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survivin基因在非小细胞肺癌中的表达及与P53、c-myc、k-ras蛋白表达的关系 被引量:63
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作者 王孝养 陈仕新 +3 位作者 张珍祥 吕嘉春 方慧娟 维宁 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期371-374,I004,共5页
目的 探讨survivin基因在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达 ,及与P5 3、c myc、k ras蛋白表达的相互关系。方法 逆转录PCR法检测了 76例NSCLC肿瘤组织 ,2 0例良性瘤样病变和 2 1例病灶旁正常肺组织survivinmRNA表达 ,免疫组织化学法检测P... 目的 探讨survivin基因在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达 ,及与P5 3、c myc、k ras蛋白表达的相互关系。方法 逆转录PCR法检测了 76例NSCLC肿瘤组织 ,2 0例良性瘤样病变和 2 1例病灶旁正常肺组织survivinmRNA表达 ,免疫组织化学法检测P5 3、c myc、k ras蛋白表达 ,并将结果进行了相关分析。结果  6 1%NSCLC癌组织表达survivinmRNA基因 ,而良性瘤样病变和正常组织则分别为 30 %和 19% (P <0 0 0 1)。survivin基因表达与肺癌组织细胞类型、分化程度、TNM分期及淋巴结转移无明显相关关系。P5 3蛋白、c myc与survivin基因表达显著相关 ,k ras蛋白表达与survivin基因表达未见明显相关。结论  (1)survivin基因在肺癌组织中表达上调 ,提示该基因对NSCLC发生发展起重要作用。survivin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点。 (2 )抑癌基因P5 3的失活和癌基因c myc的上调与survivin基因的表达可能在NSCLC癌变中起协同作用 ,survivin和k 展开更多
关键词 癌基因 抑癌基因 非小细胞肺癌 SURVIVIN基因 P53 C-MYC K-RAS 基因表达
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普通型和重型新型冠状病毒肺炎康复患者463例临床特征分析 被引量:58
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作者 程克斌 魏明 +6 位作者 沈虹 吴超民 陈德昌 维宁 周新 张定宇 郑军华 《上海医学》 CAS 北大核心 2020年第4期224-232,共9页
目的总结普通型和重型冠状病毒肺炎(COVID-19)康复患者的流行病学和临床特征,以提高对该疾病的认识,协助临床早期诊断,为疫情防控提供参考。方法回顾性分析截至2020年2月6日在武汉市金银潭医院住院治疗并康复出院的463例普通型和重型COV... 目的总结普通型和重型冠状病毒肺炎(COVID-19)康复患者的流行病学和临床特征,以提高对该疾病的认识,协助临床早期诊断,为疫情防控提供参考。方法回顾性分析截至2020年2月6日在武汉市金银潭医院住院治疗并康复出院的463例普通型和重型COVID-19患者的临床资料。结果463例患者中,普通型282例,重型181例;男244例,女219例,年龄范围15~90岁,年龄51(43,60)岁。其中,255例患者(55.08%)≥50岁;12例为家庭聚集性病例;205例患者(44.28%)合并高血压、糖尿病、冠心病、COPD等基础疾病。入院时常见症状为发热415例(89.63%)、咳嗽356例(76.89%)、呼吸困难194例(41.90%)、乏力130例(28.08%);咽痛、流涕等上呼吸道感染症状和腹泻等消化道症状均低于3%。入院时53.56%(248/463)的患者外周血淋巴细胞减少,40.36%(67/166)的患者CD4^+T细胞减少(<350/μL);低白蛋白血症和FGB升高者分别占27.00%(125/463),40.18%(182/453);56.77%(260/458)的患者乳酸脱氢酶水平升高,75.81%(351/463)的患者出现低钙血症。入院时,常见的胸部CT影像学表现为磨玻璃样阴影(57.37%,253/441)和小斑片状阴影(51.70%,228/441)。与普通型组比较,重型组患者更多表现为发热和呼吸困难,体温≥39℃的患者比例更高(49.17%比30.14%,P<0.05);重型组ESR、CRP、降钙素原、血清淀粉样蛋白A等感染学标志物水平更高(P值均<0.05),心肌损伤更多见。重型组患者的严重淋巴细胞减少和CD4^+T细胞减少的比例高于普通型组,且肺部影像学更多表现为磨玻璃样阴影和大片实变影。本组所有患者经积极抗病毒、抗感染、氧疗,以及对症支持治疗好转后出院,住院天数为12(9,14)d。结论中老年人,低白蛋白血症,患有高血压、糖尿病、冠心病、COPD等基础疾病的患者是COVID-19的高危人群。即使无发热,但出现淋巴细胞减少或符合流行病学特征的患者也应尽早完善胸部CT检查和2019-nCoV核酸检测以早期诊� 展开更多
关键词 新型冠状病毒 新型冠状病毒肺炎 临床特征 诊断 治疗
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核因子κB和蛋白激酶C对哮喘Th2类细胞因子表达的调控 被引量:27
