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转录组分析毛白杨响应氧化胁迫的基因表达模式变化
被引量:
1
1
作者
李嘉鑫
李盈
+3 位作者
滕
晓
瞳
李聪慧
李慧
陆海
《植物学研究》
2018年第2期186-195,共10页
为了了解基因水平上毛白杨对于适应氧化胁迫的分子机制,本研究在氧化胁迫下对毛白杨叶片进行转录组测序分析,将有显著性差异的基因做GO功能及KEGG Pathway的富集分析,分析差异表达基因得出,胁迫与未胁迫毛白杨组之间的总表达基因数为34...
为了了解基因水平上毛白杨对于适应氧化胁迫的分子机制,本研究在氧化胁迫下对毛白杨叶片进行转录组测序分析,将有显著性差异的基因做GO功能及KEGG Pathway的富集分析,分析差异表达基因得出,胁迫与未胁迫毛白杨组之间的总表达基因数为3495,其中上调基因个数为1683,下调基因个数为1812。通过比较胁迫与未胁迫毛白杨组之间的go功能和KEGG分析得出,氧化胁迫后的植株中,与光合作用中光系统I,光系统Ⅱ相关蛋白均显著性下调。与光合膜,类囊体膜结构中基粒的堆积和膜重组相关蛋白均显著性下调(P <0.05)。说明氧化应激条件下,叶绿体是活性氧的主要产生部位。ROS的大量积累使叶绿体及细胞产生氧化损伤,导致光合作用相关功能下降,光合膜系统受到损伤。
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关键词
毛白杨
氧化胁迫
光合作用
转录组
下载PDF
职称材料
毛果杨漆酶基因PtrLAC-2的原核表达与多克隆抗体制备研究
2
作者
李盈
李嘉鑫
+6 位作者
滕
晓
瞳
郭
晓
蕊
程子义
尹玢
张永卓
陆海
李慧
《植物学研究》
2018年第2期177-185,共9页
目的:克隆毛果杨漆酶基因PtrLAC-2,并对其进行原核表达,同时制备高特异性、高效价的PtrLAC-2多克隆抗体,为研究漆酶基因蛋白在体外结构与功能奠定基础。方法:利用拟南芥中的漆酶基因序列对毛果杨基因组数据库进行同源检索,PCR同源克隆...
目的:克隆毛果杨漆酶基因PtrLAC-2,并对其进行原核表达,同时制备高特异性、高效价的PtrLAC-2多克隆抗体,为研究漆酶基因蛋白在体外结构与功能奠定基础。方法:利用拟南芥中的漆酶基因序列对毛果杨基因组数据库进行同源检索,PCR同源克隆并扩增得到毛果杨PtrLAC-2基因序列,将其亚克隆到pET30a(+)载体得到PtrLAC-2-pET30a(+)原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达并纯化得到PtrLAC-2重组蛋白。采用皮下免疫法将纯化的PtrLAC-2蛋白免疫兔子制备多克隆抗体,用ELISA和Western blot检测血清多克隆抗体的效价和特异性。结果:克隆获得了毛果杨漆酶基因的序列(命名PtrLAC-2,基因登录号XP_002308164),成功构建了PtrLAC-2-pET30a(+)原核表达载体,诱导表达获得了62 KDa的重组蛋白,ELISA检测显示抗体效价达1:102,400,经Western blot鉴定,制备的多克隆抗体能特异性检测毛果杨中的PtrLAC-2蛋白。结论:毛果杨漆酶PtrLAC-2基因可以在体外成功进行原核表达,同时获得了高特异性、高效价的兔抗PtrLAC-2多克隆抗体,为后续研究该酶生化功能提供了一定的理论基础。
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关键词
毛果杨
漆酶
基因克隆
原核表达
多克隆抗体
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职称材料
题名
转录组分析毛白杨响应氧化胁迫的基因表达模式变化
被引量:
1
1
作者
李嘉鑫
李盈
滕
晓
瞳
李聪慧
李慧
陆海
