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嗜水气单胞菌毒素的提纯及其特性分析 被引量:82
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作者 小林 陆承平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第6期432-438,共7页
从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌,其培养物经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素层析及 Sephsdex G100凝胶过滤纯化,获得一种单一多肽的外毒素,分子量为52.5kd。该毒素对热敏感,对胰酶有抗性,最适 pH5—8,具有溶血性、肠毒性和细胞毒... 从患暴发性传染病的家养鲫鱼分离到嗜水气单胞菌,其培养物经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素层析及 Sephsdex G100凝胶过滤纯化,获得一种单一多肽的外毒素,分子量为52.5kd。该毒素对热敏感,对胰酶有抗性,最适 pH5—8,具有溶血性、肠毒性和细胞毒性,腹腔注射致死小白鼠和鲫鱼,其生物学活性可被同源抗毒素中和。鉴于该毒素的独特性质,建议命名为hec 毒素。 展开更多
关键词 嗜水气单胞菌 溶血性 毒素
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中国对虾一种杆状病毒的ELISA检测方法 被引量:36
2
作者 小林 钟江 +3 位作者 高双诚 王颖 乐云仙 朱学宝 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期315-321,共7页
从患暴发性传染病的中国对虾组织中分离了一种病毒,经差速离心、密度梯度离心及Shepharose2B柱层析纯化了一种形状为杆状的病毒。提纯病毒核酸电泳为一条带,分子量为20kb。将提纯病毒免疫新西兰兔获得较高效价的抗血... 从患暴发性传染病的中国对虾组织中分离了一种病毒,经差速离心、密度梯度离心及Shepharose2B柱层析纯化了一种形状为杆状的病毒。提纯病毒核酸电泳为一条带,分子量为20kb。将提纯病毒免疫新西兰兔获得较高效价的抗血清并初步建立了酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法。可在六小时内完成对样品的检测,检测灵敏度达60纳克(ng)。 展开更多
关键词 中国 对虾 杆状病毒 酶联免疫吸附 测定 ELISA
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用点酶法检测鱼类致病性嗜水气单胞菌HEC毒素 被引量:40
3
作者 陈怀青 陆承平 +1 位作者 陈琼 小林 《动物检疫》 1993年第4期7-9,共3页
本试验建立的检测嗜水气单胞菌HEC毒素的点酶法,可在嗜水气单胞菌培养上清和临床病料中检出HEC毒素,可检出的最低水平为95ng/ml。用该法检测大肠杆菌、沙门氏菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、温和气单胞菌等的培养上清及患草鱼出血病的病鱼病... 本试验建立的检测嗜水气单胞菌HEC毒素的点酶法,可在嗜水气单胞菌培养上清和临床病料中检出HEC毒素,可检出的最低水平为95ng/ml。用该法检测大肠杆菌、沙门氏菌、鳗弧菌、荧光假单胞菌、温和气单胞菌等的培养上清及患草鱼出血病的病鱼病料,均为阴性反应,仅与豚鼠气单胞菌、杀鲑气单胞菌新亚种及吕克氏耶尔森氏菌有轻度的交叉反应。对72株病鱼分离菌及33份病鱼组织的检测结果表明,点酶法与溶血试验的符合率分别为80.7%和90.9%。以上试验重复3次,结果完全一致。综上可见,用点酶法检测嗜水气单胞菌HEC毒素,无须作复杂的细菌鉴定,并能直接用于病料,是一个快速、敏感、特异、有效的方法,显示出广阔的应用前景。 展开更多
关键词 点酶法 嗜水气单胞菌 毒素 鱼类
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冷却速度对过共晶Al-Si合金的初晶Si微细化的影响 被引量:16
4
作者 吴树森 小林 吴广忠 《材料科学与工艺》 EI CAS CSCD 2001年第2期141-145,共5页
通过检测过共晶Al- 2 0 %Si- 1%Cu - 0 .5 %Mg - 0 .5 %Mn合金在不同变质处理下的组织变化 ,研究了冷却速度对初晶Si微细化的影响 .结果表明 :在 5 10 0℃ /s的不同冷却速度下 ,未变质合金的初晶Si粗大 ,为 5 0 12 0 μm ,冷却速度对初... 通过检测过共晶Al- 2 0 %Si- 1%Cu - 0 .5 %Mg - 0 .5 %Mn合金在不同变质处理下的组织变化 ,研究了冷却速度对初晶Si微细化的影响 .结果表明 :在 5 10 0℃ /s的不同冷却速度下 ,未变质合金的初晶Si粗大 ,为 5 0 12 0 μm ,冷却速度对初晶Si尺寸的影响较显著 ;磷变质或双重变质条件下 ,冷却速度的变化对初晶Si细化的影响较小 .双重变质剂具有同时细化共晶Si及初晶Si的作用 ,使初晶Si比磷变质更细小 ,可使初晶Si小于 2 0 展开更多
