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土壤微生物分子生态学研究中总DNA的提取 被引量：72
1
作者 赵勇 周志华 +3 位作者 李武 刘彬彬 潘迎捷 赵立平 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期854-860,共7页
建立了一种土壤DNA提取方法。根据DNA产量和纯度2个评价指标,从3种手提土壤DNA方法中优选出方法B为手提DNA方法(Labmethod),它包括样品预处理,细胞裂解,粗DNA纯化,其中细胞裂解组合了玻璃珠击打,SDS裂解,溶菌酶裂解。进一步应用PCR-限... 建立了一种土壤DNA提取方法。根据DNA产量和纯度2个评价指标,从3种手提土壤DNA方法中优选出方法B为手提DNA方法(Labmethod),它包括样品预处理,细胞裂解,粗DNA纯化,其中细胞裂解组合了玻璃珠击打,SDS裂解,溶菌酶裂解。进一步应用PCR-限制性片段长度多态性(Restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)技术及PCR-温度梯度凝胶电泳(Temperaturegradientgelelectrophoresis,TGGE)技术,结合DNA产量、纯度、片段大小以及所反映的微生物群落结构特性等指标评价了手提方法(Labmethod)得到的总DNA质量,并将这些结果与2种应用较广的商业试剂盒(MoBioUltraCleanSoilDNAKit和Bio101FastDNASPINKit(ForSoil))所得DNA的各种指标进行了比较。结果表明,手提方法(Labmethod)的粗DNA产量低于Bio101Kit的,但高于MoBioKit的。这些方法所得DNA的长度都在21kb左右,Labmethod提取的DNA没有严重被剪切现象,而2种试剂盒提取的DNA都有不同程度的剪切。手提方法得到的DNA经纯化后,应用细菌及真菌特异引物进行PCR扩增,均能获得目的片段,表明该方法能从土壤中同时有效提取细菌和真菌总基因组DNA。并且,手提方法所得DNA的细菌16SrDNA和真菌18SrDNA的PCR-RFLP图谱与两种商业试剂盒的图谱基本相似,但3种方法提取的DNA在细菌16SrDNAV3区和真菌28SrDNA片段的PCR-TGGE图谱上都存在一定差异,主要表现在一些弱势条带的有无或强弱上。这说明手提方法提取的总DNA与2种商业试剂盒一样,在一定程度上能反映微生物群落的多样性和组成。总之,手提DNA方法(Labmethod)所用试剂普通,价格便宜,能在4h以内获得够质够量的土壤DNA用于微生物分子生态学研究,较适合于广大普通实验室进行土壤DNA提取工作。 展开更多
关键词 土壤DNA提取 DNA质量 PCR扩增 限制性片段长度多态性分析 温度梯度凝胶电泳分析
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副溶血弧菌LAMP检测方法的建立 被引量：71
2
作者 徐芊 孙晓红 +1 位作者 赵勇 潘迎捷 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期66-72,共7页
副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是一种能引起食源性疾病的重要病原菌。首次将一种新颖的核酸扩增技术-环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)应用于副溶血弧菌的快速检测。针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素... 副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)是一种能引起食源性疾病的重要病原菌。首次将一种新颖的核酸扩增技术-环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermalamplification,LAMP)应用于副溶血弧菌的快速检测。针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因(tlh)设计4条特异性引物(两条内引物和两条外引物)进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化,最佳反应时间为60min,反应温度为60℃。对12种细菌共28株菌进行LAMP扩增,仅14株副溶血弧菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性。副溶血弧菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为90fg和24cfu/ml。对模拟食品样品进行直接检测,检测限为89cfu/g。结果表明,该方法检测副溶血弧菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1小时即可完成,有望发展成为快速检测副溶血弧菌的有效手段。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 环介导等温扩增技术(LAMP) 不耐热溶血毒素基因(tlh) 检测
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启动子克隆概述 被引量：44
3
作者 孙晓红 陈明杰 潘迎捷 《食用菌学报》 2002年第3期57-62,共6页
启动子是基因表达调控的重要顺式元件 ,也是基因工程表达载体的一个重要元件。笔者阐述了启动子的结构、分类、克隆方法及其意义 。
关键词 启动子 克隆 结构 分类 食用菌
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香菇和平菇生长发育中漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶活性的变化 被引量：71
