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溶剂特性对三臂星型类弹性蛋白多肽相变温度的影响 被引量：1
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作者 熊紫阳 张丹丹 +1 位作者 张光亚 李夏兰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1141-1148,共8页
本文利用Spy Tag/Spy Catcher特性构建了三臂星型结构的类弹性蛋白多肽（elastin-like polypeptides,ELPs）,考察其在不同溶剂,如分子拥挤试剂、osmolytes及深共熔溶剂（deep eutectic solvents,DESs）中的相变温度及行为,并与含有相同E... 本文利用Spy Tag/Spy Catcher特性构建了三臂星型结构的类弹性蛋白多肽（elastin-like polypeptides,ELPs）,考察其在不同溶剂,如分子拥挤试剂、osmolytes及深共熔溶剂（deep eutectic solvents,DESs）中的相变温度及行为,并与含有相同ELPs重复数的线性ELPs120作对比。结果表明：在不同浓度拥挤试剂PEG2000作用下,两种结构的ELPs相变温度均降低,当其各自浓度均为25μmol/L时,三臂星型ELPs相变温度降低3℃-13℃,而ELPs120相变温度仅降低1.5℃-10.8℃。此外,在添加PEG2000后,三臂星型ELPs相变缓慢;在不同类型和浓度的osmolytes溶液中,25μmol/L三臂星型ELPs相变温度明显要比线性ELPs高8℃左右;在DESs体系中,三臂星型ELPs有类似与水溶液中的相变行为,且其相变温度受到抑制,另外三臂星型ELPs和ELPs120在DESs/PBS体系中,与在（氯化胆碱＋尿素）/PBS体系中的相变行为一致,其中当DESs体积含量为50%,ELPs120相变温度是最低的。由于ELPs在非单一缓冲液体系中的相变行为不同,这丰富了ELPs作为纯化标签的应用,且在非单一缓冲液体系中因降低了相变温度,节约了纯化融合蛋白的经济成本,同时也为研究ELPs拓扑结构与其相变行为之间的关系奠定理论基础。 展开更多
关键词 类弹性蛋白多肽 相变温度 拥挤试剂 深共熔溶剂 OSMOLYTES SPY Tag/Spy Catcher
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拥挤试剂PEG2000对不同拓扑结构类弹性蛋白相变的影响
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作者 张雷 熊紫阳 +1 位作者 张光亚 李夏兰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1111-1117,共7页
类弹性蛋白(elastin-like polypeptides,ELPs)属于弹性蛋白质中的一种,且具有温控性的生物大分子,本文研究拥挤试剂对不同拓扑结构ELPs相变温度的影响,利用温控-紫外分光光度计研究其相变特性,结果发现,随着PEG2000浓度的增加,T-E-F(thr... 类弹性蛋白(elastin-like polypeptides,ELPs)属于弹性蛋白质中的一种,且具有温控性的生物大分子,本文研究拥挤试剂对不同拓扑结构ELPs相变温度的影响,利用温控-紫外分光光度计研究其相变特性,结果发现,随着PEG2000浓度的增加,T-E-F(three-armed ELPs-Foldon的简称)的相变温度下降11.9～17.1℃;在固定Tadpole-like-E(Tadpole-like-ELPs的简称)浓度下,随着PEG2000浓度的增加,Tadpole-like-E的相变温度降低11.5～16℃,其中,25μmol/L的Tadpole-like-E其相变速度缓慢;ELPs浓度越大,其相变温度降低愈大,且PEG2000影响ELPs相变温度的趋势与ELPs的拓扑结构关系不大。另外,在PBS缓冲溶液中加入PEG2000,可以使E-C(ELPs-SpyCather的简称)在浓度<0.5 mol/L的Na_2CO_3中发生相变,且随着PEG2000浓度的增加,E-C相变温度逐渐降低。本研究为今后ELPs在复杂体系的应用提供前期的基础研究。 展开更多
关键词 类弹性蛋白多肽 聚乙二醇 SpyTag/SpyCatcher FOLDON
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