关键词 初晶硅 细化 过共晶铝硅合金 过冷度 快速凝固法 组织 变质处理
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骨细胞Wnt/β-Catenin通过Notch信号促进BMSCs成骨分化 被引量:19
5
作者 任磊 代光明 +6 位作者 林枭 张东力 田冕 贺尧 许文娟 小林 黄伟 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期600-605,共6页
目的探讨骨细胞Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用及其分子机制。方法采用条件性基因敲出Cre/loxp技术制备特异性激活骨细胞Wnt/β-Catenin信号通路的小鼠;体外分离其和野生对照组小鼠的骨细胞,并分别与野生型小鼠骨... 目的探讨骨细胞Wnt信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的作用及其分子机制。方法采用条件性基因敲出Cre/loxp技术制备特异性激活骨细胞Wnt/β-Catenin信号通路的小鼠;体外分离其和野生对照组小鼠的骨细胞,并分别与野生型小鼠骨髓间充质干细胞共培养;碱性磷酸酶(ALP)染色及活性定量、茜素红(Alizarin red)染色检测共培养早期成骨分化和晚期钙盐沉积;Real-Time PCR检测骨细胞Notch信号配体Jag1、Jag2、Dll1、Dll4及共培养后成骨分化特异标志物Runx2、ALP、Osteocalcin的mRNA表达水平。随后于共培养中加入Notch信号通路化学抑制剂DAPT(对照组加DMSO),再次行碱性磷酸酶(ALP)染色及活性定量和Real-Time PCR检测成骨分化特异标志物表达水平。结果 Wnt/β-Catenin激活的骨细胞其自身Jag1、Jag2、Dll4 mRNA表达较对照组骨细胞明显升高(P<0.05),与BMSCs共培养后成骨转录因子Runx2,成骨分化特异标志物ALP、Osteocalcin mRNA的表达较野生型明显升高(P<0.05),钙盐沉积增加。加入DAPT后,骨细胞Wnt激活组成骨转录因子Runx2、ALP、Osteocalcin mRNA的表达明显下降(P<0.05)。结论骨细胞调控骨的代谢,激活其Wnt/β-Catenin信号通路将通过上调Notch信号而促进BMSCs的成骨分化。 展开更多
关键词 骨细胞 WNT/Β-CATENIN 骨髓间充质干细胞 NOTCH 成骨分化
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Modification mechanism of hypereutectic Al-Si alloy with P-Na addition 被引量:12
6
作者 吴树森 小林 +2 位作者 福田葉椰 菅野利猛 中江秀雄 《中国有色金属学会会刊:英文版》 CSCD 2003年第6期1285-1289,共5页
Effect of P-Na united modification on Al-22%Si-1.0%Cu-0.5%Mg-0.5%Mn alloy was studied. The results show that the refining effect of P-Na addition on primary silicon is superior to that of P and the former could modify... Effect of P-Na united modification on Al-22%Si-1.0%Cu-0.5%Mg-0.5%Mn alloy was studied. The results show that the refining effect of P-Na addition on primary silicon is superior to that of P and the former could modify eutectic silicon at the same time. Effects of P-Na modification on crystallization and microstructure of hypereutectic Al-Si alloys were studied with Electron-Scanning Microscope, Electron-Probe and X-ray diffractometer. The modification mechanism represents that on one hand, the primary silicon is refined by AlP as heterogeneous nucleus; on the other hand, when Na is added at the same time, P atoms are difficult to diffuse in the melt, and then enrichs on the growing faces of silicon phase. Moreover, a SiP compound was also discovered in Si crystals, which prevents the growth of silicon phase and refines the primary silicon. 展开更多