4
作者 潘迎捷 陈明杰:郑海歌 +1 位作者 汪昭月 龚胜萍 《上海农业学报》 CSCD 1991年第2期21-26,共6页
香菇和平菇的菌丝体在胞内合成和向外分泌大量的漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶。在菌丝生长中,该两种菌的三种胞外酶活性变化基本相同,漆酶和酪氨酸酶的活性高峰出现在第25-30天,以后开始下降,而纤维素酶活性高峰在第20天时开始出现。原基... 香菇和平菇的菌丝体在胞内合成和向外分泌大量的漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶。在菌丝生长中,该两种菌的三种胞外酶活性变化基本相同,漆酶和酪氨酸酶的活性高峰出现在第25-30天,以后开始下降,而纤维素酶活性高峰在第20天时开始出现。原基形成时,香菇和平菇的胞外漆酶和酪氨酸酶活性下降,香菇的胞外纤维素酶活性上升,而平菇下降。两种菌子实体中的三种酶活性低于菌丝体的胞外酶,与胞内酶相似。子实体的不同部位中,菌褶中三种酶的活性均为最低,而菌肉和菌柄中酶活性相对较高。两种菌的胞内漆酶、酪氨酸酶和纤维素酶活性都很低,而且变化幅度小。 展开更多
关键词 香菇 平菇 漆酶 酪氨酸酶 纤维素酶
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灰树花多糖研究进展 被引量：62
5
作者 邢增涛 周昌艳 +2 位作者 潘迎捷 谭琦 江汉湖 《食用菌学报》 1999年第3期54-58,共5页
灰树花是一种鲜美、富含丰富的生物活性物质的珍贵蕈菌。灰树花多糖作为一种极有开发前景的生物反应调节剂,目前已得到国内外的普遍重视。本文综述了国内外灰树花多糖化学分析和药理研究方面的进展情况。
关键词 灰树花 多糖 化学分析 药理
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香菇生长过程中几种胞外酶活性的变化规律 被引量：59
6
作者 倪新江 潘迎捷 +1 位作者 冯志勇 李人圭 《食用菌学报》 1995年第4期22-27,共6页
本文研究了在常规栽培条件下,香菇整个生长发育过程中培养料中的羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、滤纸纤维素酶、淀粉酶、漆酶、果胶酶、酸性蛋白酶活性的动态变化规律。结果表明,培养料成分的不同只影响酶活性的相对大小,而不影响酶活性... 本文研究了在常规栽培条件下,香菇整个生长发育过程中培养料中的羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、滤纸纤维素酶、淀粉酶、漆酶、果胶酶、酸性蛋白酶活性的动态变化规律。结果表明,培养料成分的不同只影响酶活性的相对大小,而不影响酶活性变化的规律性;大部分酶随着每一潮子实体的成熟出现一个活性峰值;营养生长阶段,酶活性呈总体上升趋势,生殖生长阶段则呈下降趋势,部分酶活性在后期丧失。 展开更多
关键词 香菇 胞外酶 动态变化 生长
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用ITS和ISSR分子标记技术鉴别香菇生产用种 被引量：58
7
作者 秦莲花 宋春艳 +2 位作者 谭琦 陈明杰 潘迎捷 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期94-100,共7页
通过选用香菇生产中存在名称争议或者名称相近或者同一名称但长期在不同地区栽培的12株香菇生产菌株,以及用于种水平对比的豹皮香菇Lentinuslepideus和虎皮香菇Lentinustigrinus的4个菌株,共16个菌株作为供试材料,进行ITS和ISSR遗传分析... 通过选用香菇生产中存在名称争议或者名称相近或者同一名称但长期在不同地区栽培的12株香菇生产菌株,以及用于种水平对比的豹皮香菇Lentinuslepideus和虎皮香菇Lentinustigrinus的4个菌株,共16个菌株作为供试材料,进行ITS和ISSR遗传分析,并用RAPD技术验证试验结果。结果证明,不同种的ITS长度存在差异,再次证明ITS可以有效区别种之间的菌株;在ISSR的菌株水平分析中,香菇种内材料拥有两个共同的条带,与其他两种菌株的带型图谱有着明显差异,其中5对材料的带型图谱极为相近。RAPD验证结果与上述结果相近。由此可见,结合ITS与ISSR技术是可以用作香菇生产菌株鉴别的,这为ITS和ISSR分子标记技术推广应用于香菇生产菌株的快速准确鉴别提供了技术依据。 展开更多
关键词 食用菌 快速鉴定 PCR技术
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“都市农业”一词的由来和定义初探──日本都市农业理论考 被引量：44
8
作者 俞菊生 张占耕 +5 位作者 白尔钿 程智强 王春萍 徐新春 潘迎捷 汪树俊 《上海农业学报》 CSCD 1998年第2期79-84,共6页
对日本都市农业的形成、发展、现状和振兴都市农业的措施与实践进行了分析，探讨了“都市农业”一词的由来、定义、时期划分、特性等的理论问题，也许可供建设符合我国国情的都市农业和建立我国都市农业理论体系的参考。
关键词 都市农业 时期划分 定义 特性
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用改进的CTAB法提取香菇基因组DNA 被引量：59
9
作者 张红 秦莲花 +1 位作者 谭琦 潘迎捷 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期547-550,共4页
通过用改进的CTAB法提取27个香菇菌株的基因组DNA,并分别用紫外、琼脂糖凝胶电泳和PCR技术检测提取DNA样品的质量和产量,证明该方法可以用于香菇基因组DNA的提取,为香菇基因组DNA的提取建立了一种简单可靠的新方法.
