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黄芪甲苷对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡相关蛋白表达的影响 被引量：17
1
作者 贾力维 沃晓嫚 +2 位作者 王谦博 张爽 王振月 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 2019年第1期84-89,共6页
观察不同剂量的黄芪甲苷(As-Ⅳ)在体外对非小细胞肺癌(A549)细胞的生长、凋亡等方面的影响,探讨黄芪甲苷抑制A549细胞增殖、促进凋亡的可能分子机制。实验结果表明,As-Ⅳ作用24 h后,肺癌细胞A549的增殖明显受到抑制,具有剂量依赖性。A54... 观察不同剂量的黄芪甲苷(As-Ⅳ)在体外对非小细胞肺癌(A549)细胞的生长、凋亡等方面的影响,探讨黄芪甲苷抑制A549细胞增殖、促进凋亡的可能分子机制。实验结果表明,As-Ⅳ作用24 h后,肺癌细胞A549的增殖明显受到抑制,具有剂量依赖性。A549细胞中的E-cadherin蛋白表达呈药物浓度依赖性上调,Vimentin蛋白表达下调。经As-Ⅳ作用24 h后的A549细胞,其胞质蛋白Bax/Bcl2表达水平高于对照组,同时As-Ⅳ也促使Caspase-3裂解为cleaved Caspase-3。黄芪甲苷在体外能抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移并诱导其凋亡,其机制可能是通过抑制NEDD4/PTEN通路而激活并促进Bax表达的实现。该发现为临床上治疗非小细胞肺癌提供了有意义的实验依据。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 A549 NEDD4 PTEN
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表达红色荧光蛋白重组柯萨奇病毒B组3型基因组稳定性分析 被引量：1
2
作者 赵文然 钟学宽 +4 位作者 张淑娟 沃晓嫚 张中海 王博 钟照华 《微生物与感染》 2012年第1期28-36,共9页
本文旨在分析含红色荧光蛋白mCherry基因的重组柯萨奇病毒B组3型(CVB3)基因组的稳定性。用重组质粒pCVB3-mCherry转染HeLa细胞,观察细胞病变和mCherry的表达。收获病毒后,用噬斑形成实验纯化病毒并测定病毒毒力。将重组病毒CVB3-mCherry... 本文旨在分析含红色荧光蛋白mCherry基因的重组柯萨奇病毒B组3型(CVB3)基因组的稳定性。用重组质粒pCVB3-mCherry转染HeLa细胞,观察细胞病变和mCherry的表达。收获病毒后,用噬斑形成实验纯化病毒并测定病毒毒力。将重组病毒CVB3-mCherry在HeLa细胞中连续传代,提取第2～6代重组病毒总RNA,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增出报告基因mCherry及CVB3部分序列,进行测序分析。结果表明,pCVB3-mCherry转染的HeLa细胞出现细胞病变并表达红色荧光蛋白mCherry;从第2代开始,CVB3-mCherry出现报告基因mCherry及部分CVBVP4基因序列丢失,基因序列丢失导致病毒开放读码框架移位。本研究表明,mCherry基因序列的插入导致CVB3基因组不稳定。随着病毒的传代逐渐丢失插入的报告基因mCherry及CVB3基因组的部分序列,病毒读码框架移位,产生致死性突变株。因此,应用CVB3-mCherry时,病毒的传代次数不超过2代,否则应重新从重组质粒中收获病毒,并对每代重组病毒进行纯化和毒力测定。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒B组3型 红色荧光蛋白 MCHERRY 基因重组
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《医学细胞生物学》选修课的教学改革与探索 被引量：1
3
作者 沃晓嫚 《中国卫生产业》 2018年第36期132-135,共4页