关键词 过共晶AL-SI合金 铝合金 精练 添加剂 晶粒细化
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下调骨细胞TGF-β/Smad4信号可抑制小鼠BMSCs成骨及破骨分化 被引量:11
7
作者 代光明 任磊 +6 位作者 陈虹 刘文 陈宇 何小强 刘伟 小林 黄伟 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第6期786-791,共6页
目的检测骨细胞TGF-β/Smad4信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨和破骨分化的作用,并初步探讨其相关机制。方法用条件性基因敲减Cre/loxp技术特异性敲减骨细胞Smad4,获得下调骨细胞TGF-β/Smad4信号通路的小鼠;体外分离骨细胞并与... 目的检测骨细胞TGF-β/Smad4信号通路对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨和破骨分化的作用,并初步探讨其相关机制。方法用条件性基因敲减Cre/loxp技术特异性敲减骨细胞Smad4,获得下调骨细胞TGF-β/Smad4信号通路的小鼠;体外分离骨细胞并与野生型小鼠骨髓间充质细胞(BMSCs)共培养;碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红(alizarin red)染色检测早期成骨分化和晚期钙盐沉积,酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞;real-time PCR检测成骨分化特异标志物Runx2、Osterix(OSX)、ALP、osteocalcin和破骨分化特异标志物RANKL和OPG的mRNA表达水平。Western blot检测成骨分化特异标志物Runx2和osteocalcin和破骨分化特异标志物RANK蛋白表达水平。结果下调骨细胞TGF-β/Smad4信号能够抑制BMSCs成骨转录因子Runx2、Osterix(P<0.01)、成骨分化特异标志物ALP和osteocalcin(P<0.01)以及破骨分化特异标志物RANK(P<0.01)的表达;增加破骨分化抑制物OPG的表达(P<0.05);而RANKL的表达无明显变化;最终下调了RANKL/OPG的比值(P<0.05)。结论终末分化的骨细胞调控骨的代谢,下调其TGF-β/Smad4信号可抑制BMSCs成骨和破骨细胞的分化。 展开更多
关键词 骨细胞 TGF-β/Smad4 BMSCS 成骨分化 破骨分化
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TGF-βⅡ型受体小分子抑制剂ITD-1对骨髓基质细胞成骨分化和血管形成的作用 被引量:9
8
作者 曾继涛 小林 刘宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期384-391,共8页
目的探讨TGF-βⅡ型受体(transforming growth factor beta receptorⅡ,TGFBR2)的小分子抑制剂ITD-1对小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化和血管形成的影响。方法将C57/BL6小鼠BMSCs分为3组:不经药物处理为空白... 目的探讨TGF-βⅡ型受体(transforming growth factor beta receptorⅡ,TGFBR2)的小分子抑制剂ITD-1对小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化和血管形成的影响。方法将C57/BL6小鼠BMSCs分为3组:不经药物处理为空白组;1‰DMSO处理为DMSO组;10μmol/L ITD-1处理为ITD-1组。采用CCK-8检测细胞增殖变化;流式细胞仪检测凋亡细胞比例;实时荧光定量PCR(qPCR)测定成骨标志物碱性磷酸酶(ALP)、ostrix(OSX)、Ⅰ型胶原(collagen1,COL1)和骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)及成血管相关标志物血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管生成素1(angiopoietin1,ANGPT1)mRNA的表达;碱性磷酸酶染色检测ALP表达情况;茜素红染色检测成骨晚期矿化水平;免疫荧光染色检测成骨标志物OPN及成血管标志物VEGF的表达;小鼠组织培养实验检测体外培养小鼠肱骨骨密度。