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持续血浆趋化因子C-X-C基序配体12增加导致疼痛的慢性化 被引量：4
1
作者 张辉 麦春林 +7 位作者 许雅南 林震嘉 揭英桃 熊媖 唐源 刘先国 谈智 周利君 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第16期2171-2176,共6页
目的探讨外周神经损伤后血浆趋化因子C-X-C基序配体12(CXCL12)的变化及其在疼痛慢性痛化中的作用。方法采用Western blot和ELISA法检测保留性神经损伤(SNI)经典慢性疼痛模型前后血浆CXCL12时程变化;通过实验观察正常小鼠尾静脉注射外源... 目的探讨外周神经损伤后血浆趋化因子C-X-C基序配体12(CXCL12)的变化及其在疼痛慢性痛化中的作用。方法采用Western blot和ELISA法检测保留性神经损伤(SNI)经典慢性疼痛模型前后血浆CXCL12时程变化;通过实验观察正常小鼠尾静脉注射外源性CXCL12的痛行为学变化,及静脉注射CXCL12中和抗体对CXCL12与SNI诱导机械痛敏的影响。结果Western blot结果表明SNI 1 d后血浆CXCL12蛋白明显增多,并持续至SNI 9 d;ELISA数据显示血浆CXCL12浓度从对照(35.10±4.11)pg/mL升高到SNI 1d(90.8±8.33)pg/mL(P<0.05)、并持续增加至SNI 21 d(161.20±18.88)pg/mL,P<0.0001。连续9 d静脉注射CXCL12(1.0~5.0 ng/mL,200μL)剂量依赖性引起双侧机械痛觉过敏;而中和血浆CXCL12能缓解静脉注射CXCL12及SNI诱导的双侧机械痛敏。结论血浆CXCL12的持续增加是疼痛慢性化至关重要的因素。 展开更多
关键词 神经病理性疼痛 保留性神经损伤 CXCL12 中和抗体
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口服L-苏糖酸镁预防长春新碱诱导的大鼠记忆和情感障碍
2
作者 陈佳新 周鑫 +2 位作者 熊媖 刘先国 舒海华 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期413-423,共11页
目的:观察L-苏糖酸镁(magnesium-L-threonate,L-TAMS)对长春新碱(vincristine,VCR)诱导的大鼠记忆和情感障碍的影响并探讨其机制。方法:采用随机数表法将SD大鼠随机分为三组:Control组(饮用正常水并注射等量生理盐水)、VCR组(大鼠腹腔... 目的:观察L-苏糖酸镁(magnesium-L-threonate,L-TAMS)对长春新碱(vincristine,VCR)诱导的大鼠记忆和情感障碍的影响并探讨其机制。方法:采用随机数表法将SD大鼠随机分为三组:Control组(饮用正常水并注射等量生理盐水)、VCR组(大鼠腹腔注射长春新碱并饮用正常水)、L-TAMS+VCR组(VCR注射前7天起至实验结束在饮用水中加入L-TAMS),每组5~7只。采用新颖物体识别测试(novel object recognition test,NORT)检测大鼠记忆能力;高架十字迷宫实验(elevated plus-maze test,EPMT)检测大鼠焦虑行为;强迫游泳实验(forced swimming test,FST)检测大鼠抑郁行为。使用在体电生理实验技术记录海马CA3-CA1突触后诱发场电位的幅度;Western blot检测海马内N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-Methyl-D-Aspartate-Receptors,NMDARs)亚基NR2B表达的情况;免疫荧光检测海马CA1与前扣带回皮质(anterior cingulate cortex,ACC)内小胶质细胞的表达情况。结果:与Control组比较,VCR组认知系数降低,静止不动时间延长,进入高架十字迷宫开放臂的时间和次数减少,海马CA3-CA1突触后场电位幅度降低,海马内NR2B含量显著降低,海马CA1和ACC内小胶质细胞的表达增多,腹腔注射VCR之前,提前7天直至实验结束口服L-TAMS可预防VCR所引起的上述变化。结论:L-TAMS可通过上调海马突触后膜NMDARs亚基NR2B,逆转VCR引起的CA3-CA1突触后场电位幅度显著降低,改善海马突触传递受损,同时,降低大鼠海马CA1和前扣带回皮质的小胶质细胞表达,减轻神经炎症,进一步预防VCR诱导的记忆和情感功能障碍。 展开更多
关键词 L-苏糖酸镁 长春新碱 记忆情感障碍 海马 前扣带回皮质 突触可塑性 神经炎症
