1201-1208,共8页

目的探讨人5拷贝低氧反应元件(5HRE)联合癌胚抗原启动子(CEAp)调控元件的靶向性及调控RAS相关区域家族1A(RASSF1A)抑癌基因的慢病毒载体对SGC7901胃癌细胞的抑制作用。方法 1分别采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学SP染色及West... 目的探讨人5拷贝低氧反应元件(5HRE)联合癌胚抗原启动子(CEAp)调控元件的靶向性及调控RAS相关区域家族1A(RASSF1A)抑癌基因的慢病毒载体对SGC7901胃癌细胞的抑制作用。方法 1分别采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学SP染色及Western blot法检测SGC7901、MKN28和MCF-10A细胞株中癌胚抗原(CEA)mRNA及其蛋白,以及RASSF1A蛋白的表达水平,以确定实验细胞和阴性对照细胞。2构建p GL4.20-5HRE-CEAp-Luc载体以转染SGC7901、MKN28和MCF-10A细胞株,将各细胞株分为2组,分别加入(缺氧组)或不加入CoCl2(常氧组),比较各细胞株中缺氧组和常氧组细胞的启动活性。3将重组慢病毒载体(p LV-5HRE-CEAp-RASSF1A)及相应空病毒载体包装成病毒颗粒LV-5HC-RASSF1A(感染组)和LV-NC(阴性对照组),感染SGC7901细胞。以未感染任何病毒的SGC7901细胞作为空白对照组,将该3组细胞再分为2个亚组,分别加入(缺氧组)或不加入CoCl2(常氧组),比较缺氧组和常氧组细胞中RASSF1A蛋白的表达水平和细胞增殖抑制率。结果 1 q RT-PCR结果显示:SGC7901细胞株中CEA m RNA的表达水平高于MKN28及MCF-10A细胞株(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示:CEA的表达水平在SGC7901、MKN28及MCF-10A细胞株中依次递减,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:在SGC7901及MKN28细胞株中未检测到RASSF1A蛋白的电泳条带,而在MCF-10A细胞株中可检测到。据此确定SGC7901细胞株为实验细胞,MKN28细胞株为阴性对照细胞。2转染p GL4.20-5HRE-CEAp-Luc载体后,在SGC7901及MKN28细胞株中,同种细胞株内与常氧组比较,缺氧组细胞的活性倍数均升高(P<0.01);而在MCF-10A细胞株中,常氧组和缺氧组细胞的活性倍数比较差异无统计学意义(P>0.05)。在不加入CoCl2条件和加入CoCl2条件下,同等条件下与SGC7901细胞株比较,MKN28及MCF-10A细胞株的活性倍数均较低(P<0.05);与MKN28细胞株比较,MCF-10A细胞株的活性倍数� 展开更多

关键词 5拷贝低氧反应元件 癌胚抗原启动子 RAS相关区域家族1A基因 胃癌 基因治疗

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5HRE增强子和hTERT启动子联合调控CDX2基因对裸鼠移植瘤的抑制作用

