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中医成药治疗甲型H1N1流感研究进展 被引量：17
1
作者 陈琪 吴莹 +2 位作者 齐晓宇 玄子男 陈晓鸣 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第19期3793-3796,共4页
近年来,中医药治疗甲型H1N1流感取得了较好的临床疗效。尽管目前临床对甲型H1N1流感的治疗仍以西药为主,但西药抗病毒药存在副作用大,易引起耐药性等缺点,限制了治疗的效果。中医治疗甲型H1N1流感则具有独特的思路,根据甲型H1N1流感不... 近年来,中医药治疗甲型H1N1流感取得了较好的临床疗效。尽管目前临床对甲型H1N1流感的治疗仍以西药为主,但西药抗病毒药存在副作用大,易引起耐药性等缺点,限制了治疗的效果。中医治疗甲型H1N1流感则具有独特的思路,根据甲型H1N1流感不同进展阶段的不同证型,选择不同的中药进行"辨证论治",不仅能减轻西药的不良反应,而且在疾病的治疗上也有独特的功效。我们总结了近来学者们对中医成药治疗甲型H1N1流感的临床及基础研究,将甲型H1N1流感分为轻、中、重三种,并分别根据症状与中医证型相匹配,梳理了临床用于治疗甲型H1N1流感的中医成药的适应证型与作用机制。因此,在西药进行抗病毒治疗的同时,根据疾病进展不同阶段的中医的证型,选用不同的中医方药,可有效减少西药的不良反应,取得更好的疗效。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感 中医成药 治疗 证型
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小鼠流感病毒性肺炎模型中肠道的病变及在中医理论研究中的应用 被引量：5
2
作者 张淑静 吴莹 +6 位作者 齐晓宇 葛东宇 李根茂 玄子男 王谦 王旭丹 李姝玉 《世界中医药》 CAS 2016年第2期283-287,共5页
目的:建立小鼠流感性肺炎模型,明确呼吸道流感病毒感染过程中是否存在特异性的肠道病理损伤,并探讨了其在"肺与大肠相表里"研究中的应用。方法:BALB/c小鼠48只随机分为正常组、病毒组。病毒组给予50μL、50LD50病毒液滴鼻建... 目的:建立小鼠流感性肺炎模型,明确呼吸道流感病毒感染过程中是否存在特异性的肠道病理损伤,并探讨了其在"肺与大肠相表里"研究中的应用。方法:BALB/c小鼠48只随机分为正常组、病毒组。病毒组给予50μL、50LD50病毒液滴鼻建立流感病毒感染的小鼠肺炎模型,感染后第3、5、6天分别取材,HE染色检测肺脏、大肠、小肠、心脏、肝脏、肾脏组织病理结果,血生化检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和尿素氮(BUN)水平。结果:流感病毒感染后,病毒组小鼠肺组织出现明显的炎性病变外,随时间延长肺组织充血水肿出血加重;小肠黏膜腺体排列紊乱,绒毛粗大、部分脱落,黏膜固有层炎性细胞浸润;大肠黏膜固有层、肌层大量炎性细胞浸润,腺体结构消失、脱落;而心脏、肝脏、肾脏无明显病理改变;病毒组小鼠血清AST、ALT、BUN较正常组相比,差异无统计学意义。结论:小鼠流感病毒性肺炎模型中存在小肠、大肠特异性免疫病理损伤,是研究中医"肺与大肠相表里"理论及相关临床治法的理想模型。 展开更多
关键词 流感病毒 肺炎 肠道免疫病理 肺与大肠相表里
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小檗碱对流感病毒感染HUVEC细胞骨架及通透性的影响 被引量：4
3
作者 陈晓鸣 张淑静 +5 位作者 齐晓宇 玄子男 张俊杰 葛东宇 王旭丹 吴莹 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2017年第12期28-31,共4页
目的 :检测小檗碱(Berberine)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)细胞骨架及通透性的影响。方法 :常规鸡胚增殖传代甲型流感病毒A/PR/8/34,-80℃冰箱保存,空斑实验检测病... 目的 :检测小檗碱(Berberine)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)细胞骨架及通透性的影响。方法 :常规鸡胚增殖传代甲型流感病毒A/PR/8/34,-80℃冰箱保存,空斑实验检测病毒滴度;将HUVEC接种于96孔板,MTT法检测小檗碱对HUVEC的细胞毒性;用30 MOI A/PR/8/34病毒株刺激病毒组和小檗碱给药组HUVECs,小檗碱组加入5μg/m L小檗碱溶液,分别于给药的第0、2、6、12、24、36小时检测各组电阻值;激光共聚焦检测观察各组细胞骨架形态。