关键词 CTAB法 香菇 基因组DNA
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姬松茸在两种培养基上生长期间九种胞外酶活性变化 被引量：43
10
作者 倪新江 丁立孝 +2 位作者 潘迎捷 梁丽琨 由翠荣 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2001年第2期222-227,共6页
栽培在棉籽壳和麦草培养基上的姬松茸具有完整的胞外纤维素酶系；胞外CMC酶、FP酶、HC酶和蛋白酶活性呈周期性变化，其活性高峰对应于子实体的成熟期；胞外淀粉酶、漆酶和过氧化物酶在菌丝生长阶段活性较高，以后逐渐下降；胞外果胶酶和... 栽培在棉籽壳和麦草培养基上的姬松茸具有完整的胞外纤维素酶系；胞外CMC酶、FP酶、HC酶和蛋白酶活性呈周期性变化，其活性高峰对应于子实体的成熟期；胞外淀粉酶、漆酶和过氧化物酶在菌丝生长阶段活性较高，以后逐渐下降；胞外果胶酶和β-葡萄糖苷酶活性在整个栽培过程中变化不大；棉籽壳和麦草两种培养基中的九种胞外酶的活性变化趋势差异不大。 展开更多
关键词 姬松茸 胞外酶 活性变化 培养基
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灵芝中有效成分灵芝酸的抑制肿瘤作用研究 被引量：37
11
作者 周昌艳 唐庆九 +3 位作者 杨焱 郭倩 白韵琴 潘迎捷 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期275-279,共5页
本文采用了体外肿瘤细胞培养增殖抑制试验与体内肿瘤细胞抑制试验,结果显示灵芝酸在体外对肿瘤细胞株SW620、LS180、S180的增殖具有明显的抑制作用,体内抗肿瘤疗效试验显示灵芝酸对Lewis肺癌(足趾接种)具有一定的疗效,对荷Lewis肺癌的小... 本文采用了体外肿瘤细胞培养增殖抑制试验与体内肿瘤细胞抑制试验,结果显示灵芝酸在体外对肿瘤细胞株SW620、LS180、S180的增殖具有明显的抑制作用,体内抗肿瘤疗效试验显示灵芝酸对Lewis肺癌(足趾接种)具有一定的疗效,对荷Lewis肺癌的小鼠IL-2的生成及NK细胞的免疫活性均有一定的促进作用。因此可以认为灵芝酸通过直接细胞毒作用与激活免疫体系实现抑制肿瘤作用。 展开更多
关键词 灵芝 灵芝酸 肿瘤 细胞毒 免疫 NK细胞
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香菇生长过程中木质纤维素的生物降解规律 被引量：36
12
作者 潘迎捷 倪新江 李人圭 《食用菌学报》 1995年第2期18-22,共5页
本文研究了香菇在自然温度生长条件下,木屑米糠培养基中木质纤维素的生物降解规律。结果表明,在整个生育过程中,培养基失重67.3％,呼吸消耗56.5％,绝对生物学效率10.9％;培养基中木质素的降解主要在营养生长阶段,半纤维素的降解速率比... 本文研究了香菇在自然温度生长条件下,木屑米糠培养基中木质纤维素的生物降解规律。结果表明,在整个生育过程中,培养基失重67.3％,呼吸消耗56.5％,绝对生物学效率10.9％;培养基中木质素的降解主要在营养生长阶段,半纤维素的降解速率比较均一,纤维素在生殖生长阶段降解速率加快,菌丝生长阶段主要利用非木质纤维素组分,木质纤维素是生殖生长过程中的主要碳源. 展开更多
关键词 香菇 木质纤维素 生物降解
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中国香菇育种的发展历程 被引量：33
13
作者 谭琦 潘迎捷 黄为一 《食用菌学报》 2000年第4期48-52,共5页
将香菇育种工作分成起步阶段、引种阶段、单孢杂交育种阶段和应用原生质体技术选育菌种阶段 ,系统地回顾。
关键词 香菇 育种 引种 单孢杂交 原生质体技术
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秸秆还田后土壤微生物群落结构变化的初步研究 被引量：38
14
