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表达绿色荧光蛋白重组新城疫病毒LaSota疫苗株的构建 被引量:20
1
作者 葛金英 志远 +2 位作者 王永 鲍恩东 步志高 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期547-551,I0003,共6页
新城疫病毒是理想的新型活病毒疫苗载体,具有巨大的优势和应用前景。采用生产实践中广泛应用、免疫效果良好的NDV LaSota弱毒疫苗株,建立了反向遗传操作系统。在此基础上,进一步构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组NDV基因组cDNA克... 新城疫病毒是理想的新型活病毒疫苗载体,具有巨大的优势和应用前景。采用生产实践中广泛应用、免疫效果良好的NDV LaSota弱毒疫苗株,建立了反向遗传操作系统。在此基础上,进一步构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组NDV基因组cDNA克隆,成功救获了重组病毒rLaSota-EGFP,病毒F1代尿囊病毒液按1×10^4 EID50接种9—10日龄SPF鸡胚尿囊腔,接种后分别于24h、48h、72h及96h收获尿囊液,检测平均HA滴度分别为2^8、2^10.3、2^11.3和2^11,每mL尿囊液病毒量EID50分别为10^8.64、10^9.22、10^9.21和10^9.64,重组病毒与亲本株生长滴度在相近时间达到峰值,生长动力学特性与亲本株无明显差异。各代次重组病毒按1×10^6 EID50病毒量接种9—10日龄SPF鸡胚,96h内完全不致死鸡胚。救获重组病毒保持了LaSota弱毒疫苗亲本毒株对鸡胚良好的高滴度生长适应和低致病特性,并且鸡胚连续传9代次仍保持GFP的稳定表达及生物学特性不变。重组病毒rLaSota-EGFP的成功救获为开展新城疫病毒活载体疫苗研制提供了可行的技术平台。 展开更多
关键词 新城疫 绿色荧光蛋白 反向遗传操作 活载体疫苗
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表达增强绿色荧光蛋白重组水疱性口炎病毒印第安纳株的构建 被引量:13
2
作者 志远 葛金英 +2 位作者 胡森 王永 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期905-911,共7页
通过负链RNA病毒反向遗传操作技术,成功救获了表达增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组印地安纳株水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus Indiana serotype)、救获的重组病毒保持了野生型VSV高滴度... 通过负链RNA病毒反向遗传操作技术,成功救获了表达增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组印地安纳株水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus Indiana serotype)、救获的重组病毒保持了野生型VSV高滴度生长特性,细胞连续传代10次仍保持GFP的稳定表达及生物学特性不变。本研究为VSV作为新型重组活病毒载体疫苗和肿瘤治疗载体研制及基础病毒学相关研究提供了理想的技术平台。 展开更多
关键词 重组水疱性口炎病毒 增强绿色荧光蛋白 反向遗传操作
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膝关节骨性关节炎患者关节镜下关节清理术对关节疼痛与功能改善情况的影响 被引量:11
3
作者 李世浩 赵亚太 +2 位作者 冯华杰 李振科 志远 《黑龙江医学》 2021年第6期590-592,595,共4页