10

作者 祁杰 郑见宝 +6 位作者 孙学军 王孝珑 余钧辉 吴云桦 高琪 王恺 贺赛 《山西医科大学学报》 CAS 2017年第3期246-250,共5页

目的探讨5HRE增强子和hTERT启动子联合调控CDX2基因对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为结肠癌生物治疗提供实验依据。方法将复苏前期筛选的稳定表达pLVX-hTERTp-CDX2-3FLAG(hC)的LoVo细胞(hC/LoVo)、空LoVo细胞、稳定表达pLVX... 目的探讨5HRE增强子和hTERT启动子联合调控CDX2基因对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为结肠癌生物治疗提供实验依据。方法将复苏前期筛选的稳定表达pLVX-hTERTp-CDX2-3FLAG(hC)的LoVo细胞(hC/LoVo)、空LoVo细胞、稳定表达pLVX-5HRE-hTERTp-3FLAG(5Hh)的LoVo细胞(5Hh/LoVo)及转染pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)的LoVo细胞(5HhC/LoVo),接种各组细胞制备裸鼠皮下移植瘤模型,观察构建的载体对LoVo细胞移植瘤生长的影响;免疫组化法观察移植瘤CDX2和Ki-67的表达情况。结果成功复苏转染5HhC的LoVo细胞及各组对照LoVo细胞。各组裸鼠皮下接种肿瘤细胞后均成功致瘤,成瘤率为100%;5HhC组种植瘤生长速度显著低于其他组(P<0.05);终点时间第18天时,5HhC组裸鼠皮下种植瘤的体积明显小于其他各组(P<0.05);5HhC组种植瘤质量为(0.20±0.16)g,明显低于hC/LoVo组(0.34±0.21)g,空LoVo细胞组(0.61±0.19)g及5Hh/LoVo组(0.55±0.27)g(P<0.05);5HhC组种植瘤中CDX2表达为(87±7)%,明显低于hC/LoVo组(55±4)%,空LoVo细胞组(15±3)%及5Hh/LoVo组(17±5)%(P<0.05);5HhC组种植瘤中Ki-67表达为(7±7)%,明显低于hC/LoVo组(13±2)%,空LoVo细胞组(38±5)%及5Hh/LoVo组(85±9)%(P<0.05)。结论构建的双靶向调控载体5HhC可以抑制结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤的生长。 展开更多

关键词 基因治疗载体 结肠癌 裸鼠 移植瘤 CDX2 Ki-67

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胃袖带切除术对GK大鼠2型糖尿病的影响及其机理

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作者 张仕运 孙学军 +6 位作者 郑见宝 王炜 刘栋 陈南征 贺赛 周培华 王孝珑 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2013年第12期1363-1368,共6页

目的研究胃袖带切除术(sleeve gastrectomy,SG)对GK大鼠2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗作用及其可能机理。方法将13只12周龄的GK大鼠随机分为2组:SG组7只和假手术组(SO组)6只,分别行SG术和假手术。于术前及术后1、4、1... 目的研究胃袖带切除术(sleeve gastrectomy,SG)对GK大鼠2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的治疗作用及其可能机理。方法将13只12周龄的GK大鼠随机分为2组:SG组7只和假手术组(SO组)6只,分别行SG术和假手术。于术前及术后1、4、10和26周测量2组大鼠的体质量、24 h进食量、空腹血糖值、血清胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)和血清生长激素释放肽(Ghrelin)浓度;于术后10周检测2组大鼠的粪便能量含量,并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)和胰岛素耐受性实验(ITT)。结果①体质量:各时点2组大鼠的体质量比较差异均无统计学意义(P>0.05);与术前比较,术后1周2组大鼠的体质量均降低(P<0.01),术后10和26周的体质量均增加(P<0.01)。②24 h进食量:与SO组比较,术后4和10周SG组大鼠的24 h进食量均较低(P<0.05)。与术前比较,SG组大鼠术后1、4及10周的进食量均较低(P<0.05),SO组大鼠术后1周的进食量低于术前(P<0.05)。③空腹血糖值:与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的空腹血糖值均较低(P<0.01)。与术前比较,SG组大鼠术后各时点的空腹血糖值均较低(P<0.01),而SO组大鼠仅术后1周明显低于术前(P<0.01)。④血清GLP-1水平:与SO组比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平均较高(P<0.05)。与术前比较,术后4、10及26周SG组大鼠的血清GLP-1水平较高(P<0.05),而术后SO组大鼠的血清GLP-1水平无明显变化(P>0.05)。⑤血清Ghrelin水平:与SO组比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低(P<0.01)。与术前比较,术后各时点SG组大鼠的血清Ghrelin水平均较低(P<0.001),而SO组大鼠的血清Ghrelin水平无明显变化(P>0.05)。⑥曲线下面积(AUC):SG组大鼠的AUC(OGTT和ITT)均较SO组低(P<0.01)。结论 SG术可以明显降低GK大鼠的空腹血糖值,改善葡萄糖耐量及增强胰岛素敏感性,该作用可能是GLP-1、Grelin等多种胃肠道激素共同作用的结果。SG术可能是潜� 展开更多

