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基于HPLC-UV-DPPH法的地黄和熟地黄药材抗氧化活性成分比较研究 被引量：39
1
作者 沈华旦 方江济 +3 位作者 郭鹏程 定天明 刘军锋 丁晓萍 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期582-588,共7页
目的建立HPLC-UV-DPPH在线分析方法,比较不同生产企业的地黄药材在炮制前后抗氧化活性成分的变化,为中药炮制及质量控制提供有效的评价方法。方法 HPLC-UV-DPPH在线联用筛选系统中HPLC流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为1... 目的建立HPLC-UV-DPPH在线分析方法,比较不同生产企业的地黄药材在炮制前后抗氧化活性成分的变化,为中药炮制及质量控制提供有效的评价方法。方法 HPLC-UV-DPPH在线联用筛选系统中HPLC流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 m L/min,色谱柱为Aglient Extend C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,检测波长334 nm,DPPH溶液体积流量0.5 m L/min,检测波长517 nm。以毛蕊花糖苷为阳性对照,通过"量-效"研究思路评价样品的总抗氧化活性及各成分对总抗氧化活性的贡献率。采用HPLC-FT-MS对药材中主要的抗氧化活性成分进行鉴定并比较药材炮制前后的差异。结果 HPLC-UV-DPPH方法检测到地黄中主要含有9个抗氧化活性成分,而熟地黄含有13个,地黄和熟地黄有8个共有抗氧化活性成分,地黄在炮制前后抗氧化活性成分明显不同,不同生产企业的样品中各抗氧化活性成分的活性差异较大。抗氧化活性贡献率较高的成分分别为玉叶金花苷酸、海胆苷、焦地黄苯乙醇苷A1/A2、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷。结论 HPLC-UV-DPPH法稳定、灵敏、重现性好,适用于地黄和熟地黄中抗氧化活性成分的快速筛选和质量评价。 展开更多
关键词 HPLC-UV-DPPH 抗氧化活性 地黄 熟地黄 HPLC-FT-MS 玉叶金花苷酸 海胆苷 焦地黄苯乙醇苷A1/A2 毛蕊花糖苷 异毛蕊花糖苷
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超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱质谱法快速检测化妆品中66种抗生素 被引量：18
2
作者 李红英 沈华旦 +2 位作者 方江济 张静雅 丁晓萍 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期643-650,共8页
采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法同时测定化妆品中磺胺类、沙星类等66种抗生素类化合物,建立了快速筛查数据库和定量分析方法。待测物用乙腈超声提取,C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,以0.1%(v/v)甲... 采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法同时测定化妆品中磺胺类、沙星类等66种抗生素类化合物,建立了快速筛查数据库和定量分析方法。待测物用乙腈超声提取,C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)分离,以0.1%(v/v)甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱。在正离子模式下,以保留时间和一级母离子精确质量数进行快速筛查,以高能碰撞诱导解离获得的二级碎片离子精确质量数进行确证。结果表明,化合物的线性关系良好,线性相关系数(R2)>0.99;检出限(LOD)为2~4μg/kg;定量限(LOQ)为5~10μg/kg;3个添加水平(1LOQ、10LOQ、30LOQ)的平均回收率为58.2%~119.1%,相对标准偏差为1.03~11.9%。该方法简便快速、定性定量可靠,适用于化妆品中抗生素类化合物的快速筛查和定量检测。 展开更多
关键词 超高效液相色谱 线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱法 抗生素 化妆品
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运用在线HPLC-UV-DPPH方法评价地黄药材的抗氧化成分及质量 被引量：8
3
作者 方江济 谭静玲 +3 位作者 沈华旦 张雪琼 定天明 丁晓萍 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2018年第12期1256-1260,1265,共6页
