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蛋白酪氨酸磷酸酶PTP1B催化活性区的原核表达及活性分析 被引量：2
1
作者 王生育 颜江华 +2 位作者 潘阳霖 李学军 陈忠 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期553-557,共5页
从GenBank获得人PTP1B催化活性区(PTP1Bc)氨基酸序列(1～301aa),通过重叠PCR获得PTP1Bc基因。构建pET-22b(+)/PTP1Bc原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性重组子IPTG诱导表达,Ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌... 从GenBank获得人PTP1B催化活性区(PTP1Bc)氨基酸序列(1～301aa),通过重叠PCR获得PTP1Bc基因。构建pET-22b(+)/PTP1Bc原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),阳性重组子IPTG诱导表达,Ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。Western blotting结果表明所得的蛋白可与抗PTP1B抗体发生特异性结合;酶活实验证实复性的蛋白具有一定的磷酸酶活性。PTP1Bc基因的构建、表达纯化及活性分析,为进一步的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 PTP1Bc 基因表达 蛋白纯化 活性分析
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双过氧钒化合物NH4[OV(O2)2(C8H7N3)]·4H2O抗肿瘤活性研究 被引量：1
2
作者 潘阳霖 颜江华 +4 位作者 于贤勇 杨叔禹 李学军 蔡淑惠 陈忠 《湖南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2008年第1期101-105,共5页
在细胞和动物实验水平上,研究了双过氧钒化合物NH4[OV(O2)2(C8H7N3)]×4H2O(简写bpV(Imi-Py))对癌细胞的增殖作用,碱性磷酸酶的活性抑制和体内抗肿瘤作用.研究结果显示bpV(Imi-Py)对胃癌细胞株MGC-803、肺癌细胞株95D和L342的IC50... 在细胞和动物实验水平上,研究了双过氧钒化合物NH4[OV(O2)2(C8H7N3)]×4H2O(简写bpV(Imi-Py))对癌细胞的增殖作用,碱性磷酸酶的活性抑制和体内抗肿瘤作用.研究结果显示bpV(Imi-Py)对胃癌细胞株MGC-803、肺癌细胞株95D和L342的IC50值分别为8.27、26.37和9.54μmol/L,而对人正常肾胚胎细胞HEK293的IC50值达6 642μmol/L,表明该化合物对肿瘤细胞具有特异杀伤作用.研究还表明bpV(Imi-Py)对MGC-803细胞提取液的碱性磷酸酶(ALP)也有明显抑制作用,呈现量效关系.动物体内抗肿瘤实验发现bpV(Imi-Py)能抑制肝癌细胞生长,肿瘤体积实验组较对照组下降35.6%,表明bpV(Imi-Py)有较好的抗肿瘤活性.另外,小鼠急性毒性实验的LD50为147.2mg.kg-1,说明bpV(Imi-Py)是一种中等毒性的抗肿瘤化合物.图4,表1,参15. 展开更多
关键词 双过氧钒 抗肿瘤活性 毒性
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