机构
北京林业大学生物科学与技术学院
出处
《植物学研究》
2018年第2期186-195,共10页
基金
北京林业大学杰出青年人才计划100万“中央高校基本科研业务费专项资金资助”(supportedby“theFundamentalResearchFundsfortheCentralUniversities”)JC2015-01。
文摘
为了了解基因水平上毛白杨对于适应氧化胁迫的分子机制,本研究在氧化胁迫下对毛白杨叶片进行转录组测序分析,将有显著性差异的基因做GO功能及KEGG Pathway的富集分析,分析差异表达基因得出,胁迫与未胁迫毛白杨组之间的总表达基因数为3495,其中上调基因个数为1683,下调基因个数为1812。通过比较胁迫与未胁迫毛白杨组之间的go功能和KEGG分析得出,氧化胁迫后的植株中,与光合作用中光系统I,光系统Ⅱ相关蛋白均显著性下调。与光合膜,类囊体膜结构中基粒的堆积和膜重组相关蛋白均显著性下调(P <0.05)。说明氧化应激条件下,叶绿体是活性氧的主要产生部位。ROS的大量积累使叶绿体及细胞产生氧化损伤,导致光合作用相关功能下降,光合膜系统受到损伤。
关键词
毛白杨
氧化胁迫
光合作用
转录组
分类号
S5 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
毛果杨漆酶基因PtrLAC-2的原核表达与多克隆抗体制备研究
2
作者
李盈
李嘉鑫
滕
晓
瞳
郭
晓
蕊
程子义
尹玢
张永卓
陆海
李慧
机构
北京林业大学生物科学与技术学院
出处
《植物学研究》
2018年第2期177-185,共9页
基金
北京林业大学杰出青年人才计划100万“中央高校基本科研业务费专项资金资助”(JC2015-01)。
文摘
目的:克隆毛果杨漆酶基因PtrLAC-2,并对其进行原核表达,同时制备高特异性、高效价的PtrLAC-2多克隆抗体,为研究漆酶基因蛋白在体外结构与功能奠定基础。方法:利用拟南芥中的漆酶基因序列对毛果杨基因组数据库进行同源检索,PCR同源克隆并扩增得到毛果杨PtrLAC-2基因序列,将其亚克隆到pET30a(+)载体得到PtrLAC-2-pET30a(+)原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达并纯化得到PtrLAC-2重组蛋白。采用皮下免疫法将纯化的PtrLAC-2蛋白免疫兔子制备多克隆抗体,用ELISA和Western blot检测血清多克隆抗体的效价和特异性。结果:克隆获得了毛果杨漆酶基因的序列(命名PtrLAC-2,基因登录号XP_002308164),成功构建了PtrLAC-2-pET30a(+)原核表达载体,诱导表达获得了62 KDa的重组蛋白,ELISA检测显示抗体效价达1:102,400,经Western blot鉴定,制备的多克隆抗体能特异性检测毛果杨中的PtrLAC-2蛋白。结论:毛果杨漆酶PtrLAC-2基因可以在体外成功进行原核表达,同时获得了高特异性、高效价的兔抗PtrLAC-2多克隆抗体,为后续研究该酶生化功能提供了一定的理论基础。
关键词
毛果杨
漆酶
基因克隆
原核表达
多克隆抗体
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转录组分析毛白杨响应氧化胁迫的基因表达模式变化
李嘉鑫
李盈
滕
晓
瞳
李聪慧
李慧
陆海
《植物学研究》
2018
1
下载PDF
职称材料
2
毛果杨漆酶基因PtrLAC-2的原核表达与多克隆抗体制备研究
李盈
李嘉鑫
滕
晓
瞳
郭
晓
蕊
程子义
尹玢
张永卓
陆海
李慧
《植物学研究》
2018
0
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职称材料
已选择
0
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