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VX765对大鼠骨关节炎和软骨细胞炎症的作用
1
作者 黄婉然 涂君雪 +1 位作者 乔爱卿 何储君 《中国修复重建外科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期74-81,共8页
目的研究VX765对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)和软骨细胞炎症的影响及其作用机制。方法分离4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测不同浓度(0、1、5、10、20、50、100μmol/L... 目的研究VX765对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)和软骨细胞炎症的影响及其作用机制。方法分离4周龄SD大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测不同浓度(0、1、5、10、20、50、100μmol/L)VX765对大鼠软骨细胞活性的影响;体外构建脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导细胞炎症模型,将细胞分为对照组、LPS组、无明显细胞毒性VX765浓度1组和VX765浓度2组,行Western blot、实时荧光定量PCR和ELISA检测炎症因子TGF-β1、IL-6和TNF-α表达水平,Western blot和免疫荧光染色检测核因子E2相关的转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和血红素氧化酶1(heme oxygenase 1,HO-1)表达。将32只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、OA组(B组)、OA+VX765(50 mg/kg)组(C组)和OA+VX765(100 mg/kg)组(D组),每组8只。A组仅行膝关节前内侧切口,B~D组在A组基础上横切内侧副韧带和前交叉韧带,并切除内侧半月板;术后1周,C、D组分别灌胃给药50 mg/kg和100 mg/kg VX765,A、B组给予等量生理盐水灌胃。通过HE及番红固绿染色行组织病理学检查,并通过Mankin评分进行评估;采用免疫组织化学染色技术分析基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)和Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果CCK-8法检测示VX765浓度高于10μmol/L后细胞活力显著降低(P<0.05),选择无明显细胞毒性的4μmol/L和8μmol/L VX765进行后续实验。LPS诱导后细胞中的TGF-β1、IL-6和TNF-α表达显著高于对照组(P<0.05),而在4μmol/L和8μmol/L VX765干预后表达较LPS组显著下降(P<0.05)。Western blot和免疫荧光染色检测示VX765显著上调Nrf2通路相关分子Nrf2和HO-1的蛋白表达(P<0.05),激活Nrf2通路。大鼠膝关节组织病理学检查和免疫组织化学染色示,与B组相比,C、D组VX765处理改善了大鼠OA中关节结构损伤,减轻了炎症反应,下调MMP-13表达,增加Ⅱ型胶原蛋白的表达。结论VX765可改善� 展开更多
关键词 VX765 核因子E2相关的转录因子2通路 骨关节炎 软骨细胞 大鼠
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五味子乙素对内毒素诱导脓毒症模型的抗炎作用及机制研究 被引量：5
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作者 涂君雪 郑毅 +2 位作者 何储君 黄婉然 何媚媚 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第8期1920-1924,共5页
目的:探讨五味子乙素对内毒素(LPS)诱导的脓毒症模型的抗炎作用及机制。方法:将浓度为0~16μmol/L不等的五味子乙素预处理RAW 264.7细胞1 h后,1μg/mL LPS诱导脓毒症,分为模型组(单用LPS)及不同浓度(2、4、8、16μmol/L)五味子乙素组。G... 目的:探讨五味子乙素对内毒素(LPS)诱导的脓毒症模型的抗炎作用及机制。方法:将浓度为0~16μmol/L不等的五味子乙素预处理RAW 264.7细胞1 h后,1μg/mL LPS诱导脓毒症,分为模型组(单用LPS)及不同浓度(2、4、8、16μmol/L)五味子乙素组。Griess法测定一氧化氮(NO)水平,MTT法测定细胞存活率,实时PCR法测定细胞TLR4/NF-κB/MyD88通路的mRNA表达。并考察五味子乙素对注射LPS小鼠生存率及血清IL-1β、TNF-α含量的影响。结果:五味子乙素可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞分泌PGE2、NO、IL-1β、TNF-α、IL-6、HMGB1,下调MyD88、TLR4 mRNA及蛋白的表达,降低LPS激活的RAW 264.7细胞中MAPKs的磷酸化,并能提高LPS作用下小鼠存活率和降低小鼠血清IL-1β、TNF-α的含量。结论:五味子乙素对LPS诱导的炎症和脓毒症具有抗炎作用,其通过TLR4/NF-κB/MyD88信号通路防治内毒素诱导的脓毒症,可能是一种新型的抗炎和免疫抑制药。 展开更多