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L-苏糖酸镁对非小细胞肺癌H460细胞迁移和侵袭能力及NF-κB/TNF-α信号通路的影响
3
作者 熊媖 沈静娇 +1 位作者 刘先国 周鑫 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第24期4580-4587,共8页
目的:探讨L-苏糖酸镁(magnesium-L-threonate,L-TAMS)对非小细胞肺癌H460细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。方法:正常永生肺上皮细胞16HBE和非小细胞肺癌细胞株H460培养液中加入L-TAMS或硫酸镁(MgSO_(4))共培养;流式细胞术检测细胞内镁... 目的:探讨L-苏糖酸镁(magnesium-L-threonate,L-TAMS)对非小细胞肺癌H460细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。方法:正常永生肺上皮细胞16HBE和非小细胞肺癌细胞株H460培养液中加入L-TAMS或硫酸镁(MgSO_(4))共培养;流式细胞术检测细胞内镁离子浓度变化,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot、免疫荧光染色(IF)及RT-qPCR检测NF-κB/TNF-α通路相关蛋白表达变化。结果:流式细胞术结果显示,相对于对照组16HBE细胞,H460细胞内游离镁离子浓度降低,而0.4 mmol/L L-TAMS可以补充其细胞内游离镁离子;划痕实验结果显示0.4 mmol/L L-TAMS可以显著抑制H460细胞迁移能力,且效果优于0.4 mmol/L MgSO_(4);Transwell侵袭实验显示L-TAMS可抑制H460细胞侵袭能力;Western blot、IF、RT-qPCR实验发现L-TAMS可以时间依赖性抑制NF-κB/TNF-α通路,并在24 h时0.8 mmol/L L-TAMS效果优于0.4 mmol/L L-TAMS。结论:L-TAMS能抑制非小细胞肺癌H460细胞的侵袭和迁移能力并同时抑制NF-κB/TNF-α通路,本研究为临床上寻找预防非小细胞肺癌细胞药物提供了新思路。 展开更多
关键词 L-苏糖酸镁 非小细胞肺癌 迁移 侵袭 NF-κB/TNF-α信号通路
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改良的Trizol法提取小鼠皮肤RNA技术 被引量：3
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作者 林震嘉 张辉 +5 位作者 揭英桃 熊媖 唐源 谈智 刘先国 周利君 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期224-232,共9页
[目的]由于皮肤组织韧性强且存在大量RNA酶,采用经典Trizol法提取的RNA存在易降解质量低等不足.因此,本研究旨在通过改良的Trizol法实现高质量的皮肤RNA提取.[方法]采用不同处理方式(Tri:Trizol包埋;Pro:RNA样本保护液包埋;Cry:先冷冻... [目的]由于皮肤组织韧性强且存在大量RNA酶,采用经典Trizol法提取的RNA存在易降解质量低等不足.因此,本研究旨在通过改良的Trizol法实现高质量的皮肤RNA提取.[方法]采用不同处理方式(Tri:Trizol包埋;Pro:RNA样本保护液包埋;Cry:先冷冻液氮再冷冻-80℃冰箱;LNG:液氮研磨;Cut:采用剪刀剪碎组织)提取的小鼠正常皮肤RNA为实验组;脊髓组织作为参照组,并以咪喹莫特(IMQ)诱导的小鼠银屑病模型皮肤组织作为保真性验证组.我们采用紫外分光光度法、琼脂凝胶电泳法、定量逆转录PCR法(qRT-PCR)等方法来检测经典Trizol法(1-Tri,Nor)和改良Trizol法(2-Tri,LNG-Tri,Tri-Cut,Pro)提取的RNA浓度、纯度和完整性以及IL-1βmRNA表达的差异性情况.[结果]①与脊髓组织相比,经典Trizol法(1-Tri)获得的正常皮肤组织总RNA量要低,DNA污染和5S RNA条带明显,IL-1βmRNA相对表达偏高,说明经典Trizol法在皮肤组织中提取RNA存在局限性,需要进行改良.②在不同小鼠皮肤样本处理组中,改良的2-Tri法和LNG-Tri法获得的RNA浓度更高,同时RNA降解、DNA污染更低,IL-1βmRNA表达更接近正常水平.更重要的是,在小鼠银屑病模型中,2-Tri法提取的RNA样本能真实反映出正常皮肤与银屑病变皮肤之间IL-1βmRNA的变化趋势.[结论]改良的2-Tri或LNG-Tri法分离的总RNA质量好,能可靠地反映生理或病理条件下的mRNA表达模式. 展开更多