3
作者 维宁 徐永健 +1 位作者 张珍祥 王孝养 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期355-359,I002,共6页
目的 探讨核因子κB(NF κB)和蛋白激酶C(PKC)中对支气管哮喘T淋巴细胞表达Th2类细胞因子白细胞介素 4(IL 4)和IL 5的调控信号传导中的作用。方法 将 16只豚鼠随机分为哮喘组和正常对照组 ,每组 8只 ;人体材料取自 16例急性发作期哮... 目的 探讨核因子κB(NF κB)和蛋白激酶C(PKC)中对支气管哮喘T淋巴细胞表达Th2类细胞因子白细胞介素 4(IL 4)和IL 5的调控信号传导中的作用。方法 将 16只豚鼠随机分为哮喘组和正常对照组 ,每组 8只 ;人体材料取自 16例急性发作期哮喘患者及 16名正常对照者。分别从每只豚鼠及每位受试者的外周血中分离出T淋巴细胞并分成 3组培养。第 1组作为空白对照 ,第 2组加入PKC激动剂 12 肉豆蔻酰 13 乙酸佛波酯 (PMA) ,第 3组同时加入PMA和NF κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 (PDTC)。将培养的T淋巴细胞涂片 ,用免疫组织化学染色方法检测NF κB的表达 ,用原位分子杂交方法检测IL 4和IL 5的mRNA ,用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测上清液中的IL 4和IL 5。结果 加入PMA培养的哮喘T淋巴细胞NF κB活化细胞百分比、IL 4和IL 5的mRNA表达阳性细胞百分比、培养液上清中的IL 4和IL 5与空白对照组比较差异均有显著性 (q =8 44~ 38 6 6 ,P <0 0 1) ,且与加入PMA培养的正常T淋巴细胞组比较差异也均有显著性 (q =8 11~ 40 12 ,P <0 0 1) ;而同时加入PMA和PDTC培养的哮喘T淋巴细胞的以上指标与加入PMA培养的哮喘T淋巴细胞比较差异也均有显著性 (q =6 5 0~ 35 6 3,P <0 0 1)。T淋巴细胞NF κB活化细胞的百分比与IL 4? 展开更多
关键词 支气管哮喘 核因子ΚB 蛋白激酶C 白细胞介素
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不同Th1/Th2细胞免疫应答支气管肺泡灌洗液中细胞学的变化 被引量:23
4
作者 李超乾 徐永健 +4 位作者 钟小宁 杨丹蕾 刘先胜 维宁 张珍祥 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期575-577,585,共4页
目的 探讨不同Th细胞优势应答下支气管肺泡灌洗液 (BALF)中的细胞学变化 ,了解Th1/Th2细胞免疫应答的细胞和分子机制。方法 用鸡卵清蛋白 (OVA)致敏Wistar大鼠 (每组 10只 ) ,制作致敏大鼠哮喘模型 ;用”冻干BCG”皮内注射制作BCG免... 目的 探讨不同Th细胞优势应答下支气管肺泡灌洗液 (BALF)中的细胞学变化 ,了解Th1/Th2细胞免疫应答的细胞和分子机制。方法 用鸡卵清蛋白 (OVA)致敏Wistar大鼠 (每组 10只 ) ,制作致敏大鼠哮喘模型 ;用”冻干BCG”皮内注射制作BCG免疫大鼠模型。收集BALF并做HE染色 ,进行细胞分类计数。采用流式细胞术 ,测定BALF中 ,CD2 + 、CD2 8+ 及γδTCR+ T细胞占总淋巴细胞的百分率及平均荧光密度 (MIF)。用原位杂交法 ,检测肺组织中IL 4mRNA和IFN γmRNA的表达。用ELISA法检测血清IL 4和IFN γ的浓度。结果 哮喘组BALF中淋巴细胞、嗜酸性粒细胞 (EOS)、浆细胞和中性粒细胞的总数 ,均显著多于正常组 (P <0 .0 1) ;BCG免疫组BALF中 ,淋巴细胞和巨噬细胞的总数也显著高于正常组 (P <0 .0 1)。哮喘组BALF中 ,CD2 + T细胞占淋巴细胞的百分率明显少于正常组 (P <0 .0 1) ,非CD2 + 细胞明显增加。但哮喘组CD2 + T细胞的MFI显著高于正常组及BCG组 (P <0 .0 5 ) ;BCG组BALF中 ,CD2 + T细胞的百分率与正常组相比较无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,其CD2 + T细胞的MFI显著高于正常组 (P <0 .0 5 )。哮喘组和BCG组BALF中 ,CD2 8+ 细胞占淋巴细胞的百分率显著多于正常组 (P <0 .0 1) ;BCG组CD2 8+ 细胞的MFI高于哮喘组 (P <0 .0 展开更多
关键词 TH1/TH2细胞 免疫应答 支气管肺泡灌洗液 细胞学 哮喘 分子机制
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卡介苗预防哮喘大鼠模型形成及其与γδT细胞关系的研究 被引量:19
5
作者 李超乾 徐永健 +3 位作者 张珍祥 杨丹蕾 刘先胜 维宁 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期162-165,共4页