结果 :A/PR/8/34的病毒滴度为(2~3)×108 PFU/m L;小檗碱对HUVEC最大无毒浓度为10μg/m L,细胞存活率约为94.05%;小檗碱组(5μg/m L)较病毒组细胞通透性显著降低(P<0.05),且与正常组相差不大(P>0.05);小檗碱组与病毒组相比,HUVEC细胞内球状肌动蛋白聚合成丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)分布于细胞膜,应力纤维减少,且细胞边缘恢复平整,呈现出不规则多边形,与正常组细胞表现趋向一致。结论 :小檗碱具有改善流感病毒感染后的内皮细胞骨架重构、细胞收缩和细胞形态改变的作用,从而改善流感病毒感染后内皮细胞通透性的升高。 展开更多
关键词 小檗碱 流感病毒 细胞骨架 细胞通透性
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毛蕊异黄酮对流感病毒感染HUVEC细胞通透性及其MLC磷酸化的影响 被引量：4
4
作者 张俊杰 钟婧 +5 位作者 张淑静 董瑞娟 葛东宇 玄子男 陈晓鸣 吴莹 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第6期1368-1372,1547-1548,共6页
目的:通过检测毛蕊异黄酮(Calycosin)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)通透性升高及其肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的影响来探讨其改善内皮细胞通透性的机制。方法:设置正常... 目的:通过检测毛蕊异黄酮(Calycosin)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)通透性升高及其肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的影响来探讨其改善内皮细胞通透性的机制。方法:设置正常组、病毒组和毛蕊异黄酮组;将HUVEC接种于96孔板,MTT法检测不同浓度毛蕊异黄酮的细胞毒性;30 MOI PR8病毒感染病毒组与毛蕊异黄酮组HUVECs后,毛蕊异黄酮组加入20μg/mL毛蕊异黄酮溶液,采用内皮细胞跨膜电阻法检测各组在不同时间点的跨膜电阻值;激光共聚焦显微镜观察各组细胞内丝状肌动蛋白(Filamentous actin,F-actin)的表达和分布;Western Blot检测各组MLC、p-MLC蛋白表达水平;将MDCK接种于96孔板,用PR8病毒感染细胞,MTT法检测不同浓度毛蕊异黄酮的抗病毒活性。结果:毛蕊异黄酮对HUVEC的最大无毒浓度为40μg/mL,细胞存活率约为91.69%;毛蕊异黄酮组细胞通透性与正常组细胞相比无显著差异,但通透性显著低于病毒组(P<0.05);病毒组的F-actin发生变构、细胞中出现粗大的应力纤维,分布于胞浆中,而毛蕊异黄酮组的F-actin分布于细胞膜、应力纤维减少;与正常组相比,病毒组的p-MLC蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)、与病毒组相比,毛蕊异黄酮组的p-MLC蛋白表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);毛蕊异黄酮对流感病毒感染的MDCK细胞的抗病毒作用并不明显。结论:毛蕊异黄酮可通过抑制p-MLC蛋白的表达来抑制流感病毒引起的内皮细胞通透性升高及F-actin变构的作用,从而达到保护内皮细胞的功能。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 流感病毒 HUVEC 细胞通透性 MLC
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靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制 被引量：4
5
作者 吴莹 张淑静 +4 位作者 张晨月 玄子男 李姝玉 高誉珊 胡雨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期456-461,共6页