关键词 RNA提取 小鼠皮肤 TRIZOL 银屑病
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表没食子儿茶素没食子酸酯缓解高频刺激诱导的雌性小鼠慢性原发性疼痛 被引量：2
5
作者 唐源 金冬梅 +5 位作者 揭英桃 林震嘉 熊媖 彭湘格 周利君 谈智 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期221-228,共8页
【目的】初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高频刺激(HFS)诱导雌性小鼠慢性原发性疼痛的镇痛作用及其机制。【方法】采用10 V的HFS(波宽0.5 ms,100 Hz,4串,每串持续1 s,间隔10 s)左后肢坐骨神经建立雌性小鼠慢性原发性疼痛模型... 【目的】初步探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对高频刺激(HFS)诱导雌性小鼠慢性原发性疼痛的镇痛作用及其机制。【方法】采用10 V的HFS(波宽0.5 ms,100 Hz,4串,每串持续1 s,间隔10 s)左后肢坐骨神经建立雌性小鼠慢性原发性疼痛模型。将小鼠随机分为假手术组、溶剂(生理盐水)+HFS组、不同浓度EGCG+HFS组(每组4~5只)。手术前1 h,鞘内注射10μL溶剂或EGCG(10、20、50、200μmol/L)。采用后爪机械撤足阈值(PWT)和镇痛效率评价EGCG的治疗效果。最后用免疫荧光法检测腰段脊髓蛋白表达,探讨其可能的作用机制。【结果】与溶剂HFS组比较,EGCG鞘内注射剂量依赖性缓解雌性小鼠HFS引起的机械痛敏,其最大镇痛效率达84.95%。EGCG还可阻断疼痛雌性小鼠同侧腰段脊髓背角c-Fos(神经元兴奋性标记物)阳性神经元数量以及降钙素基因相关肽(CGRP+)终末、Iba1(小胶质细胞标记物)、GFAP(星形胶质细胞标记物)表达的增加。【结论】鞘内注射EGCG可通过抑制脊髓背角突触前CGRP终末增加、突触后神经元兴奋性以及胶质细胞激活,对HFS诱导的慢性原发性疼痛产生镇痛作用。 展开更多
关键词 慢性原发性疼痛 表没食子儿茶素没食子酸酯 高频刺激 C-FOS 降钙素基因相关肽
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L-茶氨酸局部给药抑制皮肤神经末梢的异常生长缓解小鼠银屑病瘙痒 被引量：1
6
作者 揭英桃 林震嘉 +5 位作者 张珺 谈智 许雅南 熊媖 唐源 周利君 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期161-170,共10页
【目的】观察L-茶氨酸是否在咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠中具有止痒作用并初步探讨机制。【方法】将IMQ软膏局部应用于小鼠背部皮肤建立银屑病模型;L-茶氨酸经口服(10 mg/kg·d)或病损皮肤局部涂抹(50、125、250 mmol/L,2次/d)... 【目的】观察L-茶氨酸是否在咪喹莫特(IMQ)诱导的银屑病小鼠中具有止痒作用并初步探讨机制。【方法】将IMQ软膏局部应用于小鼠背部皮肤建立银屑病模型;L-茶氨酸经口服(10 mg/kg·d)或病损皮肤局部涂抹(50、125、250 mmol/L,2次/d)进行防治处理。采用抓挠等自发性行为学测试检测治疗效果;并运用免疫荧光染色(IF)、Western Blot(WB)及原代背根神经节(DRG)神经元培养技术探讨相关机制。【结果】口服L-茶氨酸对IMQ诱导的瘙痒无明显作用,但病损皮肤局部应用明显改善银屑病模型小鼠皮肤不舒适感诱发的舔或咬及畏缩等自发性行为,并呈浓度依赖性。IF和WB结果显示,L-茶氨酸不仅能抑制模型小鼠皮肤TNF-α过表达,还能阻止β3-tubulin神经纤维的异常生长和瘙痒相关分子瞬态受体电位香草酸1(TRPV1)的上调。体外实验进一步证实L-茶氨酸能浓度依赖性地直接抑制IMQ引起的CGRP+、β3-tubulin+神经突起异常生长。【结论】局部应用L-茶氨酸通过抑制皮肤神经纤维的异常生长缓解小鼠银屑病模型的皮肤瘙痒不适感。因此,L-茶氨酸局部给药可成为治疗银屑病慢性瘙痒的一种潜在方法。 展开更多
关键词 银屑病 瘙痒 L-茶氨酸 肿瘤坏死因子-Α 神经末梢异常生长
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