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4-HNE通过抑制TNF-α介导的NF-κB活化诱导酒精性肝损伤 被引量：17
1
作者 于晨辉 杜仲燕 +2 位作者 高佳 王伟茜 窦晓兵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1046-1052,共7页
目的:通过体外细胞及体内动物实验,研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的4-羟基壬烯酸(4-HNE)致敏肝细胞发生死亡的作用及机制。方法:以人肝细胞株HepG2及小鼠原代肝细胞为细胞模型,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放及MTT比色法检测4-HNE对TNF-α... 目的:通过体外细胞及体内动物实验,研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的4-羟基壬烯酸(4-HNE)致敏肝细胞发生死亡的作用及机制。方法:以人肝细胞株HepG2及小鼠原代肝细胞为细胞模型,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放及MTT比色法检测4-HNE对TNF-α诱导的肝细胞死亡的作用,利用Western blotting技术检测细胞内4-HNE与蛋白质形成的加合物水平,通过Western blotting和ELISA技术检测细胞核内NF-κB(p65)的表达及其与DNA结合活性。以C57BL/6小鼠为动物模型,利用HE染色、ELISA、Western blotting及TUNEL等技术,检测长期摄入酒精前后动物肝组织形态、甘油三酯(TG)水平、4-HNE水平、TNF-α水平及血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性的变化。结果:(1)4-HNE可以显著增加HepG2细胞及小鼠原代肝细胞对TNF-α杀伤作用的敏感性,从而使TNF-α诱导4-HNE致敏的肝细胞死亡。(2)4-HNE可显著提高HepG2细胞内4-HNE-蛋白质加合物的水平。(3)4-HNE抑制HepG2细胞内TNF-α介导的NF-κB活化。(4)长期摄入酒精导致小鼠肝细胞内4-HNE和TNF-α水平升高,引起肝细胞内TG水平升高,血浆ALT活性升高,肝细胞死亡增多。结论:长期摄入酒精使肝细胞发生氧化应激,其产物4-HNE可作为一种肝细胞致敏因子,通过抑制肝细胞内TNF-α介导的NF-κB抗细胞凋亡信号通路,诱导酒精性肝损伤。这可能是一种新的酒精性肝病发病机制。 展开更多
关键词 酒精性肝病 4-羟基壬烯酸 肿瘤坏死因子α 核因子ΚB 肝细胞
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4-羟基壬烯酸诱导酒精性肝病的分子机制 被引量：2
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作者 杜仲燕 高佳 +2 位作者 王伟茜 于晨辉 窦晓兵 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期747-752,共6页
目的 通过体内动物实验和体外细胞实验,探讨4-羟基壬烯酸（4-HNE）对肿瘤坏死因子（TNF）介导的肝细胞内核因子κB （NF-κ B）抗凋亡通路的抑制作用及其机制,进一步从细胞信号通路及蛋白质翻译后修饰水平揭示4-HNE促TNF介导酒精性肝病... 目的 通过体内动物实验和体外细胞实验,探讨4-羟基壬烯酸（4-HNE）对肿瘤坏死因子（TNF）介导的肝细胞内核因子κB （NF-κ B）抗凋亡通路的抑制作用及其机制,进一步从细胞信号通路及蛋白质翻译后修饰水平揭示4-HNE促TNF介导酒精性肝病（ALD）的发病机制.方法 用Lieber-DeCarli小鼠模型、人肝癌细胞株HepG2和小鼠原代肝细胞,通过四甲基偶氮唑盐法、乳酸脱氢酶测定、Westem blot、免疫荧光染色等检测4-HNE对TNF介导的肝细胞损伤作用及4-HNE表达水平；通过酶联免疫吸附实验、实时荧光定量PCR检测肝细胞内NF-κ B的含量、其与DNA的结合活性及其所调控的抗凋亡基因的表达情况；用Western blot及免疫共沉淀技术检测NF-κB抑制蛋白（IκBα）及其激酶（IKK）的磷酸化以及4-HNE对IκBα、IKK的翻译后修饰水平.计量资料两个样本均数间比较用t检验,多个样本均数间比较用方差分析. 结果 （1）体内动物实验：模型组小鼠肝内甘油三酯水平（36.1±6.9） mg/g、血浆ALT水平（39.8±8.9） U/L和肝内TNF水平（650.8±28.9） pg/g明显高于对照组[分别为（13.6±3.2） mg/g、（18.3±4.1） U/L和TNF （320.2±14.1）pg/pg,差异有统计学意义,JP值均＜0.01.与对照组相比,模型组小鼠4-HNE与蛋白质形成的加合物增多,肝细胞脂质变性、细胞凋亡增多,肝细胞核内NF-κ B（p65）与DNA的结合活性（0.13±0.01）也较对照组（0.17±0.03）明显下降（t=4.178,P＜0.05）,NF-κB（p65）蛋白表达水平降低,IκBα蛋白磷酸化水平降低,4-HNE-I κ B α加合物增多.（2）体外细胞实验：①在HepG2及小鼠原代肝细胞中,与TNF组相比,4-HNE/TNF组肝细胞增殖活性下降,随着4-HNE、TNF浓度的增加,增殖活性呈剂量依赖性降低,细胞凋亡增多,细胞释放的乳酸脱氢酶活性升高（F=7.262,P＜0.05）,4-HNE/TNF组明显诱导聚腺苷二磷酸核糖聚合酶蛋白剪切.②在HepG2细胞和小鼠� 展开更多
关键词 肝疾病 酒精性 NF-ΚB 肿瘤坏死因子Α 4-羟基壬烯酸
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2型糖尿病磁共振成像静息态低频振幅变化及其与认知受损的相关性 被引量：3
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作者 王伟茜 刘新凤 +6 位作者 曹卫芳 薛雅卓 郭艳成 卢爱霞 崔栋 郭永新 焦青 《中国医学物理学杂志》 CSCD 2018年第5期543-548,共6页
目的:应用功能磁共振成像技术及认知功能测试探讨2型糖尿病(T2DM)静息态脑功能改变。方法:采集28例T2DM患者及28例正常中老年人的静息态功能磁共振信号和认知功能指标,计算分数低频振幅(f ALFF),比较两组被试的f ALFF差异,并分析其与行... 目的:应用功能磁共振成像技术及认知功能测试探讨2型糖尿病(T2DM)静息态脑功能改变。方法:采集28例T2DM患者及28例正常中老年人的静息态功能磁共振信号和认知功能指标,计算分数低频振幅(f ALFF),比较两组被试的f ALFF差异,并分析其与行为学指标的相关性。结果:与健康成年人相比,T2DM患者的f ALFF在右侧小脑、右侧背外侧额上回显著增加,在左侧颞中回、左侧距状裂、右侧颞中回、右侧辅助运动区显著降低。右侧颞中回与连线测试A的结果呈负相关。结论:结果表明T2DM患者具有异常的神经自发神经活动,为糖尿病患者降低的认知功能提供初步的影像学证据。 展开更多
关键词 2型糖尿病 功能磁共振成像 分数低频振幅 认知受损
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