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红景天苷调控KLF4/eNOS信号抑制Hcy诱导内皮-间质转分化的作用 被引量:6
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作者 何丽 +4 位作者 黄梅 彭剑青 姜丰 沈祥春 张彦燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期681-686,共6页
目的基于KLF4/eNOS信号,研究红景天苷(salidroside,SAL)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导内皮细胞间质转分化(EndMT)的作用及机制。方法(1)研究SAL对Hcy诱导EndMT的作用。不同剂量SAL预处理后,给予Hcy(1 mmol·L^(-1))共孵育48 h诱导EndMT... 目的基于KLF4/eNOS信号,研究红景天苷(salidroside,SAL)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导内皮细胞间质转分化(EndMT)的作用及机制。方法(1)研究SAL对Hcy诱导EndMT的作用。不同剂量SAL预处理后,给予Hcy(1 mmol·L^(-1))共孵育48 h诱导EndMT。采用Western blot检测VE-cadherin、α-SMA、KLF4及eNOS的蛋白水平,划痕修复实验检测细胞迁移能力,硝酸还原酶法检测细胞内NO水平,细胞免疫荧光技术检测KLF4表达及定位。(2)基于KLF4/eNOS信号,研究SAL抑制EndMT的信号机制。采用siRNA技术实现细胞内KLF4的沉默,Western blot检测VE-cadherin与α-SMA,KLF4及eNOS的蛋白水平。结果(1)SAL上调Hcy诱导的VE-cadherin及下调α-SMA的表达,降低细胞迁移能力,上调eNOS/NO信号轴水平,并抑制KLF4的表达及向胞核转位。(2)沉默KLF4可下调α-SMA及KLF4的表达,上调VE-cadherin和eNOS的表达。与SAL+siKLF4组比较,SAL组及siKLF4组对表型标志物的作用无明显差异。结论SAL抑制Hcy诱导的EndMT,其作用与调节KLF4/eNOS信号途径有关。 展开更多
关键词 红景天苷 人脐静脉内皮细胞 血管内皮功能 内皮-间质转分化 KLF4 ENOS
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松油烯-4-醇调节SIRT1/Nrf2信号抑制慢性肾病血管氧化应激损伤 被引量:2
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作者 尚雪祎 +6 位作者 张彦琦 陈虹雨 李金锦 何丽 文波 沈祥春 张彦燕 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1724-1730,共7页
目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD... 目的探讨松油烯-4-醇(T4O)对慢性肾脏疾病(CKD)模型小鼠血管氧化应激损伤的作用及信号机制。方法采用高磷饲料联合腺嘌呤制备CKD小鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水灌胃。通过尾静脉注射慢病毒SIRT1 RNAi,建立SIRT1体内低表达的CKD小鼠模型用于信号机制研究。给药组以T4O低、高剂量(10 mg/kg和20 mg/kg)连续灌胃给药6周。收集小鼠血清检测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)水平,采用HE染色观察小鼠胸主动脉和肾脏组织形态,试剂盒检测血管组织丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫荧光检测血管组织ROS水平;Western blot法检测Nrf2、HO-1、NQO-1及SIRT1的表达。结果T4O可降低CKD小鼠血清BUN和CRE水平,改善肾脏病理损伤和主动脉血管形态结构,降低血管组织MDA含量,增加SOD含量,降低ROS水平;T4O干预能够促进Nrf2核易位及上调HO-1、NQO-1以及SIRT1的蛋白表达。分子机制研究表明,LV-SIRT1 RNAi+T4O+CKD组能够抑制T4O对CKD诱导的MDA和SOD含量的影响,部分抵消T4O上调Nrf2核易位以及SIRT1、HO-1、NQO-1的蛋白表达水平的作用。结论T4O对CKD小鼠胸主动脉氧化应激损伤具有保护作用,其分子信号机制可能与调节SIRT1/Nrf2级联信号有关。 展开更多
关键词 松油烯-4-醇 慢性肾脏疾病 氧化应激 沉默调节蛋白1 核转录因子E2相关因子2 Nrf2/HO-1/NQO-1
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松油烯-4-醇改善自噬流障碍对高糖诱导的VSMCs炎性损伤的保护作用
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作者 黄梅 +5 位作者 张彦琦 陈虹雨 吴林菁 沈祥春 徐旖旎 张彦燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期532-536,共5页
目的基于改善自噬流障碍,研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎性损伤的作用及涉及的分子信号。方法采用划痕实验分析VSMCs迁移能力,ELISA法检测细胞培养上清液IL-1β... 目的基于改善自噬流障碍,研究松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎性损伤的作用及涉及的分子信号。方法采用划痕实验分析VSMCs迁移能力,ELISA法检测细胞培养上清液IL-1β、IL-6的水平;Western blot检测炎症相关分子NF-κB p65、p-NF-κB p65、IL-1β、IL-18及自噬相关信号p62、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-Beclin1的蛋白表达。结果T4O可抑制高糖诱导的VSMCs迁移,减少促炎因子IL-1β、IL-6的分泌与释放,抑制p-NF-κB p65/NF-κB p65、IL-1β、IL-18的蛋白表达,同时下调p62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ及p-Beclin1的表达水平。采用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)干预VSMCs自噬通量后,T4O预处理可明显抑制CQ介导的上述炎症因子及自噬相关信号的蛋白表达水平。结论T4O通过改善自噬流障碍,抑制高糖诱导的VSMCs炎性损伤。 展开更多
