miR-203下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化 被引量：4

1

作者 李登 沙明磊 +2 位作者 陈磊 赵圣 邵怡 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第17期3201-3208,共8页

目的:验证miR-203通过与TLR4 mRNA的3'-UTR特异性结合下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化。方法:通过miRanda软件预测TLR4 mRNA 3'-UTR存在mi R-203结合位点。根据TLR4 mRNA 3'-UTR序列设计目的基因片段以... 目的:验证miR-203通过与TLR4 mRNA的3'-UTR特异性结合下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化。方法:通过miRanda软件预测TLR4 mRNA 3'-UTR存在mi R-203结合位点。根据TLR4 mRNA 3'-UTR序列设计目的基因片段以及突变型目的基因片段,以pmirGLO为载体构建双荧光素酶报告基因野生型载体(pmirGLO-TLR4 3'-UTR)及其突变型载体(pmirGLO-mut-TLR4 3'-UTR)。将293T细胞共转染pmirGLO-TLR4 3'-UTR质粒或pmirGLO-mut-TLR4 3'-UTR质粒及mmu-mi R-203-3p mimics或mimic NC,通过双荧光素酶报告基因系统验证mi R-203可以与TLR4 m RNA的3'-UTR特异性结合,通过Real-time PCR及Western blot验证小鼠巨噬细胞RAW264.7转染了mmu-miR-203-3p mimics、mimic NC后,M1型巨噬细胞markers (i NOS, TNF-α, CCL-3, IL-23),M2型巨噬细胞markers (Arg-1, CX3CR1, IL-4, MRC, IL-10, Ym-1)及TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。使用TLR4抑制剂TAK-242抑制小鼠巨噬细胞TLR4-Myd88-NF-κB信号通路后,转染mmu-miR-203-3p mimics、mimic NC,再次检测M1,M2型巨噬细胞markers及TLR4-Myd88-NF-κB信号通路的表达。结果:双荧光素酶报告基因系统显示293T细胞转染了pmirGLO-TLR4 3'-UTR质粒及mmu-miR-203-3p mimics后,其相对荧光素酶活性△CT较转染了pmirGLO-mut-TLR4 3'-UTR质粒或者mimic NC均有显著降低,其差异达到统计学意义(P<0.05)。Real-time PCR及Western blot显示转染了mmu-miR-203-3p mimics的小鼠巨噬细胞M1型巨噬细胞markers (i NOS, TNF-α, CCL-3, IL-23)表达减少,M2型巨噬细胞markers (Arg-1, CX3CR1, IL-4, MRC, IL-10, Ym-1)表达增加,同时伴有TLR4-Myd88-NF-κB信号通路表达下调,而通过给予TAK-242抑制了mmu-miR-203-3p mimics下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路及诱导M2型巨噬细胞极化的作用。结论:mi R-203与TLR4 m RNA的3'-UTR特异性结合下调TLR4-Myd88-NF-κB信号通路诱导M2型巨噬细胞极化。 展开更多

关键词 miR-203 RAW264.7 双荧光素酶报告基因系统 巨噬细胞极化 TLR4-Myd88-NF-κB

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早期胃癌患者外周血清差异蛋白表达谱的建立及其生物学分析 被引量：3

2

作者 金杰 楼俪泓 +2 位作者 沙明磊 胡皓璐 靖大道 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第16期3014-3018,3045,共6页