关键词 五味子乙素 脓毒症 抗炎 TLR4/NF-κB/MyD88信号通路
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槲皮素对17α-乙炔雌二醇诱导胆汁淤积的肝保护作用研究 被引量：5
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作者 涂君雪 黄婉然 +1 位作者 何储君 郑毅 《浙江医学》 CAS 2020年第17期1802-1808,共7页
目的探讨槲皮素(Que)对17α-乙炔雌二醇(EE)诱导胆汁淤积的肝保护作用及可能机制。方法采用随机数字表法将SD大鼠分为对照组、模型组、给药组(Que 50 mg/kg组和Que 100 mg/kg组),每组8只。模型组及给药组连续5 d皮下注射5 mg/kg EE造模... 目的探讨槲皮素(Que)对17α-乙炔雌二醇(EE)诱导胆汁淤积的肝保护作用及可能机制。方法采用随机数字表法将SD大鼠分为对照组、模型组、给药组(Que 50 mg/kg组和Que 100 mg/kg组),每组8只。模型组及给药组连续5 d皮下注射5 mg/kg EE造模,对照组皮下注射EE溶剂丙二醇。Que 50 mg/kg组和Que 100 mg/kg组分别予50 mg/kg和100 mg/kg Que(溶于0.5%羧甲基纤维素钠溶液)灌胃,对照组及模型组予Que溶剂0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃。采用HE染色和血清生化指标评价大鼠肝损伤情况,按照胆汁酸测定试剂盒测定血清与肝脏中胆汁酸水平;眼科剪顺着胆管方向剪一个小口,收集1 h内的胆汁酸,并计算胆汁流量;RT-qPCR测定胆汁酸摄取转运体、外排转运体、胆汁酸合成酶及代谢酶mRNA表达情况。结果与模型组相比,Que显著减轻EE诱导的胆汁淤积肝损伤,减轻大鼠血清AST、ALT和ALP水平(均P<0.05),增加大鼠胆汁流量(均P<0.01),降低血清及肝脏胆汁酸水平(均P<0.05),显著增加外排转运体胆汁酸盐输出泵、多药耐药相关蛋白(MRP)2、MRP3、MRP4和胆汁酸代谢酶细胞色素P450酶(CYP)3A2、CYP2B10、硫酸基转移酶2A1的表达(均P<0.05),显著抑制胆汁酸摄取转运体钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白和胆汁酸合成酶CYP7A1和CYP8B1表达(均P<0.05)。结论Que可通过调节胆汁酸转运体与酶的表达缓解肝脏胆汁酸累积,从而发挥保肝利胆的功效。 展开更多
关键词 肝损伤 肝内胆汁淤积 槲皮素 17α-乙炔雌二醇
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omega-3脂肪酸在围绝经期焦虑样小鼠中的抗焦虑作用及机制 被引量：5
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作者 何储君 涂君雪 +1 位作者 黄婉然 鲍仕慧 《温州医科大学学报》 CAS 2020年第1期45-50,55,共7页
目的:分析omega-3脂肪酸(n-3 PUFA)改善围绝经期焦虑样小鼠的焦虑行为作用并探讨其可能机制。方法:采用小鼠双侧卵巢摘除恢复1周后,进行慢性不可预知性应激的方法来制作围绝经期焦虑样小鼠模型。持续给予n-3 PUFA(10、20、60 mg/kg)14 ... 目的:分析omega-3脂肪酸(n-3 PUFA)改善围绝经期焦虑样小鼠的焦虑行为作用并探讨其可能机制。方法:采用小鼠双侧卵巢摘除恢复1周后,进行慢性不可预知性应激的方法来制作围绝经期焦虑样小鼠模型。持续给予n-3 PUFA(10、20、60 mg/kg)14 d后通过大理石掩埋实验和高架十字迷宫实验验证其焦虑样行为。利用HPLC方法检测5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、二羟基苯乙酸(Dopac)神经递质及其代谢产物的含量来研究n-3 PUFA抗焦虑的相关机制。结果:持续给予围绝经期焦虑样小鼠n-3 PUFA(20、60 mg/kg)治疗后,有效地降低模型小鼠大理石掩埋的数量(P<0.05);n-3 PUFA(20、60 mg/kg)治疗显著地增加模型小鼠高架十字迷宫进入开臂的次数和时间(P<0.05)。HPLC检测结果显示,持续给予围绝经期焦虑样小鼠n-3 PUFA(20、60 mg/kg)治疗,明显升高前额叶皮层中5-HT、NE、DA的水平,降低5-HIAA/5-HT水平(P<0.05);持续给予围绝经期焦虑样小鼠n-3 PUFA(20、60 mg/kg)显著增加海马中5-HT、NE表达,减少5-HIAA/5-HT含量;提升下丘脑中5-HT、NE的含量(P<0.05)。结论:n-3 PUFA通过调节海马、前额叶皮层和下丘脑中的神经递质及其代谢产物含量改善围绝经期焦虑样小鼠的焦虑样行为。 展开更多
关键词 omega-3不饱和脂肪酸 围绝经期 焦虑症 神经递质 小鼠
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