结果碱性磷酸酶染色显示ITD-1组染色变浅,茜素红染色结果提示ITD-1组钙盐结节显著减少;与DMSO组比较,ITD-1组BMSCs增殖水平显著降低;流式细胞仪检测显示10μmol/L的ITD-1不导致细胞凋亡;与DMSO组比较,ITD-1组成骨标志物ALP、OSX、COL1及OCN的mRNA相对表达量均显著降低(P<0.01),但成血管标志物VEGF和ANGPT1的mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),OPN表达降低而VEGF表达升高(P<0.05),肱骨骨密度也显著降低(P<0.05)。结论TGFBR2的小分子抑制剂ITD-1可抑制骨髓基质细胞增殖,在不影响细胞凋亡的情况下对成骨分化具有显著抑制作用,但显著增强血管形成。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 转化生长因子&beta Ⅱ型受体 成骨分化 血管生成 小分子抑制剂
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储存环中有效鉴别衰变事件的方法及在^(94m)Ru^(44+)寿命测量中的应用
9
作者 彭婷微 曾奇 +9 位作者 王猛 张玉虎 小林 付超义 李宏福 孙铭泽 邢元明 颜鑫亮 赵剑锟 周旭 《原子核物理评论》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期276-281,共6页
兰州重离子加速器冷却储存环上的等时性质量谱仪是开展高电荷态、短寿命同核异能态衰变研究的理想装置。在短寿命高电荷态离子^(94m)Ru^(44+)的寿命测量实验中,我们直接观测到了^(94)Ru的8^(+)态isomer衰变到基态的过程。在观测时间窗口... 兰州重离子加速器冷却储存环上的等时性质量谱仪是开展高电荷态、短寿命同核异能态衰变研究的理想装置。在短寿命高电荷态离子^(94m)Ru^(44+)的寿命测量实验中,我们直接观测到了^(94)Ru的8^(+)态isomer衰变到基态的过程。在观测时间窗口(20μs,180μs)范围内,鉴别出了49个衰变事件。为了能够鉴别出更多的衰变事件,研究了一种基于频谱幅度来指认衰变事件的方法。基于模拟结果,该方法可以有效鉴别(15μs,185μs)内的衰变事件。将新的鉴别方法应用到实验数据处理中,在(15μs,185μs)内,鉴别出了54个衰变事件。基于这54个衰变事件,计算得到^(94m)Ru^(44+)在实验室坐标系下的寿命为194(121)μs。新的寿命结果与之前的结果218(148)μs在误差范围内一致。 展开更多
关键词 兰州重离子加速器冷却储存环 等时性质量谱仪 全剥离离子 ^(94m)Ru 寿命测量
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优质护理在老年脑梗死患者中的应用效果 被引量:7
10
作者 小林 《现代医药卫生》 2014年第24期3798-3799,共2页
目的探讨优质护理服务在老年脑梗死护理中的应用效果。方法选择该院2013年2月至2014年2月接收的老年脑梗死患者78例,随机分为对照组和观察组,各39例。对照组患者采用基础性护理模式,观察组患者采用优质护理服务。记录两组患者的病情变... 目的探讨优质护理服务在老年脑梗死护理中的应用效果。方法选择该院2013年2月至2014年2月接收的老年脑梗死患者78例,随机分为对照组和观察组,各39例。对照组患者采用基础性护理模式,观察组患者采用优质护理服务。记录两组患者的病情变化及对护理模式的满意度并对比分析。结果对照组患者好转率[33.33%(13/39)]和护理总满意度[43.59%(17/39)]均明显低于观察组[66.67%(26/39)、89.74%(35/39)],差异均有统计学意义(P<0.05)。结论优质护理应用于老年脑梗死的治疗,能有效提高患者疾病的好转率以及患者的总满意度,对整体护理工作产生了良好的影响,值得推广应用。 展开更多
关键词 护理 脑梗死 老年人 治疗结果
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Smad4促进成骨分化的机制研究 被引量:5
11
作者 刘俊银 冯玮 小林 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期600-605,655,共7页
目的探讨Smad4基因促进成骨分化的作用机制。方法采用条件性基因敲除技术Cre/loxp,制备骨细胞特异性敲除Smad4小鼠(Smad4^(ot)cko),小鼠胚胎骨骼透明染色分析胚胎期小鼠长骨生长状况;待小鼠成长至1月龄,X-ray检测突变小鼠与对照组小鼠... 目的探讨Smad4基因促进成骨分化的作用机制。方法采用条件性基因敲除技术Cre/loxp,制备骨细胞特异性敲除Smad4小鼠(Smad4^(ot)cko),小鼠胚胎骨骼透明染色分析胚胎期小鼠长骨生长状况;待小鼠成长至1月龄,X-ray检测突变小鼠与对照组小鼠的骨密度差异;静态骨组织形态学分析检测突变鼠及对照鼠的骨量变化、成骨细胞数量变化等差异;实时荧光定量PCR检测Smad4突变鼠股骨成骨细胞相关因子Runx2、ALP、OSX及OCN;qPCR检测突变鼠股骨破骨吸收标志基因RANKL、OPG,并计算RANKL/OPG比率。结果 Smad4基因敲除小鼠在胚胎期未出现骨生长异常。X线结果显示,1月龄时,与对照组小鼠相比,Smad4突变鼠的骨密度降低(P<0.05),静态骨组织形态学分析表明突变鼠松质骨减少,皮质骨变薄,骨小梁数量减少(P<0.05);Smad4突变鼠成骨细胞标志基因表达量显著降低,成骨细胞的数量明显减少(P<0.05);RANKL作为破骨吸收标志物表达上调、作为其拮抗剂的OPG表达量下调,RANKL/OPG比率增高(P<0.05)。结论 Smad4基因通过促进成骨分化维持骨稳态。 展开更多