目的:分析早期胃癌患者外周血中低丰度蛋白的表达差异,以筛选诊断早期胃癌血清多肽或蛋白标志物。方法:应用高通量的AAH-BLG-1000蛋白芯片分别检测3例早期胃癌患者和3例正常对照成人的外周血清,建立早期胃癌患者外周血清差异蛋白表达谱... 目的:分析早期胃癌患者外周血中低丰度蛋白的表达差异,以筛选诊断早期胃癌血清多肽或蛋白标志物。方法:应用高通量的AAH-BLG-1000蛋白芯片分别检测3例早期胃癌患者和3例正常对照成人的外周血清,建立早期胃癌患者外周血清差异蛋白表达谱,分析其相关生物学信息,以筛选早期胃癌的血清肿瘤标志物。结果:与正常对照组比较,早期胃癌患者外周血清中有10种蛋白表达显著上调(P<0.05),52种蛋白表达显著下调(P<0.05)。生物信息学分析发现差异蛋白质集中于血管生成、信号调控,免疫调节、酶联受体蛋白信号,细胞凋亡等生物进程,而差异蛋白中的VEGI、CD40L、SMAD7、PLUNC、NTN、LTβR和HEVM7个差异蛋白的特征性改变有望成为早期胃癌血清学的肿瘤标志物。结论:应用蛋白芯片技术所得的早期胃癌患者血清中的差异表达蛋白有望成为诊断早期胃癌的血清肿瘤标志物。 展开更多

关键词 早期胃癌 蛋白芯片 肿瘤标志物 生物学分析

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CXCR4基因转染人脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病肾病的实验研究 被引量：2

3

作者 沙明磊 戴嘉 +1 位作者 蔡竞蕙 吴亦影 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第24期4601-4605,共5页

目的:探讨过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell, hUC-MSCs)移植后对糖尿病肾病的治疗作用。方法:构建CXCR4的慢病毒表达载体,并建立过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(CXCR4-MSCs)。采用8周龄... 目的:探讨过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cell, hUC-MSCs)移植后对糖尿病肾病的治疗作用。方法:构建CXCR4的慢病毒表达载体,并建立过表达CXCR4的人脐带间充质干细胞(CXCR4-MSCs)。采用8周龄健康雌性SD大鼠75只,其中15只为正常对照组,60只为实验组。实验组糖尿病成模后一个月,将糖尿病实验大鼠60只随机分为4组:①移植CXCR4-MSCs组(CXCR4基因转染MSCs组),即CXCR4组;②移植null-MSCs组(空质粒未转染CXCR4基因的MSCs组),即null-MSCs;③移植MSCs组(MSCs组);④PBS组(未移植任何的MSCs,单纯PBS注射,PBS组)。将CXCR4-MSCs、null-MSCs及MSCs消化离心,取含1×10^(6)个细胞悬液经尾静脉分别注入CXCR4-MSCs组、null-MSCs组及MSCs组大鼠体内,PBS组注射1 mL PBS。干细胞治疗8周后,处死五组大鼠。各组大鼠处死前放代谢笼留取24 h尿,计算尿量,保存送检。处死前尾静脉采血检测血糖、称体重并记录。观察血糖、肾脏肥大指数、肾重、体重、24小时尿蛋白排泄量,并观察肾脏组织病理学改变。结果:60只SD雌性大鼠糖尿病模型成功率达100%,至实验8周糖尿病大鼠总共死亡14只,存活率达76.67%。实验开始后的8周,所有CXCR4组、Null-MSCs组、MSCs组、PBS组大鼠与正常组比较,体重均明显减轻(P<0.01),血糖明显升高(P<0.01)。MSCs治疗后8周,除正常组外,其余各组大鼠血糖、肾重、肾重/体重比、24小时尿蛋白均显著增高,体重显著降低(P<0.05);与PBS组相比,CXCR4组、null-MSCs组,MSCs组大鼠的肾重、肾重/体重比、24小时尿蛋白均明显降低(P<0.05),体重无明显增加,血糖无明显降低(P>0.05)。CXCR4组大鼠的肾重、肾重/体重比、24小时尿蛋白较除正常组外的各组均明显降低(P<0.05)。糖尿病成模后,给予大鼠尾静脉注射干细胞悬液或等量培养液,注射后8周,除正常组外,其余各组PAS染色可见大鼠肾小球肥大,肾小球基底膜增厚、系膜 展开更多

关键词 干细胞 基因重组 CXCR4 糖尿病肾病

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氨基末端脑钠钛前体水平与高龄慢性心力衰竭患者心脏结构和功能的相关性研究 被引量：2