目的 探讨卡介苗 (BCG)对哮喘的预防作用及其与γδT细胞的关系。方法 Wistar大鼠 4 0只 ,随机分为 4组 ,每组 10只 ,用“冻干皮内注射用卡介苗”给大鼠皮内注射 ,8周后应用鸡卵清蛋白 (OVA)致敏并雾化吸入刺激 ,制作致敏大鼠模型 ;... 目的 探讨卡介苗 (BCG)对哮喘的预防作用及其与γδT细胞的关系。方法 Wistar大鼠 4 0只 ,随机分为 4组 ,每组 10只 ,用“冻干皮内注射用卡介苗”给大鼠皮内注射 ,8周后应用鸡卵清蛋白 (OVA)致敏并雾化吸入刺激 ,制作致敏大鼠模型 ;测定气道反应性变化 ,并收集外周血单个核细胞 (PBMC)和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ;采用流式细胞仪检测γδT细胞抗原受体 (γδTCR)和αβTCR阳性T细胞百分率及CD2 8/γδTCR平均荧光密度比 ,并用免疫荧光法结合HE染色以及免疫组化法检测γδT细胞占淋巴细胞的百分率。结果 常规哮喘模型组 (D组 )BALF中可见大量嗜酸细胞[EOS ,(2 5± 1 1)× 10 8/L],与正常对照组 (A组 ) [(0 0 )× 10 8/L]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;D组5 0 %时乙酰甲胆碱 [PC50 ,(0 2 8± 0 10 )g/L]与A组 [(1 36± 0 76 )g/L]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;而BCG免疫后哮喘模型组 (C组 )BALF中很难见到EOS[(0 0 )× 10 8/L],与A组 [(0 0 )× 10 8/L]比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,而C组PC50 [(1 2 8± 0 77)g/L]与A组 [(1 36± 0 76 )g/L]比较 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。BALF中BCG免疫组 (B组 )γδT细胞 /T细胞为 (41 3± 6 0 ) % ,γδT细胞 /淋巴细胞为 (35 2± 3 3) % 展开更多
关键词 卡介苗 哮喘 大鼠 ΓΔT细胞 动物实验 预防
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黄芪对豚鼠哮喘模型核因子κB表达作用的研究 被引量:15
6
作者 莫碧文 王昌明 +3 位作者 刘晓晴 王孝养 维宁 张珍祥 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期168-168,I001,共2页
关键词 哮喘 动物模型 豚鼠 核因子KB
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湖北省浩口地区农村居民慢性阻塞性肺疾病认知情况的调查分析 被引量:19
7
作者 马静 刘先胜 +5 位作者 赵建平 刘辉国 谢俊刚 维宁 徐永健 张珍祥 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期356-358,共3页
目的了解湖北省浩口地区农村居民对慢性阻塞肺疾病(COPD)的认知情况,为进一步制定针对性的健康教育和管理策略提供依据。方法采取分层整群随机抽样方法,对浩口地区年龄≥40岁的农村居民1 554人进行调查。采用统一的流行病学调查表格,并... 目的了解湖北省浩口地区农村居民对慢性阻塞肺疾病(COPD)的认知情况,为进一步制定针对性的健康教育和管理策略提供依据。方法采取分层整群随机抽样方法,对浩口地区年龄≥40岁的农村居民1 554人进行调查。采用统一的流行病学调查表格,并进行体检和肺功能检测,以支气管舒张试验后(FEV1/FVC)×100%<70%作为COPD的诊断标准。结果共检出COPD患者173例,其中Ⅰ级63例(36.42%)、Ⅱ级74例(42.77%)、Ⅲ级32例(18.50%)、Ⅳ级4例(2.31%)。被调查者中无人了解COPD这一疾病名称及COPD急性加重的概念。有132人(8.49%)认为COPD的发生与吸烟有关,受检地区居民吸烟率为57.14%(888/1 554),戒烟率26.58%(236/888)。COPD稳定期患者中无人规律使用长效支气管扩张剂、吸入激素或混合制剂;无人使用家庭长期氧疗及康复治疗。COPD急性加重期患者分别有69人(39.88%)和13人(7.51%)单独使用抗生素或茶碱治疗。173名COPD患者中,52人(30.06%)在家中的活动受到COPD的影响,98人(56.65%)因COPD而影响外出的频率。结论浩口地区农村居民COPD患病率高,认知能力差,治疗不规范,防治意识欠缺,患者生活质量受损,需加强健康教育和管理。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 疾病认知 农村居民
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黄芪对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1表达的影响 被引量:15
8
作者 莫碧文 王昌明 +3 位作者 刘晓晴 王孝养 维宁 金毅 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2001年第3期260-262,共3页