目的:探讨膝关节骨性关节炎患者关节镜下关节清理术治疗对关节疼痛与功能改善情况的影响。方法:现选取2018年5月—2019年5月入住开平市中心医院的膝关节骨性关节炎患者78例,按治疗方式不同分为两组,每组各39例,对照组仅施以常规保守治疗... 目的:探讨膝关节骨性关节炎患者关节镜下关节清理术治疗对关节疼痛与功能改善情况的影响。方法:现选取2018年5月—2019年5月入住开平市中心医院的膝关节骨性关节炎患者78例,按治疗方式不同分为两组,每组各39例,对照组仅施以常规保守治疗,研究组施以关节镜下关节清理术,比较两组治疗效果、膝关节功能改善情况、疼痛症状变化、心理状态变化及生存质量变化情况。结果:对照组治疗总有效率低于研究组(P<0.05);治疗后对照组膝关节功能改善情况差于研究组(P<0.05);治疗后对照组疼痛症状变化情况差于研究组(P<0.05);治疗后对照组心理状态差于研究组(P<0.05);治疗后对照组生存质量低于研究组(P<0.05)。结论:在治疗膝关节骨性关节炎患者的过程中,施以关节镜下关节清理术治疗效果确切,可在临床上多加广泛推广与应用。 展开更多
关键词 膝关节骨性关节炎 关节镜下关节清理术 关节疼痛 功能改善情况 心理状态
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脉冲冲洗联合负压封闭引流术在开放性骨折中的应用研究 被引量:11
4
作者 志远 李振科 冯华杰 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2019年第4期72-74,共3页
目的探讨脉冲冲洗联合负压封闭引流技术(vacuum sealing drainage,VSD)在四肢开放性骨折伴严重软组织损伤患者早期清创中的临床效果。方法回顾性分析2015年1月至2018年6月本院收治的四肢开放性骨折伴严重软组织损伤96例患者的资料。按... 目的探讨脉冲冲洗联合负压封闭引流技术(vacuum sealing drainage,VSD)在四肢开放性骨折伴严重软组织损伤患者早期清创中的临床效果。方法回顾性分析2015年1月至2018年6月本院收治的四肢开放性骨折伴严重软组织损伤96例患者的资料。按照清创方式不同分为观察组(脉冲冲洗联合VSD组)49例及对照组47例。观察组伤口清创时采用脉冲冲洗伤口、清创后原位植皮、VSD覆盖创面。对照组采用传统方法冲洗伤口、清创后原位植皮、加压打包。观察两组患者植皮成活情况、检测术后1周血浆C反应蛋白(CRP)水平、创面细菌培养情况。结果观察组治疗有效率95.92%(47/49),对照组治疗有效率78.72%(37/47),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后1周CRP仅1例患者高于10.0 mg/L,对照组仍有6例患者高于10.0 mg/L,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。清创后创面培养阳性率观察组为4.08%,对照组为19.15%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论脉冲冲洗联合负压封闭引流技术在开放性骨折清创治疗中可显著提高清创效率、提高皮肤软组织成活率、降低伤口感染率,是一种安全、有效、理想的方法。 展开更多
关键词 脉冲冲洗 负压封闭引流术 感染 开放性骨折
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水泡性口炎病毒印第安纳株反基因操作系统的建立 被引量:10
5
作者 志远 葛金英 +3 位作者 王永 胡森 郝永清 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期489-494,共6页
负链RNA病毒作为活病毒载体具有巨大的优势。本研究构建了水泡性口炎病毒印第安纳株(VSV-Ind)基因组全长cDNA克隆,建立了反向遗传操作系统并成功救获病毒。通过免疫荧光、电镜观察、RT-PCR及生长动力学研究,证实救获病毒保持典型的VSV... 负链RNA病毒作为活病毒载体具有巨大的优势。本研究构建了水泡性口炎病毒印第安纳株(VSV-Ind)基因组全长cDNA克隆,建立了反向遗传操作系统并成功救获病毒。通过免疫荧光、电镜观察、RT-PCR及生长动力学研究,证实救获病毒保持典型的VSV印第安纳株特点,救获VSV的基因组内G蛋白前、后非编码区分别引入两个用于进一步构建重组病毒时外源基因插入的两个限制酶位点。本研究为新型重组活病毒疫苗载体和肿瘤治疗载体的研制及基础病毒学相关研究提供了重要的技术平台。 展开更多
关键词 水泡性口炎病毒 反基因操作
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超大深径比深小孔的工艺方法和电极研制 被引量:6
6
