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热休克诱导鳙鱼四倍体的研究 被引量：21
1
作者 洪云汉 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1990年第1期70-75,共6页
采用热休克法研究了诱导鳙鱼四倍体的可能性和处理条件。结果表明:1)恰好在卵子开始第一次卵裂前用39—42℃水浴处理1—3分钟,可获得较高频率的四倍体;2)开始处理的时间至关重要,提前或推迟处理导致几乎全部死亡或四倍体频率大大下阵;3... 采用热休克法研究了诱导鳙鱼四倍体的可能性和处理条件。结果表明:1)恰好在卵子开始第一次卵裂前用39—42℃水浴处理1—3分钟,可获得较高频率的四倍体;2)开始处理的时间至关重要,提前或推迟处理导致几乎全部死亡或四倍体频率大大下阵;3)热休克组的孵化率显著下降,畸形率明显升高;4)含高频率四倍体的热休克组的细胞分裂和胚胎发育延迟。 展开更多
关键词 鳙鱼 四倍体 热休克 诱导
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鱼类单个胚胎染色体标本的快速制备法 被引量：24
2
作者 洪云汉 《淡水渔业》 1987年第1期35-36,共2页
目前，制备鱼类染色体标本的方法主要是空气干燥法。这种方法虽然可以获得较多的良好中期分裂相而有利于进行精细的分析鉴定，但它在收集细胞时需要反复离心换液才能获得理想的标本，因而此法费时较长，丢失细胞严重（如很多细胞粘附在... 目前，制备鱼类染色体标本的方法主要是空气干燥法。这种方法虽然可以获得较多的良好中期分裂相而有利于进行精细的分析鉴定，但它在收集细胞时需要反复离心换液才能获得理想的标本，因而此法费时较长，丢失细胞严重（如很多细胞粘附在离心管壁和吸管壁上）。 展开更多
关键词 鱼类 胚胎 染色体 标本 制备 生物工程 渔业
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鱼类生殖细胞 被引量：14
3
作者 徐红艳 李名友 +1 位作者 桂建芳 洪云汉 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第2期124-138,共15页
鱼类和其他大多数动物一样,胚胎发育产生两大细胞系,一个是生殖细胞系或种质系,另一个是体细胞系.生殖细胞系和体细胞系的分离发生在胚胎发育的早期,其标志是形成生殖细胞系的祖细胞,即原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs).PGC形... 鱼类和其他大多数动物一样,胚胎发育产生两大细胞系,一个是生殖细胞系或种质系,另一个是体细胞系.生殖细胞系和体细胞系的分离发生在胚胎发育的早期,其标志是形成生殖细胞系的祖细胞,即原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs).PGC形成后从其"出生地"进行"长途跋涉"迁移到性原基,成为性原细胞,即卵原细胞和精原细胞;随后在经过配子生成的一系列发育过程后,最终产生成熟的配子——卵子和精子.生殖细胞发育的每个步骤都可能都可能影响生物个体的生殖能力或育性.巨大的生物学意义及其令人振奋的研究进展,使"生殖细胞"日益成为科学研究的热点,且作为特别议题出现在Science杂志2007年4月20日第5823期的封面上.近10年见证了对生殖细胞的认知的长足进步,这些都得益于对青鳉和斑马鱼等模式生物的研究.生殖细胞已能被准确地标记且分离以进行体外培养及移植,这为濒临绝种的动物借助近缘物种进行生殖繁衍提供了技术基础,譬如最近就有人成功地"借鲑鱼之腹"获得了虹鳟后代.另外,单倍体细胞体外培养已获成功,如最近有研究人员获得了青鳉鱼单倍体胚胎干细胞,而且把这种细胞的核移植到正常的卵子中,其能像正常精子授精一样发育并产生可育的子代.这种鱼其实最初是由嵌合卵发育而成,也就是由正常减数分裂生成的单倍体卵母细胞核和植入的体外培养的有丝分裂单倍体细胞核组成的卵.这种繁殖技术也被称作半克隆技术.这条首次获得的半克隆青鳉鱼被命名为"霍莉"(Holly).总之,本文将从基础研究和繁殖技术两方面,就生物界对鱼类生殖细胞研究和操作现状及未来研究方向进行小结与探讨. 展开更多