用免疫组织化学染色方法观察血红素氧合酶 1(HO 1)在哮喘豚鼠肺组织中的表达变化 ,测定全血一氧化碳血红蛋白 (COHb)的百分比含量并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润情况 ,以探讨黄芪对哮喘豚鼠HO 1表达的影响。发现HO 1主要表达在气... 用免疫组织化学染色方法观察血红素氧合酶 1(HO 1)在哮喘豚鼠肺组织中的表达变化 ,测定全血一氧化碳血红蛋白 (COHb)的百分比含量并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润情况 ,以探讨黄芪对哮喘豚鼠HO 1表达的影响。发现HO 1主要表达在气道上皮细胞 ,哮喘各组HO 1的表达水平均显著高于正常组 (P <0 0 1)。黄芪治疗后HO 1的表达水平显著低于哮喘各组 (P <0 0 1)。可见黄芪能显著抑制哮喘豚鼠气道上皮细胞HO 1的表达 ,提示黄芪抑制细胞HO 1的表达可能是黄芪治疗哮喘的作用机制之一。 展开更多
关键词 血红素氧合酶-1 支气管哮喘 黄芪 免疫组织化学
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黄芪对过敏性哮喘豚鼠核因子-κB表达的影响 被引量:12
9
作者 莫碧文 王昌明 +3 位作者 刘晓晴 王孝养 维宁 张珍祥 《广西医科大学学报》 CAS 2002年第2期181-183,共3页
目的 :探讨黄芪对过敏性豚鼠哮喘模型中核因子 - κB(nuclear factor- kappa B,NF- κB)表达的影响。方法 :将 30只豚鼠随机分为 3组 (正常组、哮喘组、治疗组 ) ,每 10只。用 10 %卵清蛋白 (OVA)溶液 1ml腹腔注射致敏 ,2周后哮喘组及... 目的 :探讨黄芪对过敏性豚鼠哮喘模型中核因子 - κB(nuclear factor- kappa B,NF- κB)表达的影响。方法 :将 30只豚鼠随机分为 3组 (正常组、哮喘组、治疗组 ) ,每 10只。用 10 %卵清蛋白 (OVA)溶液 1ml腹腔注射致敏 ,2周后哮喘组及治疗组用 1% OVA溶液超声雾化吸入致其哮喘发作 ,1次 / d,共 2周 ;正常组则喷入生理盐水。治疗组每次诱喘后给予腹腔注射黄芪注射液 5 g/ kg,1次 / d,共 2周。然后分别测定 3组肺功能并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润情况 ;用免疫组织化学染色方法观察 NF- κB在豚鼠肺组织中的表达变化。结果 :NF- к B主要表达在气道壁内的细胞中 ,3组胞核阳性的细胞数占气道上皮细胞数百分比分别为 (14 .3± 2 .6 ) %、(32 .5± 5 .8) %和 (2 0 .4± 3.3) %。哮喘组 NF- к B胞核阳性的细胞比例显著高于正常组 (P <0 .0 1) ,治疗组 NF- к B胞核阳性的细胞比例显著低于哮喘组 (P <0 .0 1)。结论 :黄芪能显著抑制过敏性哮喘豚鼠气道壁内细胞 NF- κB的表达 ,提示黄芪抑制 NF- 展开更多
关键词 过敏性哮喘 核因子-KB 黄芪 免疫组织化学 药理学
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雷公藤对豚鼠哮喘模型核因子-κB表达的作用 被引量:14
10
作者 莫碧文 王昌明 +3 位作者 刘晓晴 王孝养 维宁 张珍祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期525-528,共4页
目的 探讨雷公藤对核因子 κB(NF κB)在豚鼠哮喘模型中表达的影响。方法 豚鼠用 10 %卵白蛋白 (OA)溶液1ml腹腔注射致敏 ,2wk后用 1%OA溶液超声雾化吸入致其哮喘发作 ,每日 1次 ,共 1wk ;测定肺功能并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)... 目的 探讨雷公藤对核因子 κB(NF κB)在豚鼠哮喘模型中表达的影响。方法 豚鼠用 10 %卵白蛋白 (OA)溶液1ml腹腔注射致敏 ,2wk后用 1%OA溶液超声雾化吸入致其哮喘发作 ,每日 1次 ,共 1wk ;测定肺功能并观察气道壁嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润情况 ;用免疫组织化学染色方法观察NF κB在豚鼠肺组织中的表达变化。结果 NF κB主要表达在气道壁内的细胞 ,对照组、模型组、雷公藤内酯醇 ( 10 0mg·kg-1ip)组的胞核阳性的细胞数占气道上皮细胞数百分比分别为 14 3 %± 2 6%、3 2 5 %± 5 8%和 19 7%±2 1%。结论 雷公藤内酯醇能显著抑制哮喘豚鼠气道壁内细胞NF κB的表达 ,可能是雷公藤治疗哮喘的作用机制之一。 展开更多
关键词 核因子-ΚB 支气管哮喘 雷公藤 免疫组织化学 实验研究
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大鼠支气管哮喘模型特异性致敏原吸入减敏疗法的研究 被引量:13
11
作者 李超乾 徐永健 +3 位作者 杨丹蕾 张珍祥 刘先胜 维宁 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期284-285,共2页
关键词 大鼠 支气管哮喘模型 特异性致敏原吸入减敏疗法 研究
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布地奈德/福莫特罗对咳嗽变异性哮喘患者FeNO及血浆hs-CRP影响的研究 被引量:15
12
作者 周敏 丁宇 +6 位作者 程胜 王爱利 谢敏 谢俊刚 维宁 赵建平 徐永健 《临床内科杂志》 CAS 2014年第3期164-167,共4页