作者 朱派龙 威长政 +3 位作者 志远 唐电波 周锦进 徐中耀 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期198-202,共5页
深径比超过1000的深小孔加工是世界难题,尤其是直径小于3mm的深小孔。在分析普通电火花深孔加工和专业电火花深小孔加工机床对超大深径比小孔加工仍存在排残屑、散热、稳定性差和导向困难等基础上,为克服上述问题而发明了一种其导向、... 深径比超过1000的深小孔加工是世界难题,尤其是直径小于3mm的深小孔。在分析普通电火花深孔加工和专业电火花深小孔加工机床对超大深径比小孔加工仍存在排残屑、散热、稳定性差和导向困难等基础上,为克服上述问题而发明了一种其导向、稳定性与加工深度无关的自导向、自稳定的特殊电极,并给出了可靠的工艺实施方案方法,独特的工件倒置安装方式,表述了加工规律和试验结果。 展开更多
关键词 超级深小孔 电火花加工 自导向管电极 倒置安装
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穿支皮瓣术、胸腹部带蒂皮瓣修复术对手外伤软组织缺损的治疗 被引量:8
7
作者 李振科 冯华杰 +1 位作者 李世浩 志远 《黑龙江医药》 CAS 2018年第6期1315-1317,共3页
目的:探究在手外伤软组织缺损治疗时,应用穿支皮瓣术与胸腹部带蒂皮瓣修复术治疗的效果。方法:以2015年3月-2018年2月68例手外伤软组织缺损患者作为研究对象,按照随机方法将患者分为对照组(胸腹部带蒂皮瓣修复术)和观察组(穿支皮瓣术)... 目的:探究在手外伤软组织缺损治疗时,应用穿支皮瓣术与胸腹部带蒂皮瓣修复术治疗的效果。方法:以2015年3月-2018年2月68例手外伤软组织缺损患者作为研究对象,按照随机方法将患者分为对照组(胸腹部带蒂皮瓣修复术)和观察组(穿支皮瓣术)。结果:治疗后观察组IL-6、IL-8、LPS、TNF等指标改善显著且优于对照组,且观察组治疗成功率高于对照组(P<0.05)。结论:相比较胸腹部带蒂皮瓣修复术而言,穿支皮瓣术治疗手外伤软组织缺损的效果更好,值得推广应用。 展开更多
关键词 穿支皮瓣术 胸腹部带蒂皮瓣修复术 手外伤软组织缺损 治疗效果
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海信空调风门叶片的翘曲变形研究 被引量:7
8
作者 康俊远 志远 《中国塑料》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期67-69,共3页
采用有限元方法研究了温度场、压力场对注塑件残余应力及翘曲变形的影响,重点讨论注塑件的温度场、压力场的计算,以及热塑性小变形理论下的注塑件翘曲变形计算。对影响薄壳塑件翘曲变形的因素(如模具温度、熔体温度、注射速率、保压压力... 采用有限元方法研究了温度场、压力场对注塑件残余应力及翘曲变形的影响,重点讨论注塑件的温度场、压力场的计算,以及热塑性小变形理论下的注塑件翘曲变形计算。对影响薄壳塑件翘曲变形的因素(如模具温度、熔体温度、注射速率、保压压力等)进行分析,提出翘曲产生的原因及相应的改进措施。 展开更多
关键词 温度场 有限元 残余应力 翘曲变形
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非洲猪瘟病毒结构蛋白基因重组痘苗病毒的构建及鉴定 被引量:6
9
作者 张会雷 刘任强 +4 位作者 张敏敏 王喜军 葛金英 志远 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期789-793,共5页
非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种猪的传染病,发病率和死亡率几乎达100%,是尚未传入我国的重要的猪烈性病。为研制安全有效的ASF储备疫苗,本研究利用本实验室改造的痘苗病毒(VV),将ASFV的结构蛋白P72和P54或CD2v和P30的... 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种猪的传染病,发病率和死亡率几乎达100%,是尚未传入我国的重要的猪烈性病。为研制安全有效的ASF储备疫苗,本研究利用本实验室改造的痘苗病毒(VV),将ASFV的结构蛋白P72和P54或CD2v和P30的基因分别插入到VV基因组中,构建了同时表达P72和P54的重组VV(rVV-P72-P54)以及同时表达CD2v和P30的重组VV(rVV-CD2v-P30)。Western blot和间接免疫荧光试验表明外源基因在重组病毒感染的细胞中均能够正确表达。这两株重组病毒在体外细胞培养中的增殖效率与亲本病毒无显著差异。该研究为进一步的动物免疫实验奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 重组痘苗病毒