关键词 骨细胞 SMAD4 成骨分化 骨稳态
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过表达Notch配体Delta-like基因的MLO-Y4骨细胞株的建立及其对骨髓基质细胞成骨分化的作用 被引量:4
12
作者 冯玮 谢正松 +1 位作者 罗岑 小林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期899-907,共9页
目的建立稳定表达外源Dll1、Dll3、Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株,研究骨细胞Notch信号Delta-like配体Dll1、Dll3、Dll4对骨髓基质细胞成骨分化的影响。方法用过表达Dll1、Dll3、Dll4基因的重组慢病毒液感染MLO-Y4样骨细胞,嘌呤霉素筛选分... 目的建立稳定表达外源Dll1、Dll3、Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株,研究骨细胞Notch信号Delta-like配体Dll1、Dll3、Dll4对骨髓基质细胞成骨分化的影响。方法用过表达Dll1、Dll3、Dll4基因的重组慢病毒液感染MLO-Y4样骨细胞,嘌呤霉素筛选分别稳定表达Dll1、Dll3及Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株。采用实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative,qPCR)对筛选出来的MLO-Y4骨细胞株中Dll1、Dll3及Dll4基因的表达进行鉴定。将3种细胞株分别与野生型小鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)进行共培养,采用碱性磷酸酶(ALP)染色及ALP定量检测共培养3 d ALP活性变化;qPCR检测共培养3 d成骨相关标志基因及Notch信号靶基因的表达水平,在使用Notch信号抑制剂DAPT后检测上述指标。结果与阴性对照组相比,Dll1、Dll3及Dll4转染组中Dll1、Dll3及Dll4 mRNA的水平显著增加(P<0.05)。共培养3 d后,骨细胞中Dll4基因的过表达促进了BMSC的ALP活性,与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.05)。qPCR结果显示,MLO-Y4-Dll4组的ALP、Runx2、OPN及CollagenⅠ成骨相关标志基因的表达均有所升高(P<0.05),Notch信号靶基因Hey1、HeyL、Hes1及Hes7的表达也有所升高(P<0.05)。而在加入DAPT后,MLO-Y4-Dll4组的ALP活性下降,成骨相关标志基因及Notch信号靶基因的表达有所下降(P<0.05)。结论建立了稳定表达外源Dll1、Dll3或Dll4基因的MLO-Y4骨细胞株,在骨细胞中过表达Dll4能促进骨髓基质细胞的早期成骨分化,经典Notch信号通路在其中可能发挥了重要作用。 展开更多
关键词 慢病毒 Delta-like基因 过表达 小鼠骨样细胞 骨髓基质细胞 成骨分化 DAPT
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全反式维甲酸与VEGF联合应用诱导小鼠胚胎成纤维细胞定向成骨分化 被引量:4
13
作者 冯玮 小林 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期246-255,共10页
目的研究全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)与VEGF联合应用对于小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)定向成骨分化的影响。方法取NIH孕鼠(孕12~15 d)子宫内的胎鼠,去掉头、心、肝等器官后,采用胰蛋白酶消化... 目的研究全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)与VEGF联合应用对于小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)定向成骨分化的影响。方法取NIH孕鼠(孕12~15 d)子宫内的胎鼠,去掉头、心、肝等器官后,采用胰蛋白酶消化贴壁法分离培养MEFs。利用HEK-293细胞采用反复冻融法扩增重组腺病毒红色荧光蛋白(recombinant adenovirus-red fluorescent protein,Ad-RFP)及Ad-VEGF。