目的 探讨布地奈德/福莫特罗治疗对咳嗽变异性哮喘(CVA)患者呼气一氧化氮(FeNO)及血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的影响,比较FeNO和hs-CRP两种方法在反映CVA患者气道炎症方面的价值.方法 将25例CVA患者作为实验CVA组,24例健康体... 目的 探讨布地奈德/福莫特罗治疗对咳嗽变异性哮喘(CVA)患者呼气一氧化氮(FeNO)及血浆超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平的影响,比较FeNO和hs-CRP两种方法在反映CVA患者气道炎症方面的价值.方法 将25例CVA患者作为实验CVA组,24例健康体检者为对照组.所有研究对象均进行肺功能和支气管激发试验.所有CVA患者接受布地奈德/福莫特罗干粉吸入治疗4周(160 μg/4.5 μg,每12小时1次),比较治疗前后咳嗽症状总积分、FeNO和血浆hs-CRP水平变化,并进行相关性分析.结果 (1)CVA患者治疗前FeNO和hs-CRP水平明显高于正常对照组(P均<0.01).FeNO水平与咳嗽症状总积分明显相关(r=0.602,P<0.01).(2)布地奈德/福莫特罗吸入治疗4周后患者咳嗽症状总积分、FeNO和hs-CRP较治疗前均明显下降(P<0.01或P<0.05).(3)治疗后咳嗽缓解患者的基线FeNO水平明显高于未缓解者,且FeNO下降的比例与咳嗽总积分下降比例明显相关(r =0.466,P<0.05),而hs-CRP下降比例与咳嗽总积分下降比例无明显相关.结论 布地奈德/福莫特罗吸入治疗4周可以有效改善CVA患者症状,同时降低FeNO和血浆hs-CRP水平.相比血浆hs-CRP水平,监测FeNO在评价CVA患者气道炎症及激素治疗反应方面更有优势. 展开更多
关键词 咳嗽变异性哮喘 呼出气一氧化氮 超敏C反应蛋白
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滴鼻和雾化两种不同激发方式对小鼠支气管哮喘模型气道炎症的影响 被引量:15
13
作者 程胜 陈辉龙 +6 位作者 王正云 王爱利 谢敏 曹勇 谢俊刚 维宁 徐永健 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期121-124,共4页
目的探讨滴鼻和雾化两种不同激发方式对小鼠支气管哮喘模型气道炎症的影响,为研究和优化支气管哮喘动物模型提供实验和理论依据。方法选择鸡卵清蛋白(OVA)致敏的BALB/c小鼠,分别采用滴鼻和雾化两种不同方式进行激发,复制哮喘模型,观察... 目的探讨滴鼻和雾化两种不同激发方式对小鼠支气管哮喘模型气道炎症的影响,为研究和优化支气管哮喘动物模型提供实验和理论依据。方法选择鸡卵清蛋白(OVA)致敏的BALB/c小鼠,分别采用滴鼻和雾化两种不同方式进行激发,复制哮喘模型,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数和细胞分类计数,ELISA方法检测BALF上清中IL-4、IL-13含量,常规病理切片苏木精-伊红(HE)染色观察肺内炎症情况。结果滴鼻组小鼠BALF中白细胞总数最高,其次为雾化组小鼠;且滴鼻组小鼠嗜酸性粒细胞总数及中性粒细胞总数亦明显高于雾化组与正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。滴鼻组小鼠BALF中IL-4、IL-13水平明显高于雾化组与正常组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);雾化组小鼠BALF中IL-4、IL-13水平高于正常组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。滴鼻组肺组织炎症反应最明显,并可见上皮细胞破坏,杯状细胞增生,支气管和血管周围有大量炎症细胞浸润,以嗜酸性粒细胞和淋巴细胞为主。雾化组炎症程度较轻,正常对照组无明显炎症改变。结论雾化吸入和经鼻滴入的激发方式都可以成功制作出支气管哮喘模型,经鼻滴入方式可以引起肺部更加明显的炎症浸润及细胞因子表达,为哮喘研究提供更好的选择。 展开更多
关键词 小鼠 支气管哮喘模型 激发 滴鼻 雾化
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大鼠支气管哮喘模型γδT细胞Th1/Th2免疫应答模式的研究 被引量:9
14
作者 李超乾 徐永健 +6 位作者 杨丹蕾 施焕中 刘先胜 维宁 陈仕新 倪望 张珍祥 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期342-344,共3页
目的 探讨γδT细胞在哮喘的免疫应答模式 ,认识γδT细胞亚群在哮喘发病机制中的作用。方法 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为健康对照组与哮喘组 (用鸡卵清蛋白致敏和刺激大鼠 ,制作哮喘模型 ) ,每组 10只。收集外周血单个核细胞 (PBMC)... 目的 探讨γδT细胞在哮喘的免疫应答模式 ,认识γδT细胞亚群在哮喘发病机制中的作用。方法 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为健康对照组与哮喘组 (用鸡卵清蛋白致敏和刺激大鼠 ,制作哮喘模型 ) ,每组 10只。收集外周血单个核细胞 (PBMC)和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,用补体攻击法结合洗淘法选择性培养扩增γδT细胞 ,并用流式细胞术鉴定培养体系中的γδT细胞及其纯度 ,用原位杂交法测γδT细胞白细胞介素 (IL) 4mRNA和干扰素 (IFN)γmRNA的表达 ,用ELISA检测培养上清液中IL 4和IFN γ的浓度。结果 哮喘组大鼠PBMC和BALF中 ,γδT细胞培养上清液中IL 4浓度显著高于健康对照组 (P <0 0 1) ,IFN γ浓度低于健康对照组 (P <0 0 1) ;γδT细胞IL 4mRNA表达阳性率高于健康对照组 (P <0 0 1) ,IFN γmRNA表达阳性率低于健康对照组 (P <0 0 1)。结论γδT细胞或者γδT细胞亚群存在Th1/Th2模式 ,在大鼠哮喘模型呈Th2优势应答 ,γδT细胞参与了哮喘的发病过程。 展开更多
