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氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化及表达的影响 被引量：7
1
作者 游同钊 廖玉丹 +3 位作者 严威敏 于春 罗鹏 潘雪莉 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期536-541,共6页
[目的]观察氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化水平、m RNA转录及蛋白表达的影响,为阐释氟骨症发生分子机制提供依据。[方法]以0、125、250、500、1 000μmol/L氟化钠处理人原代成骨细胞72 h,定量染色质免疫共沉淀技术检测p21... [目的]观察氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化水平、m RNA转录及蛋白表达的影响,为阐释氟骨症发生分子机制提供依据。[方法]以0、125、250、500、1 000μmol/L氟化钠处理人原代成骨细胞72 h,定量染色质免疫共沉淀技术检测p21基因转录调控区Ch IP1区域及编码区Ch IP2区域组蛋白乙酰化水平,实时荧光定量PCR法检测p21基因m RNA转录水平,免疫印迹法检测P21蛋白表达。[结果]氟化钠处理的0、125、250、500、1 000μmol/L浓度组中,p21基因转录调控区Ch IP1区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1.998±0.085、1.644±0.162、1.381±0.069、1.280±0.129、1.040±0.270,差异有统计学意义(F=15.757,P<0.05);组蛋白H3K14乙酰化水平分别为1.344±0.068、1.248±0.070、1.140±0.090、1.040±0.116、0.770±0.059,差异有统计学意义(F=21.284,P<0.05);组蛋白H4K16乙酰化水平分别为1.330±0.084、1.251±0.085、1.087±0.044、0.854±0.070、0.788±0.051,差异有统计学意义(F=36.429,P<0.05)。不同浓度染氟组中,编码区Ch IP2区域组蛋白H3K9、H3K14、H4K16乙酰化水平差异均无统计学意义(F=0.084、0.206、0.500,均P>0.05)。p21基因m RNA转录水平分别为2.65±0.35、1.93±0.48、0.88±0.17、0.82±0.09、0.67±0.16,差异有统计学意义(F=3.90,P<0.05);P21蛋白表达水平分别为1.62±0.06、1.02±0.08、0.84±0.07、0.26±0.05、0.07±0.03,差异亦有统计学意义(F=281.58,P<0.05)。[结论]氟可致人原代成骨细胞p21基因转录调控区组蛋白乙酰化水平降低,抑制p21基因m RNA转录及蛋白表达,可能是氟致人成骨细胞增殖活跃的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 氟 人成骨细胞 P21基因 组蛋白乙酰化
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氟化钠对人成骨细胞细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白依赖性激酶4基因组蛋白乙酰化水平的影响 被引量：3
2
作者 严威敏 明娟 +3 位作者 游同钊 汪希兰 罗鹏 潘雪莉 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期13-18,共6页
目的构建人原代成骨细胞体外氟中毒模型，观察不同剂量氟化钠（NaF）对人成骨细胞细胞周期蛋白D1（CyelinD1）、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）基因组蛋白乙酰化水平的影响，探讨氟骨症发生发展的分子机制。方法收集骨科外伤手术健康... 目的构建人原代成骨细胞体外氟中毒模型，观察不同剂量氟化钠（NaF）对人成骨细胞细胞周期蛋白D1（CyelinD1）、细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）基因组蛋白乙酰化水平的影响，探讨氟骨症发生发展的分子机制。方法收集骨科外伤手术健康人（车祸）骨组织，通过酶消化法分离人原代成骨细胞，经鉴定后作为实验对象。以0、125、250、500及1000μmol／L NaF处理细胞72h。定量染色质免疫共沉淀技术检测CyelinD1、CD1（4基因转录调控区CHIP1区域及编码区CHIP2区域（对照区）组蛋白H3K9、H3K14、H4K12、H4K16乙酰化水平。结果①分别以0、125、250、500及1000μmol／L NaF处理细胞72h后，CyclinD1基因转录调控区CHIP1区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1．152±0．104、1．174±0．187、1．090±0．176、1．170±0．197、1．147±0．097，组间比较差异无统计学意义（F=0．524，P〉0．05）；H3K14乙酰化水平分别为1．495±0．117、1．4654-0．069、1．470±0．187、1．760±1．089、1．341±0．443，组间比较差异无统计学意义（F=0．841，P〉0．05）；H4K12乙酰化水平分别为1．239±0．286、0．702±0．063、0．765±0．370、1．011±0．321、1．319±0．026，组间比较差异无统计学意义（F=2．329，P〉0．05）：H4K16乙酰化水平分别为1．452±0．217、1．621±0．165、1．462±0．090、1．510±0．146、1．564±0．154，组间比较差异无统计学意义（F=0．123，P〉0．05）。②CDK4基因转录调控区CHIPl区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1．472±0．163、1．580±0．161、1．585±0．132、1．451±0．136、1．560±0．039，组间比较差异无统计学意义（F=0．461，P〉0．05）；H3K14乙酰化水平分别为0．919±0．149、0．900±0．059、0．911±0．162、0．663±0．049、0．841±0．122，组间比较差异无统计学意义（F=0．974，P〉0．05）；H4K12乙酰化水平分别为0．456±0．142、0．911±0． 展开更多
关键词 氟 成骨细胞 CYCLIND1基因 CDK4基因 组蛋白乙酰化
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