关键词 鱼类 生殖细胞 生殖质 生殖 繁殖技术 半克隆技术
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用模式生物青鳉概观硬骨鱼性别决定及性分化研究进展 被引量：10
4
作者 亢逸 关桂君 洪云汉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期441-454,共14页
鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。性腺的雌雄性分化过程受遗传和环境因素(如温度、光照、激素和p H值等)影响,具有可逆可塑性。随着生物技术和基因组学的迅速发展,近年来脊椎动物性别决定和性分化的研究有了重... 鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。性腺的雌雄性分化过程受遗传和环境因素(如温度、光照、激素和p H值等)影响,具有可逆可塑性。随着生物技术和基因组学的迅速发展,近年来脊椎动物性别决定和性分化的研究有了重大进展和显著突破。本文通过聚焦青鳉及其他硬骨鱼纲保守存在的dmrt1、gsdf、amh等雄性因子,探讨硬骨鱼普遍存在的雌雄性别可塑可逆信号通路,并介绍了新的基因组编辑和性控育种技术,为单性选育等水产养殖技术的研发提供参考。 展开更多
关键词 青鳉 性别决定 性分化
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银鲫种系细胞标记分子Vasa:cDNA克隆及其抗体制备(英文) 被引量：4
5
作者 徐红艳 彭金霞 +1 位作者 桂建芳 洪云汉 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期732-742,共11页
种系细胞始自胚胎发育早期,是动物生殖及生殖工程的基础。为研究鱼类的种系细胞提供标记分子,我们克隆并鉴定了银鲫的vasacDNA即Cagvasa。CagvasacDNA全长2771碱基(nt),编码的蛋白为银鲫Vasa即CagVasa,全长701个氨基酸(aa)。CagVasa蛋... 种系细胞始自胚胎发育早期,是动物生殖及生殖工程的基础。为研究鱼类的种系细胞提供标记分子,我们克隆并鉴定了银鲫的vasacDNA即Cagvasa。CagvasacDNA全长2771碱基(nt),编码的蛋白为银鲫Vasa即CagVasa,全长701个氨基酸(aa)。CagVasa蛋白与已知Vasa蛋白的结构特征一致:在N端有14个RGG重复序列,在C端Vasa所特有的8个功能域俱全。银鲫Vasa与鲤鱼、斑马鱼、陆生脊椎动物和果蝇的Vasa蛋白分别有95%,89%,61%-66%和50%的同源性。卵巢切片的RNA原位杂交揭示,Cagvasa限于种系细胞,且表达水平呈现出低-高-低的动态变化:即两头低(卵原细胞跟Ⅳ期成熟卵子),中间高(Ⅱ-Ⅲ期卵子)。为分析鱼类种系细胞提供手段,我们用310aa的N端序列产生细菌的重组蛋白来免疫大白兔,获得了抗Vasa的多克隆抗体αVasa。Western免疫印迹表明,αVasa特异性地识别一个鱼类性腺的蛋白,该蛋白的分子量为75kD,仅见于银鲫的性腺和卵子。卵巢切片的组织免疫荧光共聚焦显微分析表明,抗体αVasa只对种系细胞染色:卵原细胞着色最深,卵母细胞和早期的卵子都浓染,成熟卵则浅染。类似情况亦见之于精子发生早期阶段的雄性种系细胞。卵巢和精巢的体细胞则不着色。因此,Cagvasa编码的当是Vasa同源蛋白,为银鲫种系细胞的第一个标记分子。我们的研究表明,抗体αVasa染色灵敏度高,特异性好。 展开更多
关键词 银鲫 种系细胞 卵巢 精巢 VASA CDNA克隆 细胞标记 抗体制备 分子量 种系