关键词 大鼠 支气管哮喘 ΓΔT细胞 免疫应答 TH2细胞 THL细胞 细胞因子
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抗生素单一或联合用药诱导铜绿假单胞菌释放内毒素的比较性研究 被引量:10
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作者 张海英 盛道 维宁 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期18-22,共5页
目的观察不同种类抗生素单独或联合应用对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)释放内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的影响,探讨其规律、特点及可能机制,为临床抗生素的合理选择提供参考。方法选择临床上常用的6种抗生素:哌拉西林/... 目的观察不同种类抗生素单独或联合应用对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)释放内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的影响,探讨其规律、特点及可能机制,为临床抗生素的合理选择提供参考。方法选择临床上常用的6种抗生素:哌拉西林/他唑巴坦钠(PIP/TAZ),头孢哌酮(CPZ),亚胺培南/西司他丁钠(IPM/CIL),美罗培南(MEM),环丙沙星(CIP),阿米卡星(AMK),以0.5倍最小抑菌浓度(0.5MIC)单一或联合体外作用于Pa,观察不同时相点抗生素的杀菌作用和细菌形态学改变,检测培养上清液中LPS水平。结果6种抗生素单独应用时杀菌效应差异无统计学意义,联合用药组优于单一用药组。各种抗生素在引起细菌形态学改变的同时,诱导LPS释放程度不一。PIP/TAZ、CIP、MEM组作用后导致细菌成丝状变并伴随大量LPS释放,IMP/CIL组则引起细菌球状变,释放LPS相对较少。联合用药组及CPZ组大部分裂解,释放LPS明显减少。随作用时间延长,抗生素诱导LPS释放水平增加。结论抗生素单独或联合体外作用于铜绿假单胞菌均可诱导LPS的释放,其释放水平与抗生素的种类、作用时间及细菌形态改变有关。临床抗感染治疗时在考虑抗菌效应同时应尽量选用低LPS诱导量的抗生素。 展开更多
关键词 抗生素 铜绿假单胞菌 内毒素 感染
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慢性阻塞性肺疾病患者血维生素D水平及其维生素D结合蛋白基因多态性的相关性研究 被引量:14
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作者 李晓晨 刘先胜 +4 位作者 徐永健 维宁 赵建平 倪望 陈士新 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期303-307,共5页
目的 探讨湖北地区慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者维生素D水平及其维生素D结合蛋白(GC)基因多态性.方法 对250例受检者(116例吸烟COPD患者和134例健康吸烟者)进行问卷调查,收集相关资料(吸烟史、维生素D摄入、并发症等);ELISA法检... 目的 探讨湖北地区慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者维生素D水平及其维生素D结合蛋白(GC)基因多态性.方法 对250例受检者(116例吸烟COPD患者和134例健康吸烟者)进行问卷调查,收集相关资料(吸烟史、维生素D摄入、并发症等);ELISA法检测受试者血清25-羟基维生素D(25-OHD)水平,通过Taqman探针实时荧光定量PCR对GC基因(rs4588位点和rs7041位点)进行分型;并进行肺功能检测.结果 吸烟COPD者25-OHD水平较健康吸烟者低(36.58 nmol/L比43.80 nmol/L,P<0.001).25-OHD水平吸烟COPD者第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比≥80%者为39.43 nmol/L,FEV1占预计值百分比>50%~80%者为35.32 nmol/L,FEV1占预计值百分比>30%~50%者为32.21 nmol/L,FEV1占预计值百分比<30%者为26.25 nmol/L(P< 0.01).25-OHD水平与肺功能呈正相关(r2 =1.911,P<0.000 1).GC基因rs7041位点的TT型与25-OHD水平和COPD易感性存在关联(P<0.01;OR =2.140,95% CI1.157~3.959,P=0.015).结论 吸烟COPD者易患维生素D缺乏,且COPD气流受限程度与维生素D水平呈负相关.GC基因rs7041位点的TT型与25-OHD水平和COPD易感性密切相关,可能成为COPD易感性筛查的候选突变位点. 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 维生素D结合蛋白质基因 多态性 单核苷酸 维生素D结合蛋白质