目的:发展在线高效液相色谱-紫外-1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(HPLC-UV-DPPH)方法快速筛选地黄药材的抗氧化成分并评价其活性,为中药质量控制提供新的研究思路和模式。方法:运用HPLC-UV-DPPH方法筛选13批地黄药材的抗氧化成分;以毛蕊花糖... 目的:发展在线高效液相色谱-紫外-1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(HPLC-UV-DPPH)方法快速筛选地黄药材的抗氧化成分并评价其活性,为中药质量控制提供新的研究思路和模式。方法:运用HPLC-UV-DPPH方法筛选13批地黄药材的抗氧化成分;以毛蕊花糖苷为阳性参比,计算主要抗氧化活性成分的相对活性及总活性;运用高效液相色谱-傅里叶变换质谱(HPLC-FTMS)方法对主要的抗氧化成分进行鉴定;13批地黄样品的总活性结果与《中国药典》方法中毛蕊花糖苷含量的检测结果进行比较分析。结果:HPLC-UV-DPPH方法学考察结果,精密度RSD<4.61%,稳定性RSD<4.25%,重复性RSD<5.28%;建立"量-效"曲线方程为y=0.000 6x4-0.024 1x3+0.404 1x2+1.299x+1.652 1(R2=1);9个抗氧化成分中4个显示较强DPPH抑制峰的成分被鉴定为海胆苷(echinacoside)、焦地黄苯乙醇苷A1/A2(jionoside A1/A2)、毛蕊花糖苷(verbascoside)、异毛蕊花糖苷(isoverbascoside);《中国药典》方法测得毛蕊花糖苷含量较高的4批样品其总活性也较高,而其他样品的结果不呈现正相关,表明除毛蕊花糖苷外的其他成分对总活性的贡献率不应被忽略,质量评价应考虑多成分的测定。结论:研究建立的HPLC-UV-DPPH方法具有良好的重复性和稳定性,化学和生物活性检测相结合为综合评价中药的质量提供了一种新的方法。 展开更多
关键词 HPLC-UV-DPPH 地黄 抗氧化活性 HPLC-FTMS 质量控制
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运用多维在线高效液相色谱-生物化学检测方法筛选银杏叶提取物治疗老年痴呆疾病的药效成分 被引量：4
4
作者 丁晓萍 沈华旦 +1 位作者 方江济 郭鹏程 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第16期1407-1412,共6页
目的建立高效液相色谱-生物化学检测(HPLC-BCD)多维在线联用分析方法,筛选银杏叶提取物治疗老年痴呆疾病(Alzheimer disease,AD)的药效成分。方法运用HPLC-UV(紫外)-1,1-二苯基-2-三硝基苯肼/2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐... 目的建立高效液相色谱-生物化学检测(HPLC-BCD)多维在线联用分析方法,筛选银杏叶提取物治疗老年痴呆疾病(Alzheimer disease,AD)的药效成分。方法运用HPLC-UV(紫外)-1,1-二苯基-2-三硝基苯肼/2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(DPPH/ABTS)、HPLC-UV-乙酰胆碱酯酶(Ach E)方法快速筛选银杏叶提取物中的自由基清除剂和Ach E抑制剂。以加兰他敏为阳性对照,考察在线HPLC-UV-Ach E方法的稳定性和重现性。运用超高效液相色谱(UPLC)-LTQ/线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱(orbitrap MS)(UPLC-LTQ/orbitrap MS)方法鉴定主要活性成分。结果 HPLC-UV-DPPH/ABTS方法检测到银杏叶提取物中的14个强抗氧化成分,而运用HPLC-UV-Ach E方法发现了3个Ach E抑制剂,通过UPLCLTQ/orbitrap MS方法鉴定了3个酶抑制剂分别为4-O-beta-glucopyranosyl-cis-coumaric acid、ginkgolide A和3-O-[2-O-(β-D-glucosyl)-α-L-rhamnosyl]quercetin。结论实验建立的在线HPLC-BCD方法具有良好的灵敏度、重现性和稳定性,能够快速筛选银杏叶提取物中的抗氧化剂和Ach E抑制剂。为快速发现中药治疗相关疾病的有效成分提供一种有效、快速、便捷的分析手段。 展开更多
关键词 高效液相色谱-生物化学检测 乙酰胆碱酯酶 1 1-二苯基-2-三硝基苯肼/2 2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基 银杏叶提取物 线性离子阱/静电场轨道阱高分辨质谱
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茯苓皮中三萜类化学成分的HPLC-LTQ-Orbitrap分析 被引量：11
5
作者 方潇 丁晓萍 +4 位作者 陈林霖 昝俊峰 沈华旦 胡安娜 刘军锋 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2117-2121,共5页
目的采用高效液相色谱串联二维线性离子阱-静电轨道阱组合式高分辨质谱(HPLC-LTQ-Orbitrap)法对茯苓皮甲醇提取物中的三萜类化学成分进行定性分析。方法使用HPLC分离,结合电喷雾线性离子阱轨道阱质谱,正、负离子全扫描模式获取的化合物... 目的采用高效液相色谱串联二维线性离子阱-静电轨道阱组合式高分辨质谱(HPLC-LTQ-Orbitrap)法对茯苓皮甲醇提取物中的三萜类化学成分进行定性分析。方法使用HPLC分离,结合电喷雾线性离子阱轨道阱质谱,正、负离子全扫描模式获取的化合物精确相对分子质量与碎片信息,并结合对照品比对,辅以特征诊断离子判别和文献数据复核,鉴定茯苓皮提取物中的三萜类成分。结果通过高分辨质谱数据分析结合对照品及相关文献,从茯苓皮甲醇提取物中共鉴定出17个三萜类化学成分。结论采用高分辨质谱方法可以快速、有效的对中药中的化学成分进行定性分析。文章通过对茯苓皮中的三萜类化合物裂解方式和途径探讨,为该类化合物及其代谢产物的结构鉴定与药效物质基础表征提供质谱依据。 展开更多
关键词 茯苓皮 三萜 高效液相色谱串联线性离子阱静电轨道阱质谱
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