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重组杆状病毒表达牛β干扰素及其生物学活性研究 被引量:4
10
作者 陈伟业 肇慧君 +5 位作者 王喜军 黄克和 步志高 曹文雁 葛金英 志远 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期992-996,共5页
本研究构建了表达牛β干扰素的重组杆状病毒,感染sf9细胞后,分别采用免疫荧光和免疫印迹证实了重组BoIFN-β的表达存在于细胞内和培养上清中。采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测分泌到细胞上清中重组BoIFN-β的抗病毒... 本研究构建了表达牛β干扰素的重组杆状病毒,感染sf9细胞后,分别采用免疫荧光和免疫印迹证实了重组BoIFN-β的表达存在于细胞内和培养上清中。采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测分泌到细胞上清中重组BoIFN-β的抗病毒活性,可达到106.0AU/mL。同时重组BoIFN-β还可以激活鸡Mx启动子控制的萤光素酶报告基因的转录表达。综上,本研究采用杆状病毒表达系统,重组牛β干扰素以分泌形式高水平表达,且具有天然Ⅰ型干扰素的生物学活性。 展开更多
关键词 牛β干扰素 抗病毒活性 Mx启动子 重组杆状病毒
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表达水疱性口炎病毒G基因重组新城疫病毒的构建及免疫原性研究 被引量:6
11
作者 李晓芳 张敏敏 +4 位作者 葛金英 志远 王喜军 陈伟业 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期255-259,共5页
水疱性口炎是由水疱性口炎病毒(VSV)引起的人兽共患性传染病,在我国尚无可用疫苗。为研制安全有效的水疱性口炎疫苗,本研究以新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统为基础,构建并拯救出表达VSV糖蛋白(GP)的重组病毒... 水疱性口炎是由水疱性口炎病毒(VSV)引起的人兽共患性传染病,在我国尚无可用疫苗。为研制安全有效的水疱性口炎疫苗,本研究以新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统为基础,构建并拯救出表达VSV糖蛋白(GP)的重组病毒(rLa-VSV-G)。间接免疫荧光、激光共聚焦、western blot等试验证明VSV-GP在重组病毒中正确表达;体外致病试验结果表明,rLa-VSV-G保持了LaSota亲本株的低致病性和高滴度的鸡胚生长特性;rLa-VSV-G接种4周龄~5周龄BALB/c雌性小鼠后,可以诱导显著的VSV中和抗体反应。本研究表明,重组病毒rLa-VSV—G具有作为防控VSV储备性疫苗的潜力。 展开更多
关键词 水疱性口炎病毒 糖蛋白 重组新城疫病毒 免疫原性
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关节镜微骨折术治疗膝骨关节炎合并软骨损伤效果评估 被引量:5
12
作者 志远 邹贤典 冯华杰 《吉林医学》 CAS 2020年第3期666-668,共3页
目的:分析评估对膝骨关节炎合并软骨损伤患者采用关节镜微骨折术进行治疗的临床效果。方法:选取2017年2月~2019年1月收治的膝骨关节炎合并软骨损伤患者给予关节镜微骨折术治疗的30例为关节镜微骨折术组,同期膝骨关节炎合并软骨损伤患者... 目的:分析评估对膝骨关节炎合并软骨损伤患者采用关节镜微骨折术进行治疗的临床效果。方法:选取2017年2月~2019年1月收治的膝骨关节炎合并软骨损伤患者给予关节镜微骨折术治疗的30例为关节镜微骨折术组,同期膝骨关节炎合并软骨损伤患者给予常规手术治疗的30例为常规手术治疗组。观察比较关节镜微骨折术患者与常规手术患者的膝关节功能评分(Lysholm)与VAS疼痛评分。结果:两组患者治疗后Lysholm评分均高于治疗前,且关节镜微骨折术组患者高于常规手术治疗组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后VAS评分低于治疗前,且关节镜微骨折术组患者低于常规手术治疗组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:采用关节镜微骨折术对膝骨关节炎合并软骨损伤患者进行治疗效果更优,且患者膝关节功能恢复更快,患者疼痛感亦能得以有效减缓。 展开更多