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Analysis of CD4^+CD25^+ Regulatory T Cells and Foxp3 mRNA in the Peripheral Blood of Patients with Asthma 被引量:15
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作者 薛克营 周咏明 +2 位作者 盛道 维宁 唐滔 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2007年第1期31-33,共3页
The changes of CD4^+CD25^+ regulatory T cells (CD4^+CD25^+ Treg) and Foxp3 mRNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with asthma were investigated in order to elucidate the possible role... The changes of CD4^+CD25^+ regulatory T cells (CD4^+CD25^+ Treg) and Foxp3 mRNA in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from patients with asthma were investigated in order to elucidate the possible roles of CD4^+CD25^+ Treg in the development of asthma. The peripheral blood samples were collected from 29 healthy controls (normal control group) and 78 patients with asthma which included 30 patients in exacerbation group, 25 patients in persistent group, and 23 patients in remission group. By using flow cytometry and RT-PCR, the CD4^+CD25^+ Treg ratio and Foxp3 mRNA in PBMCs were detected. The CD4^+CD25^+ Treg ratio and Foxp3 mRNA in PBMCs of exacerbation and persistent groups were lower than that of remission and normal control groups (P〈0.05). Although the CD4^+CD25^+ Treg ratio and Foxp3 mRNA of remission group were also lower than that of normal control group, there was no significant difference between them (P〉0.05). As compared with persistent group, exacerbation group had lower CD4^+CD25^+ Treg ratio and Foxp3 mRNA (P〈0.05). It was indicated that the decrease of CD4^+CD25^+ Treg ratio and its function in PBMCs may be responsible for pathogenesis of asthma. 展开更多
关键词 ASTHMA peripheral blood mononuclear cells CD4^+CD25^+ regulatory T cells Foxp3 mRNA
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《急性上呼吸道感染基层诊疗指南(2018年)》的解读免费 被引量:14
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作者 陈云天 维宁 《中华全科医师杂志》 2020年第1期86-88,共3页
急性上呼吸道感染(upper respiratory tract infection,URTI,上感)是呼吸内科最常见的一组疾病,由于其病情一般较轻,诊治相对简单,且疾病本身又具有自限性、预后多较好,因此到目前为止,国内除了2016年《安徽省上呼吸道感染分级诊疗指南... 急性上呼吸道感染(upper respiratory tract infection,URTI,上感)是呼吸内科最常见的一组疾病,由于其病情一般较轻,诊治相对简单,且疾病本身又具有自限性、预后多较好,因此到目前为止,国内除了2016年《安徽省上呼吸道感染分级诊疗指南》外,尚无此类疾病的规范化指南。《急性上呼吸道感染基层诊疗指南(2018年)》(简称2018年基层指南)及《急性上呼吸道感染基层诊疗指南(实践版·2018)》[1‑2]的制定,可以作为实用性和便捷性都兼具的上感诊断、治疗等工具供基层医生参考使用。本文旨在对该指南进行进一步的解释和说明,帮助基层医生更好地依据指南进行临床实践。 展开更多