采用ALP染色和ALP定量检测法检测单独ATRA或VEGF以及ATRA和VEGF联合应用培养MEFs第3、5天ALP活性变化。将第3~4代MEFs分为A、B、C、D 4组,分别加入DMSO+Ad-RFP、ATRA、Ad-VEGF、ATRA+Ad-VEGF。实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)检测第3、7天成骨相关标志物ALP、Ⅰ型胶原、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)及成血管相关标志物VEGF、血管生成素1(angiopoietin 1,ANGPT1)、内皮黏蛋白(endomucin,EMCN)mRNA表达;免疫组织化学染色检测各组第3、5、7天OPN、VEGF蛋白表达;茜素红染色检测各组成骨诱导14、21 d钙盐沉积水平。取15只4~6周龄无胸腺雌性裸鼠,随机分为3组,每组5只,分别于背侧与腹侧皮下注射经ATRA、Ad-VEGF、ATRA+Ad-VEGF处理后的MEFs。植入后5周行X线片观察、大体观察及组织学染色(Masson、HE及番红O-固绿染色),观察各组裸鼠体内异位成骨情况。结果成功分离培养MEFs;扩增后的Ad-RFP及Ad-VEGF成功转染MEFs,转染效率约为50%和20%。ALP活性检测示,单独使用ATRA或VEGF均能增强MEFs中ALP活性,且ATRA作用较VEGF强;ATRA和VEGF联合使用较单独使用显著增强了MEFs中ALP活性(P<0.05)。qRT-PCR检测示,ATRA联合Ad-VEGF使用上调了早期成骨分化相关标志物ALP、OPN、Ⅰ型胶原mRNA相对表达量(P<0.05);7 d时成血管相关标志物VEGF、EMCN及ANGPT1 mRNA相对表达量有所上升(P<0.05)。免疫组织化学染色示,ATRA联合Ad-VEGF不仅增强了OPN蛋白表达,VEGF蛋白表达在第7天也有所� 展开更多
关键词 全反式维甲酸 VEGF 小鼠胚胎成纤维细胞 成骨分化 成血管
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骨再生修复中的骨形态发生蛋白信号通路:精准调节与治疗靶点 被引量:4
14
作者 刘俊银 冯玮 +4 位作者 谢映春 李豫皖 曾继涛 刘子铭 小林 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第4期606-612,共7页
背景:骨的修复再生是治疗骨类疾病的难点,骨形态发生蛋白具有强大的调控骨量的功能,是调控骨稳态及骨再生的重要蛋白分子。目的:对骨形态发生蛋白信号通路在骨再生修复中的研究进展进行综述。方法:以"骨形态发生蛋白,Smad分子,组... 背景:骨的修复再生是治疗骨类疾病的难点,骨形态发生蛋白具有强大的调控骨量的功能,是调控骨稳态及骨再生的重要蛋白分子。目的:对骨形态发生蛋白信号通路在骨再生修复中的研究进展进行综述。方法:以"骨形态发生蛋白,Smad分子,组织工程,骨缺损,骨修复,骨类疾病,研究进展,bone morphogenetic protein,Smads,Tissue engineering,Bone defect,bone repair,bone disease,Progress in research"为关键词,检索CNKI、PubMed、Elsevier ScienceDirect、Web of Science等数据库1990至2018年发表的与骨形态发生蛋白信号通路及骨再生修复中相关的文献,将所有文章进行初筛后,对保留的文献进一步的归纳和总结分析。结果与讨论:骨形态发生蛋白分子在长骨、软骨、关节以及肌腱的生长发育中均发挥着重要的作用,骨形态发生蛋白2、7已投入临床上应用,用来治疗骨折不愈合、延迟愈合骨不连以及脊柱融合手术等,但骨形态发生蛋白对于骨再生修复中的强大的调控功能仍然值得进行更深一步的研究。骨形态发生蛋白及其相关分子在促进骨再生中取得了巨大进展,实现对骨形态发生蛋白信号的精准调节可能成为治疗骨类疾病的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白质类 信号传导 组织工程 骨缺损 骨修复 骨稳态 软骨再生 骨形态发生蛋白 BMP 骨不连 骨迟连
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MLO-Y4来源外泌体对破骨细胞调控机制的研究
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作者 赵丽洲 勾蓉 +1 位作者 王晨 小林 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1255-1260,共6页