关键词 胃袖带切除术 2型糖尿病 胃肠道激素 大鼠

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热诱导肿瘤特异性基因治疗载体的靶向性鉴定

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作者 王孝珑 周培华 +5 位作者 郑见宝 魏光兵 陈南征 姚建锋 孙小菊 孙学军 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期9-13,38,共6页

目的检测已构建热反应元件修饰的端粒酶逆转录酶hTERT基因启动子(8HSEs-hTERTp)调控的基因表达载体肿瘤特异性和热诱导特性。方法①RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测细胞内hTERT mRNA和蛋白表达水平,选择hTERT高表达和低表达的... 目的检测已构建热反应元件修饰的端粒酶逆转录酶hTERT基因启动子(8HSEs-hTERTp)调控的基因表达载体肿瘤特异性和热诱导特性。方法①RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学检测细胞内hTERT mRNA和蛋白表达水平,选择hTERT高表达和低表达的细胞株作为该研究阳性细胞株和阴性细胞株;②收集前期已包装成功的热反应元件8HSEs和人端粒酶逆转录酶启动子hTERTp联合调控自杀基因PNP表达的慢病毒表达载体8HhP病毒液,感染hTERT+SW480细胞及hTERT-MKN28细胞、hTERT-MRC-5细胞,细胞免疫荧光技术检测该治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性;并用Western blot和RT-PCR分别检测热刺激条件下目的基因PNP在不同hTERT水平细胞株中的表达水平。结果 hTERT mRNA及蛋白在SW480细胞中高表达,在MKN28细胞和MRC-5细胞中低表达甚至阴性表达;免疫荧光、RT-PCR和Western blot结果显示,8HSEs-hTERTp调控的目的基因PNP只有在43℃处理下的SW480细胞中呈现高表达,而在阴性细胞株MKN28和MRC-5中PNP表达较少,而常温下SW480细胞中PNP的表达水平明显低于热处理组。结论 8HSEs修饰的hTERT启动子可以明显提高治疗载体的肿瘤特异性及热反应特性。 展开更多

关键词 热反应 HTERT启动子 自杀基因PNP 治疗载体 Western BLOT RT-PCR 细胞免疫荧光

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热诱导对8HSE修饰的hTERT启动子转录活性的增强作用

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作者 王孝珑 贺赛 +7 位作者 孙学军 周培华 郑见宝 魏光兵 崔飞博 肖宁 张立 禄韶英 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期717-722,共6页

目的:探讨热诱导对8倍重复串联热休克元件(8HSE)修饰的人端粒酶逆转录酶启动子(h TERTp)转录活性及靶向性的影响。方法:用PCR法从人结肠癌基因组中克隆h TERTp;将单纯的h TERTp或8HSE修饰的h TERTp重组于双荧光素酶报告载体p GL4.2后,... 目的:探讨热诱导对8倍重复串联热休克元件(8HSE)修饰的人端粒酶逆转录酶启动子(h TERTp)转录活性及靶向性的影响。方法:用PCR法从人结肠癌基因组中克隆h TERTp;将单纯的h TERTp或8HSE修饰的h TERTp重组于双荧光素酶报告载体p GL4.2后,分别与内参质粒p GL4.74(含TK启动子)共转染h TERT高表达的SW480细胞株和h TERT低表达的MKN28细胞株,双荧光素酶法检测h TERTp在37℃及43℃下的转录活性。结果:PCR、酶切和DNA测序表明h TERTp克隆、8HSE合成及载体构建成功。37℃下,单纯h TERTp在SW480细胞中的转录活性明显高于MKN28细胞(P<0.05),8HSE对h TERTp转录活性无增强作用,且在SW480细胞中8HSE对h TERT转录活性具有抑制作用;43℃下,单纯h TERTp的转录活性在两种细胞中无明显改变(P>0.05),但与单纯h TERTp比较,8HSE修饰的h TERTp转录活性在SW480细胞中明显增强(P<0.05),而在MKN28细胞中无明显改变(P>0.05)。结论:热诱导对h TERTp转录活性无明显影响,但对8HSE修饰的h TERTp转录活性有明显的增强作用,且该调控元件靶向于h TERT高表达的肿瘤细胞。 展开更多

关键词 肿瘤 转录因子 HSP70热休克蛋白质类 转录启动子

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