关键词 松油烯-4-醇 血管平滑肌细胞 炎性损伤 自噬 NF-κB 高糖
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松油烯-4-醇通过改善线粒体动力学抑制血管平滑肌细胞钙化
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作者 黄梅 +6 位作者 张彦琦 陈虹雨 尚雪祎 李金锦 徐旖旎 沈祥春 张彦燕 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3024-3031,共8页
本研究旨在探讨松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖(high glucose,HG)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)钙化的作用及机制。研究T4O对HG诱导的VSMC钙质沉积、成骨表型转化及线粒体动力学的作用。采用线粒体动... 本研究旨在探讨松油烯-4-醇(terpinen-4-ol,T4O)对高糖(high glucose,HG)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)钙化的作用及机制。研究T4O对HG诱导的VSMC钙质沉积、成骨表型转化及线粒体动力学的作用。采用线粒体动力相关蛋白Drp-1(dynamin-related protein 1,Drp-1)抑制剂Mdivi-1分析线粒体动力学和VSMC钙化之间的相关性以及T4O的作用。采用茜素红S染色观察钙盐沉积,流式细胞术检测细胞内Ca^(2+)含量;Western blot、免疫荧光检测表型转化相关标志物[α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)和Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,Runx2)和线粒体动力学相关标志物[线粒体融合蛋白1(mitofusin1,MFN1)、线粒体融合蛋白2(mitofusin2,MFN2)和Drp-1]的表达。结果显示,T4O低、高剂量能够不同程度抑制HG诱导的α-SMA、MFN1、MFN2表达水平的下调,抑制BMP2、Runx2、Drp-1表达水平的上调,减少细胞内Ca^(2+)含量和钙盐沉积,有效抑制HG诱导的VSMC钙化和线粒体动力学紊乱。T4O组、Mdivi-1组、T4O+Mdivi-1组能够上调HG诱导的α-SMA、MFN1、MFN2的表达水平,下调BMP2、Runx2、Drp-1的蛋白表达水平,抑制钙盐沉积,且T4O组与T4O+Mdivi-1组上述指标无明显差异。上述研究结果表明,松油烯-4-醇能够抑制Drp-1的表达水平,调节线粒体动力学紊乱,抑制HG诱导的VSMC钙化。 展开更多
关键词 松油烯-4-醇 血管平滑肌细胞 成骨表型转化 血管钙化 线粒体动力学
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红景天苷下调BMP2/Smad1信号抑制血管平滑肌细胞表型转化的作用 被引量:3
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作者 张彦燕 何丽 +3 位作者 黄梅 沈祥春 李佳川 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第6期595-601,共7页
基于BMP2/Smad1信号研究红景天苷(SAL)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的作用.实验以不同剂量SAL预孵育2 h后,给予高糖(HG,24.5 mmol·L-1)共孵育VSMCs细胞,采用Giemsa染色观察VSMCs形态学变化,采用划痕修复实验检测细... 基于BMP2/Smad1信号研究红景天苷(SAL)对高糖诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化的作用.实验以不同剂量SAL预孵育2 h后,给予高糖(HG,24.5 mmol·L-1)共孵育VSMCs细胞,采用Giemsa染色观察VSMCs形态学变化,采用划痕修复实验检测细胞的迁移能力,qRT-PCR检测胶原Ⅰ(collagenⅠ)的mRNA水平,Western blot法检测骨形态发生蛋白2(BMP2)、磷酸化Smad1(p-Smad1)、骨桥蛋白(OPN)、平滑肌α-肌动蛋白(α-SMA)和平滑肌22 alpha(SM22α)蛋白表达.研究结果表明,高糖诱导细胞迁移能力增强,增加collagenⅠ的mRNA水平,同时下调收缩表型标志物α-SMA和SM22α蛋白水平,上调成骨表型标志物OPN、BMP2及p-Smad1的蛋白水平;低、高剂量的SAL预处理后,可明显降低高糖诱导VSMCs的细胞迁移能力,降低细胞内collagenⅠ的mRNA水平,上调α-SMA及SM22α的蛋白表达,下调BMP2、p-Smad1和OPN蛋白表达.研究结果表明,SAL抑制高糖诱导的平滑肌细胞表型转化,其作用可能与下调BMP2/Smad1信号有关. 展开更多
关键词 红景天苷 血管平滑肌细胞 VSMCs表型转化 BMP2/Smad1
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丽水市小学科学教学城乡差异调查与分析
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作者 钟雪丽 +2 位作者 陈丁瑜 雷雅莉 《教育界(教师培训)》 2016年第10期52-52,共1页
我国城乡小学科学教育处于尴尬地位,一方面它肩负课程改革的主要执行者责任,另一方面自身又难以胜任改革赋予的重任.因此深入分析小学科学教育现状及原因,找到适合农村小学科学教育改革之路非常重要.本文通过对丽水市部分小学的走访,发... 我国城乡小学科学教育处于尴尬地位,一方面它肩负课程改革的主要执行者责任,另一方面自身又难以胜任改革赋予的重任.因此深入分析小学科学教育现状及原因,找到适合农村小学科学教育改革之路非常重要.本文通过对丽水市部分小学的走访,发现当前小学科学教育存在的问题,对此提出相应对策,希望为农村小学科学教育做贡献. 展开更多
关键词 农村小学 科学教学 丽水市 城乡 科学教育 课程改革 教育现状 教育改革
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