4

作者 冀涛 沙明磊 +2 位作者 戴嘉 冯灿 倪秀石 《山西医药杂志》 CAS 2016年第3期320-323,共4页

近年来对于心力衰竭的研究进入了快速发展时期,除了传统两大基石药物：血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）/血管紧张素受体拮抗剂（ARB）以及β受体阻滞剂外,醛固酮受体拮抗剂的地位也进一步被提高,

关键词 氨基末端 β受体阻滞剂 心脏彩色多普勒 室间隔厚度 心脏结构 后壁厚度 前体蛋白 钠尿肽 超声结果 心房颤动

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腹型肥胖对急性冠脉综合征患者冠状动脉病变严重程度的影响 被引量：2

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作者 张娴 沙明磊 +2 位作者 姚玉婷 戴嘉 倪秀石 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第32期6255-6258,共4页

目的:研究腹型肥胖对急性冠脉综合征(ACS)患者冠状动脉病变严重程度的影响。方法:选择2012年4月至2013年4月在我院接受治疗的ACS患者120例,根据腰围身高比(RWH)将患者分为无腹型肥胖者60例(对照组,RWH<0.5)及腹型肥胖者60例(观察组,R... 目的:研究腹型肥胖对急性冠脉综合征(ACS)患者冠状动脉病变严重程度的影响。方法:选择2012年4月至2013年4月在我院接受治疗的ACS患者120例,根据腰围身高比(RWH)将患者分为无腹型肥胖者60例(对照组,RWH<0.5)及腹型肥胖者60例(观察组,RWH<0.5)。测量所有患者的基本参数,计算RWH,利用冠脉造影判断冠脉病变的支数和程度,根据Gensini评分法对冠脉造影结果进行评价,分析冠脉病变范围、Gensini积分和RWH的相关性。结果:观察组的收缩压(SBP)、空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)及Gensini积分水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组的高密度脂蛋白(HDL-C)水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。双支病变的RWH及Gensini积分水平显著高于单支病变,三支病变的RWH及Gensini积分水平显著高于单支病变及双支病变,差异均有统计学意义(均P<0.05)。根据Spearman法分析相关性可知,冠脉病变范围、Gensini积分和RWH均呈正相关(r=0.635,0.739;P=0.000,0.000)。结论:ACS患者RWH水平增高与冠脉病变的严重程度关系密切,有效控制腹型肥胖对于降低心血管类疾病发病率以及降低冠脉病变的程度具有重要意义。 展开更多

关键词 腹型肥胖 急性冠脉综合征 冠状动脉病变 严重程度

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小剂量阿托伐他汀对老年动脉粥样硬化斑块的影响 被引量：1

6

作者 池素娟 胡皓璐 +2 位作者 沙明磊 王东生 吴寒 《中国综合临床》 北大核心 2007年第4期289-291,共3页

目的 探讨小剂量阿托伐他汀对老年颈动脉硬化宛块的治疗效果。方法 将60例经彩色超声多普勒证实颈动脉硬化并高血脂的患者给予阿托伐他汀10mg／d治疗，并在治疗后6、12个月及18个月以彩色超声多普勒检查双侧颈动脉并复查血脂、血生化指... 目的 探讨小剂量阿托伐他汀对老年颈动脉硬化宛块的治疗效果。方法 将60例经彩色超声多普勒证实颈动脉硬化并高血脂的患者给予阿托伐他汀10mg／d治疗，并在治疗后6、12个月及18个月以彩色超声多普勒检查双侧颈动脉并复查血脂、血生化指标，观察双侧颈动脉粥样硬化、管腔内径以及内膜中膜厚度变化，并与治疗前比较。结果 与治疗前比较，阿托伐他汀治疗6个月时低密度脂蛋白明显降低[（3．46±0．13）至（2．90±0．08）mmol／L，P〈0．01]，治疗12个月时血浆总胆固醇[（5．35±0．17）至（4．68±0．11）mmol／L，P〈0．01]、低密度脂蛋白[（3．46±0．13）至（2．62±0．07）mmol／L，P〈0．01]、甘油三酯[（2．02±0．19）至（1．55±0．11）mmol／L，P〈0．05]均明显降低，高密度脂蛋白升高[（1．06±0．76）至（1．33±0．09）mmol／L，P〈0．05]。并且随治疗时间的延长上述指标的改变更加明显。治疗12个月时内膜中膜厚度开始变薄[（0．94±0．14）至（0．85±0．13）mm，P〈0．05]，治疗18个月内膜中膜厚度f（0．94±0．14）至（0．81±0．15）mm，P〈0．01]明显减小，管腔内径明显增大（7．18±0．14）至（7．84±0．16）mm，P〈0．01）。治疗前后血糖、肌肝、尿酸均无明显变化。结论 小剂量阿托伐他汀除能有效降低血脂水平外，在一定程度上对颈动脉粥样硬化斑块有减缓和抑制进展作用。 展开更多