作者 赵勇 李武 +3 位作者 周志华 张晓君 潘迎捷 赵立平 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1114-1118,共5页
通过实验室条件下的小麦秸秆粉和油菜秸秆粉的还土试验,结合常规的分析手段和基于DNA的分子技术(变性梯度凝胶电泳(DGGE)及测序技术),初步研究了秸秆粉还田后土壤物理化学特性及生物学特性的变化。结果表明,培养60d后,秸秆还田土壤的肥... 通过实验室条件下的小麦秸秆粉和油菜秸秆粉的还土试验,结合常规的分析手段和基于DNA的分子技术(变性梯度凝胶电泳(DGGE)及测序技术),初步研究了秸秆粉还田后土壤物理化学特性及生物学特性的变化。结果表明,培养60d后,秸秆还田土壤的肥力明显提高,其纤维素酶活性明显增强。DGGE图谱表明,对照土壤(S)以及处理土壤(SW和SR),在培养过程中,β-Proteobacteria类细菌组成都在发生变化。对其中一个样品的DGGE条带进行了割胶测序,测序结果表明,大部分条带代表的微生物是未培养的或不可培养的。采用传统分离培养技术,从秸秆还田土壤中分离了2株纤维素降解菌。以上结果说明,秸秆还田具有良好的土壤综合效应。 展开更多
关键词 秸秆 纤维素酶活性 变性梯度凝胶电泳 β-Proteobacteria 纤维素降解菌
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利用拮抗试验和RAPD对灵芝属菌株进行分类研究 被引量：36
15
作者 唐传红 张劲松 +4 位作者 陈明杰 李泰辉 曹晖 谭琦 潘迎捷 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期72-76,共5页
利用RAPD和拮抗试验对来自国内外的10个灵芝属菌株进行了遗传多样性分析。RAPD分析的结果表明,在0·560的相似性水平上分成3个组,第1组包括密纹薄芝、灵芝、灵芝(信州菌株)和两个无柄灵芝菌株,第2组包括灵芝(G·sp·)、近... 利用RAPD和拮抗试验对来自国内外的10个灵芝属菌株进行了遗传多样性分析。RAPD分析的结果表明,在0·560的相似性水平上分成3个组,第1组包括密纹薄芝、灵芝、灵芝(信州菌株)和两个无柄灵芝菌株,第2组包括灵芝(G·sp·)、近拟鹿角灵芝和紫芝,第3组是树舌灵芝。这一结论与传统分类学的结论基本一致。当相似性水平达到0·800的时,上述10个菌株聚成8组,与传统的分类学中种的划分几乎一致。比较两种方法所得的结果发现,它们的结论是一致的。因此认为拮抗试验在灵芝亲缘关系的初步鉴定中是有效的,RAPD在灵芝种间鉴定时是有效的,RAPD具有用于种内鉴定的可能性。 展开更多
关键词 拮抗试验 RAPD 灵芝属 聚类分析
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食(药)用菌中重金属的研究进展 被引量：36
16
作者 邢增涛 王晨光 +1 位作者 潘迎捷 江汉湖 《食用菌学报》 2000年第2期58-64,共7页
详细论述了重金属元素铅 (Pb)、镉 (Cd)、砷 (As)、汞 (Hg)、银 (Ag)等在食 (药 )用菌中的含量、分布、富集机理、富集途径等方面的研究情况 ,以及食 (药 )用菌中存在重金属元素的潜在危害 ,并指出食 (药 )用菌富集重金属现象的应用前景。
关键词 食用菌 重金属 生物富集 危害性 铅 镉 汞
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香菇菌丝生长中多酚氧化酶的动态变化 被引量：36
17
作者 潘迎捷 陈明杰 +1 位作者 汪昭月 龚胜萍 《食用菌》 北大核心 1990年第3期4-6,共3页
香菇菌丝在生长发育中是以分解木质素作为主要碳素营养的。木质素是一个以芳香族为基本结构的复杂聚合物。在自然界物质大循环中,它的降解主要是以微生物代谢中产生的多酚氧化酶为催化剂,在常温常压下把复杂的不溶性的聚合物转化为水溶... 香菇菌丝在生长发育中是以分解木质素作为主要碳素营养的。木质素是一个以芳香族为基本结构的复杂聚合物。在自然界物质大循环中,它的降解主要是以微生物代谢中产生的多酚氧化酶为催化剂,在常温常压下把复杂的不溶性的聚合物转化为水溶性含有苯环的简单化合物,苯环最后破裂产生简单的有机小分子。由于香菇等木腐菌具有自身合成多酚氧化酶的能力,因此深入研究香菇多酚氧化酶活性,不仅对开发自然界丰富的木质素资源具有重要意义,而是研究香菇生长发育的主要生理基础。我们系统地研究了不同碳源、氮源、微量元素和维生素等营养因子对香菇合成多酚氧化酶的影响。本文报道了香菇菌丝体在生育过程中4种胞内胞外多酚氧化酶活性的动态变化。 展开更多