关键词 关节镜微骨折术 膝骨关节炎 软骨损伤 Lysholm评分 VAS评分
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洗衣机过滤器外壳注塑模设计 被引量:5
13
作者 志远 周铭杰 林细洲 《工程塑料应用》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期61-63,共3页
通过对洗衣机过滤器外壳结构特点与模具设计方案的分析,介绍了洗衣机过滤器外壳注塑模的结构与工作过程,重点阐述了分型抽芯机构和机动旋转脱螺纹传动机构有关的理论与计算方法。生产实践证明,该模具设计合理,动作准确可靠,塑料件质量良... 通过对洗衣机过滤器外壳结构特点与模具设计方案的分析,介绍了洗衣机过滤器外壳注塑模的结构与工作过程,重点阐述了分型抽芯机构和机动旋转脱螺纹传动机构有关的理论与计算方法。生产实践证明,该模具设计合理,动作准确可靠,塑料件质量良好,生产效率高,完全能够满足用户的要求。 展开更多
关键词 洗衣机过滤器外壳 注塑模 分型抽芯机构 机动旋转脱螺纹传动机构
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辽宁省部分地区传疟媒介按蚊对5种杀虫剂的抗药性调查 被引量:5
14
作者 李志 丁俊 +8 位作者 王纯玉 张家勇 杨德香 李鑫 关玉辉 陈军 陈哲 志远 韩来顺 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2013年第5期464-466,共3页
目的了解辽宁省媒介按蚊对5种杀虫剂的抗药性,为制定防制策略提供依据。方法采用WHO成蚊滤纸接触法,观察蚊虫死亡率,测定其对5种杀虫剂的敏感性。结果丹东东港市及锦州北镇市媒介按蚊对5种杀虫剂均存在抗药性,最低的死亡率仅为16.7%;丹... 目的了解辽宁省媒介按蚊对5种杀虫剂的抗药性,为制定防制策略提供依据。方法采用WHO成蚊滤纸接触法,观察蚊虫死亡率,测定其对5种杀虫剂的敏感性。结果丹东东港市及锦州北镇市媒介按蚊对5种杀虫剂均存在抗药性,最低的死亡率仅为16.7%;丹东、铁岭和锦州市媒介按蚊对4%DDT、0.05%溴氰菊酯和0.05%高效氯氰菊酯也产生了不同程度的抗药性,最高死亡率为97.4%;0.1%残杀威对丹东振安区、铁岭开原市媒介按蚊和0.75%氯菊酯对振安区媒介按蚊杀灭效果较好,死亡率均为100%。结论在辽宁省部分地区媒介按蚊对DDT的抗药性仍然较高,同时对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯也形成不同程度抗药性。因此,应合理使用这些药剂,以延缓抗药性的发展;媒介按蚊对残杀威、氯菊酯相对较敏感,可作为现阶段主要的杀虫剂使用。 展开更多
关键词 按蚊 抗药性 杀虫剂
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一种研究多孔介质中水气分散体系运移机制的仿真模拟新方法 被引量:2
15
作者 王富琼 王秀宇 +3 位作者 单学军 志远 陈秀林 杨胜来 《油气地质与采收率》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期130-138,共9页
水气分散体系可有效改变地层油渗流通道,抑制驱替流体的窜流,扩大水气分散体系在油层中的波及体积,提高剩余油的动用效果。由于难以直接观察多孔介质中水气分散体系的流动,因此对于水气分散体系在多孔介质中的运移机理研究较少。笔者提... 水气分散体系可有效改变地层油渗流通道,抑制驱替流体的窜流,扩大水气分散体系在油层中的波及体积,提高剩余油的动用效果。由于难以直接观察多孔介质中水气分散体系的流动,因此对于水气分散体系在多孔介质中的运移机理研究较少。笔者提出一种研究水气分散体系在多孔介质中运移的仿真模拟新方法,基于水平集方法和气液两相流,使用多物理场耦合数值计算软件COMSOL Multiphysics进行研究。对水气分散体系在孔喉中的贾敏效应、聚并和卡断机理进行了仿真研究,探讨了水气分散体系运移过程中孔喉压力的影响因素,分析分散相气泡聚并过程的形态变化,研究水气分散体系在孔喉中发生卡断现象的动态特征,结果表明数值模拟可以直观的体现水气分散体系在多孔介质中的运移机制。 展开更多