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长鳍吻鮈的核型 被引量：4
6
作者 洪云汉 《淡水渔业》 1987年第6期17-18,共2页
鲍亚科(Gobioninae)吻鮈属(Rhinogobio)鱼类在我国共有4种，作者报道过该属吻鮈和圆简吻鮈的核型。本文报道长鳍吻鲍(Rhinogobio ventralis Sauvage et Dabry)的核型。
关键词 长鳍吻鲍 核型
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鱼类的胚胎干细胞(英文) 被引量：6
7
作者 洪云汉 桂建芳 +2 位作者 陈松林 邓娇蓉 Manfred SCHARTL 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期281-294,共14页
胚胎干细胞 (ES)是未分化的细胞培养物 ,来自动物的早期胚胎。它们能成为稳定的细胞系和长期冻存。在适当的条件下 ,ES细胞能分化成各种细胞类型 ,包括生殖细胞。这样 ,ES细胞就提供了一个有效的纽带 ,将动物基因组的体外和体内遗传操... 胚胎干细胞 (ES)是未分化的细胞培养物 ,来自动物的早期胚胎。它们能成为稳定的细胞系和长期冻存。在适当的条件下 ,ES细胞能分化成各种细胞类型 ,包括生殖细胞。这样 ,ES细胞就提供了一个有效的纽带 ,将动物基因组的体外和体内遗传操作连系起来。ES细胞的魅力就由其在产生和分析基因敲除老鼠中显现出来。目前 ,ES细胞技术仅见之老鼠 ,因其它脊椎动物的ES细胞的培养和建系难获成功。在鱼类 ,人们已做了大量的尝试。我们以青 (Oryziaslatipes)作为建立鱼类ES细胞技术的模式 ,通过建立并应用无滋养层细胞的培养条件 ,获得了来自中期囊胚的ES细胞系。青的ES细胞和老鼠的ES细胞有很多共同特征 ,如二倍体核型、分化潜力和形成嵌合体。因此 ,在鱼类建立和应用ES细胞技术是可能的。青ES细胞的培养条件已成功地应用到其它鱼类如斑马鱼甚至海水鱼。本文旨在以青为模式 ,综述获得和应用模式鱼和经济鱼ES细胞的主要进展和前景 [动物学报 49( 3) :2 81～ 2 94,2 0 0 3]。 展开更多
关键词 鱼类 胚胎干细胞 细胞分化 细胞培养 动物克隆 基因打靶
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青鳉干细胞及其应用 被引量：4
8
作者 易梅生 洪旎 +4 位作者 李振东 严彦 王丹科 赵浩斌 洪云汉 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2010年第2期115-123,共9页
干细胞广泛存在于多细胞生物的早期胚胎和成体组织中.干细胞的多能性和易操作性使其在发育生物学和再生医学上具有巨大的研究和应用价值,如细胞发育潜能的调控、细胞命运的决定、细胞治疗等.干细胞培养是研究干细胞研究工作的基础,主要... 干细胞广泛存在于多细胞生物的早期胚胎和成体组织中.干细胞的多能性和易操作性使其在发育生物学和再生医学上具有巨大的研究和应用价值,如细胞发育潜能的调控、细胞命运的决定、细胞治疗等.干细胞培养是研究干细胞研究工作的基础,主要集中在小鼠、人和青鳉这3种脊椎动物上.青鳉是一种小型淡水鱼,常被用作发育生物学和生物医学研究的模式物种.本文将主要介绍青鳉干细胞系及其应用.青鳉的MES1是除小鼠以外的第一个胚干细胞系;SG3是第一个成体精原干细胞系,可以在体外形成具有运动能力的精子;HX1是首个单倍体胚干细胞系,通过核移植技术,将该单倍体细胞的细胞核移植到未受精卵细胞中,得到第一个可育的半克隆动物霍利.这些突破使青鳉毫无疑问地成为干细胞研究的理想模式. 展开更多
关键词 青鳉 干细胞 多能性 嵌合体 核移植 半克隆
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