关键词 香菇 菌丝生长 多酚氧化酶
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不同灵芝菌丝体中三萜与多糖含量的比较 被引量：33
18
作者 赵明文 王晨光 +7 位作者 鲍鹏 邢增涛 梁婉琪 郁建强 尚晓冬 门殿英 王南 潘迎捷 《中国食用菌》 北大核心 2003年第2期43-46,共4页
根据十九种不同来源的灵芝菌株的生长速度及长势 ,从中选出了菌丝体阶段生长性能良好的 10个菌株进行液体培养 ,并测定了菌丝中三萜和多糖的含量。结果表明 :不同灵芝菌株在三萜和多糖含量上存在着一定的差异 ,其中多糖含量以汉城 2号... 根据十九种不同来源的灵芝菌株的生长速度及长势 ,从中选出了菌丝体阶段生长性能良好的 10个菌株进行液体培养 ,并测定了菌丝中三萜和多糖的含量。结果表明 :不同灵芝菌株在三萜和多糖含量上存在着一定的差异 ,其中多糖含量以汉城 2号、日本灵芝、南韩灵芝为高 ;三萜含量却以韩国灵芝、灵芝 0 772、灵芝 0 771为高 ;并且二者的含量不存在必然的联系 ,这为灵芝优良品种的筛选提供了理论依据。 展开更多
关键词 灵芝 菌丝体 三萜 多糖 含量 菌种筛选
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异宗结合食用菌的原生质体单核化 被引量：40
19
作者 潘迎捷 廖汉泉 +2 位作者 张树庭 尤美莲 赵炯 《上海农业学报》 CSCD 1993年第2期1-5,共5页
研究了异宗结合食用菌的原生质体单核化现象和单核原生质体的遗传规律。结果表明,在原生质体制备和再生过程中形成单核原生质体,是异宗结合食用菌的一个普遍现象。在“佛罗里达”(香菇)等异宗结合食用菌的原生质体释放中,单核原生质体... 研究了异宗结合食用菌的原生质体单核化现象和单核原生质体的遗传规律。结果表明,在原生质体制备和再生过程中形成单核原生质体,是异宗结合食用菌的一个普遍现象。在“佛罗里达”(香菇)等异宗结合食用菌的原生质体释放中,单核原生质体和双核原生质体之比由0.85∶1到2.34∶1不等。经测定。这些单核原生质体具有亲本双核菌株中存在的两种交配型(AxBx,AyBy),但两种交配型的比例有所不同。单核原生质体再生菌丝的菌落形态、菌丝生长速度和营养缺陷型标记等性状均稳定地保持了亲本的特性。由于这种单核体与孢子萌发形成的单核体,具有不同的遗传背景,故利用它作为杂交育种的亲本,可以克服食用菌常规育种中的很多局限性,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 食用菌 原生质体 单核化
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我国食用菌产业发展的回顾与展望 被引量：33
20
作者 潘迎捷 谭琦 +3 位作者 陈明杰 王南 曹晖 冯志勇 《食用菌学报》 2001年第2期1-9,共9页
较全面地回顾、总结、展望了我国食用菌产业的发展历程、存在问题和发展趋势。总结了具有中国特色的食用菌产业发展历程中的三个战略转变和三个优势 ,分析了我国食用菌产业新的发展阶段面临的六个方面的新情况、新问题 ,提出了 2 1世纪... 较全面地回顾、总结、展望了我国食用菌产业的发展历程、存在问题和发展趋势。总结了具有中国特色的食用菌产业发展历程中的三个战略转变和三个优势 ,分析了我国食用菌产业新的发展阶段面临的六个方面的新情况、新问题 ,提出了 2 1世纪中国食用菌产业进行战略性结构调整必须采取的 展开更多
关键词 食用菌产业 问题 发展趋势
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