关键词 阿托伐他汀 动脉粥样硬化 影像学检查 内膜中膜厚度

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LINC00472参与TGF-β1诱导的HK-2细胞系纤维化和上皮间充质转化 被引量：1

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作者 徐超亮 陈磊 +4 位作者 李登 陈飞腾 徐子杰 邵怡 沙明磊 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第11期2007-2011,共5页

目的:探讨长链非编码RNA LINC00472在肾纤维化细胞模型中的表达及其在TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化和上皮间充质转化(EMT)中的功能作用。方法:使用重组人TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化和EMT,采用实时荧光定量PCR法检... 目的:探讨长链非编码RNA LINC00472在肾纤维化细胞模型中的表达及其在TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞纤维化和上皮间充质转化(EMT)中的功能作用。方法:使用重组人TGF-β1诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化和EMT,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中纤维化相关基因和LINC00472的mRNA表达水平,通过Western blot免疫印迹法检测细胞中纤维化相关基因的蛋白表达水平,通过划痕实验评估LINC00472表达对HK-2细胞迁移能力的影响。结果:TGF-β1能成功诱导HK-2细胞发生纤维化和EMT,并剂量和时间依赖性地抑制LINC00472的表达(P<0.05)。抑制LINC00472进一步促进TGF-β1诱导的Fibronectin和Vimentin上调,以及E-cadherin下调(P<0.05);而过表达LINC00472则能逆转TGF-β1对纤维化相关基因的诱导作用(P<0.05)。此外,抑制LINC00472能进一步增强TGF-β1诱导的HK-2细胞迁移(P<0.05),而上调LINC00472则使细胞迁移受到抑制(P<0.05)。结论:LINC00472在TGF-β1诱导的肾纤维化细胞模型中呈低表达,其表达水平的降低能促进细胞纤维化和EMT过程。 展开更多

关键词 肾纤维化 上皮间充质转化 慢性肾脏病 长链非编码RNA

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CXCR4慢病毒载体的构建及其在人脐带血间充质干细胞的表达 被引量：1

8

作者 沙明磊 戴嘉 +3 位作者 张娴 姚玉婷 倪秀石 于青 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第28期5429-5432,共4页

目的:构建趋化因子CXC亚族CXCR4的慢病毒表达载体并观察其转染人脐带间充质干细胞后的表达。方法:用逆转录PCR方法获取CXCR4基因编码区片段,将构建的慢病毒载体质粒pLVTHM-EGFP-CXCR4与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转染293T细胞,... 目的:构建趋化因子CXC亚族CXCR4的慢病毒表达载体并观察其转染人脐带间充质干细胞后的表达。方法:用逆转录PCR方法获取CXCR4基因编码区片段,将构建的慢病毒载体质粒pLVTHM-EGFP-CXCR4与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转染293T细胞,包装生产慢病毒。用相同滴度的慢病毒转导等量间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSCs),后采用Real time PCR检测CXCR4 mRNA、Western Blot方法检测蛋白质的表达。结果:PCR、酶切和测序结果表明成功的构建了CXCR4基因重组慢病毒载体。同时用该慢病毒载体转染MSCs后可有效地增加MSCs中CXCR4的表达。结论:成功构建了CXCR4的慢病毒表达载体并能在MSCs中表达,为进一步研究其在干细胞移植中的应用奠定基础。 展开更多