关键词 水气分散体系 水平集方法 气液两相流 多孔介质 运移机制
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双Endobutton技术联合肩锁韧带重建治疗肩锁关节脱位 被引量:4
16
作者 志远 李振科 冯华杰 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2020年第6期24-27,共4页
目的对比分析双Endobutton技术联合肩锁韧带重建与锁骨钩钢板治疗RockwoodⅢ型肩锁关节脱位的临床疗效。方法回顾性分析2016年4月至2019年2月收治的51例RockwoodⅢ型肩锁关节脱位患者资料,按治疗方法不同分为锁骨钩钢板组(30例)和双Endo... 目的对比分析双Endobutton技术联合肩锁韧带重建与锁骨钩钢板治疗RockwoodⅢ型肩锁关节脱位的临床疗效。方法回顾性分析2016年4月至2019年2月收治的51例RockwoodⅢ型肩锁关节脱位患者资料,按治疗方法不同分为锁骨钩钢板组(30例)和双Endobutton钢板组(21例)。比较两组的手术时间、切开长度、术后6个月疼痛视觉模拟评分(VAS)、Karlsson分级及Constant-Murley评分。结果所有患者均获得随访,随访时间6~15个月。双Endobutton钢板组术后6个月患者患肩VAS评分平均为(1.2±0.6)分、锁骨钩钢板组为(2.3±1.4)分;双Endobutton钢板组Constant-Murley评分为(93.5±3.4)分、锁骨钩钢板组为(86.9±6.7)分,双Endobutton钢板组切口长度为(7.2±0.4)cm、锁骨钩钢板组为(7.8±0.7) cm,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。双Endobutton钢板组和锁骨钩钢板组手术时间分别为(50.1±4.2)min、(48.1±3.6)min,Karlsson分级优良率分别为95.2%(20/21)、83.3%(25/30),差异无统计学意义(P>0.05)。结论双Endobutton技术联合肩锁韧带重建法治疗RockwoodⅢ型肩锁关节脱位固定确实,具有切口更小、术后疼痛更少、患者功能恢复更好、无需二次手术等优点,疗效满意。 展开更多
关键词 肩锁关节脱位 ENDOBUTTON钢板 喙锁韧带重建 肩锁韧带重建 锁骨钩钢板
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表达扎伊尔型埃博拉病毒囊膜糖蛋白重组水泡性口炎病毒的构建 被引量:4
17
作者 宋坤 王喜军 +7 位作者 志远 葛金英 冯娜 胡旭乐 陈伟业 高玉伟 夏咸柱 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期431-435,共5页
埃博拉病毒(EBO V)能够引起一种人畜共患急性出血性传染病,即埃博拉出血热。研制安全、有效的抗病毒疫苗具有重要意义。本研究利用水泡性口炎病毒(V SV)印第安纳株反向遗传操作系统,构建并拯救得到表达扎伊尔型埃博拉病毒(ZEBO V)囊膜... 埃博拉病毒(EBO V)能够引起一种人畜共患急性出血性传染病,即埃博拉出血热。研制安全、有效的抗病毒疫苗具有重要意义。本研究利用水泡性口炎病毒(V SV)印第安纳株反向遗传操作系统,构建并拯救得到表达扎伊尔型埃博拉病毒(ZEBO V)囊膜糖蛋白G P的重组V SV(rV SV-ZEBO V-G P),通过w estern blot和免疫荧光试验证明在重组病毒中ZEBO V G P蛋白获得正确表达;动物试验显示重组病毒对小鼠高度安全;中和试验结果表明重组病毒能诱导小鼠产生针对ZEBO V囊膜糖蛋白G P嵌合V SV假病毒粒的特异性中和抗体。本研究表明rV SV-ZEBO V-G P作为防控ZEBO V的储备性疫苗具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 扎伊尔型埃博拉病毒 囊膜糖蛋白 重组水泡性口炎病毒