目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒... 目的构建分别靶向ezrin(E)、radixin(R)、moesin(M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响。方法根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响。结果重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-MsiRNA、Lenti-control-siRNA构建成功。慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80%以上。Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达。流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平。结论成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制。 展开更多
关键词 小干扰RNA EZRIN RADIXIN MOESIN 肺微血管内皮细胞 流感病毒 复制
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犀角地黄汤合银翘散对流感病毒感染小鼠肺组织MLC磷酸化信号通路的影响 被引量：2
6
作者 齐晓宇 吴莹 +4 位作者 张淑静 玄子男 陈晓鸣 李姝玉 陈向阳 《世界中西医结合杂志》 2016年第11期1526-1531,共6页
目的以流感病毒感染的小鼠为模型,检测犀角地黄汤合银翘(XDY)对小鼠肺组织中肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化信号通路的影响,以明确其抗病毒作用的分子机制。方法将50只雄性Balb/c小鼠按体重随机分为5组,每组10只,分别为正常组、病毒组和XDY低... 目的以流感病毒感染的小鼠为模型,检测犀角地黄汤合银翘(XDY)对小鼠肺组织中肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化信号通路的影响,以明确其抗病毒作用的分子机制。方法将50只雄性Balb/c小鼠按体重随机分为5组,每组10只,分别为正常组、病毒组和XDY低、中、高剂量给药组,除正常组小鼠外,其余组用A/FM/1/34(H1N1)病毒株滴鼻感染。1 h后,病毒组蒸馏纯水灌胃,2次/d;其余三组分别用低、中、高剂量的XDY灌胃,2次/d。感染后第4天摘眼球处死小鼠,RT-PCR检测各组小鼠肺组织中病毒RNA水平;Western bolt检测肺组织MLC、p-MLC、PKC、p-PKC、ROCK-1、ERM、p-ERM蛋白表达水平。结果与病毒组相比,XDY中剂量组病毒RNA含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),而高剂量组和低剂量组病毒RNA含量则无明显变化。XDY中剂量组Rho/ROCK、PKC以及p-MLC、p-ERM蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,病毒组小鼠肺组织中ROCK1、PKC表达显著增加,p-MLC、p-ERM蛋白表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 XDY可通过抑制Rho/ROCK、PKC信号通路活化,抑制p-MLC蛋白表达,减少流感病毒在体内的复制,从而起到抗病毒作用。 展开更多
关键词 犀角地黄汤合银翘散 流感病毒感染 MLC ROCK1 PKC
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HPLC、HPLC-MS在经方成分分析及Co-IP、激光共聚焦在经方药理机制研究中的应用 被引量：1
7
作者 吴莹 陈向阳 +1 位作者 玄子男 李宇航 《世界中医药》 CAS 2015年第1期7-12,共6页
经方用药精妙、临床疗效卓越,为历代医家所尊崇,也是科学研究者的重点研究对象。经方药物组成多样、成分复杂。经方的现代研究面临药理作用机制复杂、有效成分不明确等问题,从而制约了经方在现代医学领域的推广以及国际化的进程。HPLC及... 经方用药精妙、临床疗效卓越,为历代医家所尊崇,也是科学研究者的重点研究对象。经方药物组成多样、成分复杂。经方的现代研究面临药理作用机制复杂、有效成分不明确等问题,从而制约了经方在现代医学领域的推广以及国际化的进程。HPLC及HPLC-MS联用技术广泛被应用到药物的分析、质控,同样适用于经方的成分分析。文章介绍了HPLC及HPLC-MS联用技术在经方成分及含量的鉴定中的应用,包括经方样品的前处理、经方成分的定量、定性分析以及经方的药物代谢研究等方面。免疫共沉淀技术可用于检测经方对蛋白之间的相互作用的影响,激光共聚焦技术可用于观察经方对蛋白、离子等的分布、转移的影响。结合免疫共沉淀与激光共聚焦技术,能更好地解析经方药理作用的分子机制,因此,文章对免疫共沉淀及激光共聚焦技术在经方现代药理研究中的应用也进行了介绍。 展开更多
关键词 经方 高效液相色谱 液质联用技术 免疫共沉淀 激光共聚焦技术
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