关键词 急性上呼吸道感染 指南 解读
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转染IκBα基因抑制NF-κB活性对A549细胞侵袭行为的影响 被引量:11
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作者 张建 徐永健 +5 位作者 维宁 张珍祥 杜春玲 乔礼芬 倪望 陈士新 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期710-715,共6页
背景与目的:近年来的研究显示核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活化能够调节肿瘤细胞的侵袭和转移。本研究探讨抑制NF-κB的活性对A549细胞侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:构建表达NF-κB抑制物α同分异构体(inhibitor of ... 背景与目的:近年来的研究显示核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的活化能够调节肿瘤细胞的侵袭和转移。本研究探讨抑制NF-κB的活性对A549细胞侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:构建表达NF-κB抑制物α同分异构体(inhibitor of NF-κB,α isoform,IκBα)的真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)/IκBα。体外培养A549细胞,分为未转染组(不转染质粒)、转染pcDNA3.1(+)组、转染pcDNA3.1(+)/IκBα组,分别转染相应的质粒。应用RT-PCR、Westernblot检测各组细胞IκBα的表达情况,应用凝胶电泳迁移率改变实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测各组细胞NF-κB的活性,应用Transwell侵袭小室检测各组细胞的侵袭能力,应用RT-PCR方法检测各组细胞MMP-2、MMP-9的mRNA水平,应用明胶酶谱法检测各组细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的活性。结果:酶切鉴定结果显示pcDNA3.1(+)/IκBα质粒构建成功。RT-PCR和Westernblot检测结果表明构建的pcDNA3.1(+)/IκBα质粒能够在A549细胞中表达IκBα。转染pcDNA3.1(+)/IκBα组A549细胞NF-κΒ活性、侵袭细胞数目、MMP-2活性及MMP-9活性均低于未转染组和转染pcDNA3.1(+)组(P值均<0.05),而转染pcDNA3.1(+)组与未转染组之间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论:转染IκBα基因能够抑制A549细胞中NF-κB的活性。NF-κB的活性下降能够抑制A549细胞的侵袭能力,其机制可能与MMP-2、MMP-9表达下调有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 核因子-KB A549细胞 侵袭 明胶酶A 明胶酶B
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端粒酶逆转录酶基因反义寡核苷酸抑制肺癌细胞端粒酶活性和诱导细胞凋亡 被引量:9
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作者 王孝养 张珍祥 +2 位作者 徐永健 陈仕新 维宁 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期175-178,共4页
目的 观察端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因反义寡核苷酸 (ASODN)对肺癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法 实验分为ASODN组、正义寡核苷酸 (SODN)组和空白对照组 ,所用ASODN和SODN的浓度分别为 10 μmol/L ,脂质体为 16mg/L ,采用端... 目的 观察端粒酶逆转录酶 (hTERT)基因反义寡核苷酸 (ASODN)对肺癌细胞端粒酶活性和细胞凋亡的影响。方法 实验分为ASODN组、正义寡核苷酸 (SODN)组和空白对照组 ,所用ASODN和SODN的浓度分别为 10 μmol/L ,脂质体为 16mg/L ,采用端粒重复扩增法、逆转录 聚合酶链反应、WesternBlot及流式细胞术分别观察各组端粒酶活性、hTERTmRNA和蛋白质表达以及细胞凋亡。结果 ASODN组显著下调或抑制肺癌细胞端粒酶活性和hTERT表达 ,但直到第 2 1天才出现细胞凋亡增多。 展开更多
关键词 端粒酶 肺肿瘤 脱噬作用 端粒酶逆转录酶 反义寡核苷酸 细胞凋亡
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