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关节镜下微骨折术修复膝关节软骨全层缺损的临床疗效观察 被引量:4
18
作者 杨伟清 志远 《外科研究与新技术》 2016年第1期41-43,共3页
目的探讨关节镜下微骨折术治疗膝关节软骨全层缺损患者的临床效果。方法选取2013年5月—2014年4月来我院就诊的膝关节软骨全层缺损患者90例,根据随机数字表法分为对照组和观察组,每组45例,观察组采用关节镜下微骨折术疗法,对照组行关节... 目的探讨关节镜下微骨折术治疗膝关节软骨全层缺损患者的临床效果。方法选取2013年5月—2014年4月来我院就诊的膝关节软骨全层缺损患者90例,根据随机数字表法分为对照组和观察组,每组45例,观察组采用关节镜下微骨折术疗法,对照组行关节清理术,比较两组的临床效果;术后随访半年,比较2组治疗前后的HSS膝关节功能评分、Tegner运动能力评分情况。结果观察组的临床有效率为91.1%,对照组为71.1%,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗后的HSS膝关节功能评分、Tegner运动能力评分情况均有改善,但观察组治疗后的HSS膝关节功能评分、Tegner运动能力评分显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论膝关节软骨全层缺损患者采用关节镜下微骨折术疗法,可显著改善患者的膝关节活动能力及功能评分,临床效果确切,值得临床推广。 展开更多
关键词 软骨缺损 膝关节 微骨折术 关节镜
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基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究 被引量:4
19
作者 陈伟业 葛金英 +6 位作者 肇慧君 胡森 志远 曹文雁 王喜军 黄克和 步志高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期123-128,共6页
为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,... 为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。 展开更多
关键词 鸡Ⅰ型干扰素 生物活性检测 鸡Mx启动子 萤光素酶
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埃博拉和马尔堡病毒囊膜糖蛋白嵌合型重组水泡性口炎病毒的构建及鉴定 被引量:4
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作者 邵钰 王金良 +5 位作者 刘任强 张会雷 王喜军 葛金英 志远 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期438-442,共5页
埃博拉病毒(EBOV)和马尔堡病毒(MARV)属于丝状病毒科,能够导致人和动物发生致命的埃博拉出血热和马尔堡出血热,这两种病是重要的尚未传入我国的烈性人兽共患病。为研制安全有效的储备疫苗,本研究利用水泡性口炎病毒(VSV)反向遗传操作技... 埃博拉病毒(EBOV)和马尔堡病毒(MARV)属于丝状病毒科,能够导致人和动物发生致命的埃博拉出血热和马尔堡出血热,这两种病是重要的尚未传入我国的烈性人兽共患病。为研制安全有效的储备疫苗,本研究利用水泡性口炎病毒(VSV)反向遗传操作技术,将VSV自身糖蛋白(GP)分别替换为EBOV或MARV的GP,构建了表达扎伊尔型EBOV、苏丹型EBOV及MARV GP的嵌合VSV重组病毒r VSV△G/ZEBOVGP、r VSV△G/SEBOVGP及r VSV△G/MARVGP。Western blot和间接免疫荧光试验表明这3种GP蛋白在重组病毒感染的细胞中均能够正确表达。电镜观察结果显示,3种重组病毒均与亲本病毒具有相同形态特征,表明这3种外源GP蛋白均能够嵌合在重组病毒粒子表面。本研究构建的这3种重组病毒为进一步的动物免疫试验并评价其免疫效果奠定了基础。 展开更多
关键词 埃博拉病毒 马尔堡病毒 囊膜糖蛋白 水泡性口炎病毒
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