目的探讨骨细胞系MLO-Y4来源的外泌体对破骨细胞的调控机制。方法收集MLO-Y4细胞的培养基,通过超高速离心法获得MLO-Y4细胞外泌体(MLO-Y4-Exo),Western blot和透射电镜鉴定其特征;MLO-Y4-Exo与骨髓巨噬细胞共培养,TRAP染色检测其对破骨... 目的探讨骨细胞系MLO-Y4来源的外泌体对破骨细胞的调控机制。方法收集MLO-Y4细胞的培养基,通过超高速离心法获得MLO-Y4细胞外泌体(MLO-Y4-Exo),Western blot和透射电镜鉴定其特征;MLO-Y4-Exo与骨髓巨噬细胞共培养,TRAP染色检测其对破骨细胞分化的作用;小鼠顶骨皮下注射MLO-Y4-Exo检测其对体内破骨细胞分化的影响;通过小干扰RNA检测MLO-Y4-Exo对促破骨分化的机制。结果MLO-Y4外泌体大小形态满足外泌体特征,高表达CD63和Alix外泌体蛋白;MLO-Y4-Exo在体外和体内均促进破骨细胞分化(P<0.05);RANKL小干扰RNA实验证实MLO-Y4-Exo通过向破骨前体细胞传递RANKL蛋白促进破骨细胞分化(P<0.05)。结论骨细胞系MLO-Y4来源的外泌体通过向破骨前体细胞传递促破骨分化因子RANKL促进破骨细胞生成。 展开更多
关键词 MLOY-4 外泌体 破骨细胞 RANKL
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(NaPO_3)_n对过共晶Al-Si合金初晶硅细化的研究 被引量:1
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作者 小林 吴树森 吴广忠 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期13-16,共4页
研究了 (Na PO3) n 对 Al- 2 2 % Si过共晶合金初晶硅的晶粒细化作用。结果表明 ,(Na PO3) n对初晶硅的细化效果优于 Cu P,同时 (Na PO3) n 具有共晶硅变质的作用。采用 (Na PO3) n 处理的 Al- 2 2 % Si- 1.0 % Cu- 0 .5 % Mg- 0 .5 % M... 研究了 (Na PO3) n 对 Al- 2 2 % Si过共晶合金初晶硅的晶粒细化作用。结果表明 ,(Na PO3) n对初晶硅的细化效果优于 Cu P,同时 (Na PO3) n 具有共晶硅变质的作用。采用 (Na PO3) n 处理的 Al- 2 2 % Si- 1.0 % Cu- 0 .5 % Mg- 0 .5 % Mn合金的平均抗拉强度可达 2 73MPa。以扫描电镜、电子探针为检测手段研究了 P元素对过共晶 Al- Si合金的 Si晶体的影响。结果表明 ,一方面 Al P作为异质核心细化初晶硅 ,另一方面 ,有 Na同时存在时 ,P的扩散受阻 ,P元素在 Si相生长表面富集 ,阻碍了 Si相生长 ,细化了初晶硅。 展开更多
关键词 过共晶Al—Si合金 生长机理 晶粒细化 变质
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体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞成骨分化的影响 被引量:3
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作者 谢映春 小林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期891-898,共8页
目的探究体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化的影响。方法设置Cre重组腺病毒(Ad-Cre)及对照腺病毒GFP(Ad-GFP),分别转染RosaNotch小鼠骨细胞后与野生C57BL/6小鼠BMSCs共培养为Ad-Cre组及A... 目的探究体外激活骨细胞Notch信号对骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化的影响。方法设置Cre重组腺病毒(Ad-Cre)及对照腺病毒GFP(Ad-GFP),分别转染RosaNotch小鼠骨细胞后与野生C57BL/6小鼠BMSCs共培养为Ad-Cre组及Ad-GFP组,设置仅BMSCs为Blank组。碱性磷酸酶染色及生化定量测定碱性磷酸酶(ALP);qPCR检测转染后骨细胞Notch信号靶基因及共培养产物成骨相关标志物、Notch信号配体及成血管相关标志物,茜素红染色检测成骨诱导21 d钙盐沉积水平。结果Ad-Cre成功激活RosaNotch小鼠骨细胞Notch信号,ALP染色及生化定量结果显示Ad-Cre组ALP表达相较Ad-GFP组及Blank组显著降低(P<0.05),Ad-GFP组与Blank组间无统计学差异;qPCR结果显示Ad-Cre组共培养产物成骨标志物ALP、核心结合因子a1(Runx2)、特异性骨转化因子(Ostrix)及Notch配体Dll4 mRNA转录水平相较Ad-GFP组及Blank组显著降低(P<0.05),Jag1 mRNA转录水平显著降低(P<0.05);血管内皮生长因子(VEGF)、低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor 1α,HIF1α)、血小板内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31/PECAM-1)及内皮粘蛋白(endomucin,EMCN)mRNA转录水平相较Ad-GFP组及Blank组显著增高(P<0.05);茜素红染色结果显示Ad-Cre组在成骨诱导培养基作用21 d后钙盐沉积水平相较Ad-GFP组及Blank组显著降低。结论体外激活骨细胞Notch信号抑制骨髓基质细胞成骨分化。 展开更多