关键词 慢病毒 人脐带间充质干细胞 基因重组 CXCR4

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上尿路腔内手术中降低肾盂压力机制与方法的研究进展

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作者 孙丰 魏海彬 +5 位作者 孙晓文 王悦童 沙明磊 张琦 鲁军 邵怡 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第23期4578-4581,共4页

1983年,Wickham教授首先提出微创外科(minimally invasive surgery),此后,微创泌尿外科逐渐成外具有科学意义上的微创外科学的一个重要的分支学科。上尿路的腔内手术,包括PNL(Percutaneous nephrolithotomy)、URS(Ureteroscopic)、f-URS... 1983年,Wickham教授首先提出微创外科(minimally invasive surgery),此后,微创泌尿外科逐渐成外具有科学意义上的微创外科学的一个重要的分支学科。上尿路的腔内手术,包括PNL(Percutaneous nephrolithotomy)、URS(Ureteroscopic)、f-URS(Flexible ureteroscope)等。与传统手术相比,上尿路的腔内手术具有创伤小、时间短、恢复快、并发症少,并且可以直视下进行手术操作,临床应用较广泛。在腔内操作时,为保证术中手术视野的清晰度,手术多采用生理盐水(NS)进行灌注,进而导致肾盂压力升高,引起各项潜在的危害。因此如何在上尿路腔内手术中降低肾盂压力成为一个研究的热点。近些年,腔内器械的改进,包括镜体灌注通道入路与出路的分开设计、回流鞘的设计、压力泵的改进,在一定程度上降低了肾盂压力。灌注液体中加入相应浓度的药物,抑制上尿路平滑肌的蠕动与收缩,也在一定程度上降低了肾盂压力。本文介绍了上尿路腔内手术中肾盂压力的影响因素,回顾了肾盂压力升高后的危害,分析了肾盂压力升高机制,总结了肾盂压力降低的各种方案以及将来的应用前景。 展开更多

关键词 上尿路 腔内 肾盂压力

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新型石材生产污水循环利用技术及装备研发

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作者 沙明磊 王志 李世斌 《石材》 2016年第9期15-18,共4页

本项目针对目前对石材加工中污水量大、环境污染严重的现状，结合前沿的工业污水处理技术、固液分离技术，研究石粉过滤机理，提出一套合理的污水处理工艺并开发出适合石材行业的污水处理设备，使处理后水质达到循环利用或排放标准。

关键词 循环利用技术 石材加工 生产污水 研发 装备 污水处理技术 固液分离技术 污水处理设备

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肿瘤坏死因子α和B型钠尿肽在老年心力衰竭患者中的表达及临床意义

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作者 张娴 戴嘉 +1 位作者 沙明磊 金炜 《内科理论与实践》 2008年第6期428-430,共3页

目的:评价老年充血性心力衰竭(CHF)患者不同心功能水平的血浆B型钠尿肽(BNP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化及其与心功能的关系。方法:测定60例CHF患者和30名健康体检者血浆BNP和TNF-α浓度,观察其与超声心动图测定左室射血分数(LVEF... 目的:评价老年充血性心力衰竭(CHF)患者不同心功能水平的血浆B型钠尿肽(BNP)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平变化及其与心功能的关系。方法:测定60例CHF患者和30名健康体检者血浆BNP和TNF-α浓度,观察其与超声心动图测定左室射血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDd)以及心功能分级的关系。结果:CHF患者血浆BNP和TNF-α水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),升高程度与心功能相关而与CHF的基础病因无关。BNP(r=-0.89)和TNF-α(r=-0.94)均与LVEF呈线性负相关(均P<0.05),BNP(r=0.7939)和TNF-α(r=0.7513)均与LVEDd呈线性正相关(均P<0.05)。结论:血浆BNP和TNF-α水平可作为老年CHF严重程度的判断指标。 展开更多

关键词 充血性心力衰竭 B型钠尿肽 肿瘤坏死因子Α

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