关键词 骨细胞 NOTCH信号 骨髓基质细胞 成骨分化
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龙凤山和瓦里关臭氧总量异常变化与天气过程关系研究 被引量:3
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作者 小林 郑向东 赵春生 《北京大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第4期725-734,共10页
通过对黑龙江龙凤山和青海瓦里关Brewer地基臭氧总量的长期观测资料以及与观测时段对应的全球NCEP R1系列位势高度再分析资料的统计分析发现,龙凤山和瓦里关臭氧总量观测值有时存在剧烈的逐日变化,对这种异常变化进行定量分析,并对其与... 通过对黑龙江龙凤山和青海瓦里关Brewer地基臭氧总量的长期观测资料以及与观测时段对应的全球NCEP R1系列位势高度再分析资料的统计分析发现,龙凤山和瓦里关臭氧总量观测值有时存在剧烈的逐日变化,对这种异常变化进行定量分析,并对其与对流层天气过程的关系进行研究,发现两者之间存在良好的对应关系。臭氧总量的异常变化大多数出现在11月至次年5月的冬、春季节,并且臭氧总量的异常升高(第一类异值点)总是伴随着平流层低层(250-70 h Pa)的槽线和地面(1000 h Pa)的低压中心后方的天气形势,而臭氧总量的异常降低(第二类异值点)则时常伴随平流层低层的脊线和地面的高压中心后方的天气形势,这表明臭氧总量的异常变化可以作为地面天气系统转变的一个信号。 展开更多
关键词 臭氧总量 异值点 天气过程 对应关系
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FSHβ在BMP9诱导间充质干细胞成骨分化中的作用研究 被引量:3
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作者 成亚琳 曾继涛 +3 位作者 黄敏 刘俊银 小林 刘宏 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期775-782,共8页
目的探讨卵泡刺激素β亚基(follicle-stimulating hormoneβ-subunit,FSHβ)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化中的作用及可能的机制。方法利用细胞化学染... 目的探讨卵泡刺激素β亚基(follicle-stimulating hormoneβ-subunit,FSHβ)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化中的作用及可能的机制。方法利用细胞化学染色方法检测处理因素(重组腺病毒或γ促分泌酶抑制剂DAPT)作用于间充质干细胞5 d后细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色的变化。通过实时定量PCR(quantitative real-time PCR,Q-PCR)检测BMP9 mRNA、FSHβmRNA和Notch信号通路靶基因(Hey1) mRNA的表达水平。利用茜素红S(alizarin red S,ARS)染色检测腺病毒感染间充质干细胞21 d后细胞中钙盐的沉积情况。结果 FSHβ处理组ALP表达较GFP对照组无明显改变,BMP9处理组ALP表达较GFP对照组明显增加,而BMP9与FSHβ联合处理组ALP表达较BMP9处理组显著增加。另外,BMP9处理组晚期成骨标志物钙盐结节、Notch信号靶基因Hey1 mRNA表达水平较GFP对照组显著增加(P<0.01),而BMP9与FSHβ联合处理组较BMP9处理组表达显著增加(P<0.01)。使用药物DAPT抑制Notch信号后,BMP9与DAPT联合处理组较BMP9单独处理组,ALP染色、Hey1 mRNA表达显著降低(P<0.05);且BMP9+FSHβ+DAPT联合处理组较BMP9+FSHβ联合处理组ALP染色、Hey1 mRNA表达也显著降低(P<0.05)。结论 FSHβ可增强BMP9诱导的间充质干细胞成骨分化,Notch信号通路可能在其中发挥重要作用。 展开更多
关键词 骨形态蛋白9 卵泡刺激素 间充质干细胞 NOTCH DAPT
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乳胶凝集试验检测罗氏沼虾越冬亲虾暴发性病病原莫格球拟酵母 被引量:2
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作者 小林 杨勇 孙其焕 《上海水产大学学报》 CSCD 1996年第3期201-204,共4页
关键词 罗氏沼虾 亲虾 莫格球拟酵母 抗血清 免疫检测
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