高等医学院校开设选修课是提高医学生综合素质,培养医学生人文情怀的重要途径。该文从《医学细胞生物学》在基础医学教学中的课程分类比例、教学效果、学生选课心理等方面现存问题进行剖析,对课程的结构进行探索性优化、规范教学管理、... 高等医学院校开设选修课是提高医学生综合素质,培养医学生人文情怀的重要途径。该文从《医学细胞生物学》在基础医学教学中的课程分类比例、教学效果、学生选课心理等方面现存问题进行剖析,对课程的结构进行探索性优化、规范教学管理、指导学生正确选课,对选修课的教学进行改革,力求为新时代的医学教育改革提供参考依据。 展开更多
关键词 综合素质 公共选修课 课程设置 医学细胞生物学 微信平台
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抗B组柯萨奇病毒3型3C蛋白多克隆抗体的制备及初步应用
4
作者 牛孙敏 张箭 +5 位作者 王立鑫 王瑶 赵朔暄 邵恩泽 沃晓嫚 赵文然 《国际免疫学杂志》 CAS 2023年第3期233-239,共7页
目的制备抗B组柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CVB)3C蛋白的多克隆抗体。方法通过聚合酶链式反应从pcDNA3.1(+)-EGFP-3C中扩增编码3C的DNA片段,构建pET28a(+)-3C-6His表达载体,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli,E.Coli)BL21(DE3)以表达3C... 目的制备抗B组柯萨奇病毒(Coxsackievirus,CVB)3C蛋白的多克隆抗体。方法通过聚合酶链式反应从pcDNA3.1(+)-EGFP-3C中扩增编码3C的DNA片段,构建pET28a(+)-3C-6His表达载体,转化至大肠埃希菌(Escherichia coli,E.Coli)BL21(DE3)以表达3C重组蛋白。优化表达条件及菌体蛋白的提取方法,经超声破碎制备菌体总蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后,用氯化钾进行胶染色,切胶回收相对分子质量为26000的蛋白,即纯化的3C重组蛋白(3C-6His的相对分子质量为26000)。用纯化的1 mg 3C重组蛋白加等量弗氏佐剂免疫新西兰大白兔,共免疫5次,每次间隔1周,免疫结束后1周取兔血清,检测抗体的特异性。结果在相对分子质量为26000的位置检测到了3C-6His融合蛋白的表达,成功构建了高效表达带His标签的3C重组蛋白载体。重组3C蛋白原核优化表达条件为37℃培养细菌6 h,加0.05 mmol/L异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导。经SDS-PAGE分离菌体总蛋白,得到了纯化的3C重组蛋白。获得的兔免疫血清可以结合E.Coli及HeLa细胞表达的3C蛋白,还能识别感染CVB3或肠道病毒A71的HeLa细胞中表达的3C蛋白。结论获得了抗CVB33C蛋白酶的多克隆抗体,这一抗体可特异结合肠道病毒的3C蛋白酶,为进一步研究3C蛋白酶在肠道病毒致病机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 B组柯萨奇病毒 3C蛋白 多克隆抗体
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染色体显微切割技术的研究进展及应用(综述)
5
作者 沃晓嫚 张帅 +1 位作者 郭东林 李集临 《伤残医学杂志》 2004年第4期62-64,共3页
人类及许多高等动植物的基因序列分析研究，随着高度多态的DNA遗传标记的丰富和应用，取得很大的进步，但基因图中遗传标记分布不均，基因组的遗传图谱和物理图谱分辨率不高，染色体特定区域遗传标记密度不高，无法建立高精度基因图，... 人类及许多高等动植物的基因序列分析研究，随着高度多态的DNA遗传标记的丰富和应用，取得很大的进步，但基因图中遗传标记分布不均，基因组的遗传图谱和物理图谱分辨率不高，染色体特定区域遗传标记密度不高，无法建立高精度基因图，需要一种新的方法探索新的标记，获得染色体区带特异性的序列标签位点(STS)及表达序列标签(EST)构建克隆连锁群，分阶段有序地完成特异区带全序列分析， 展开更多
关键词 染色体显微切割技术 研究进展 基因序列分析 克隆连锁群
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姜黄素通过下调FoxM1、NEDD4及β-catenin抑制黑素瘤细胞增殖、迁移及侵袭
6
作者 张泽鹏 沃晓嫚 +3 位作者 刘添 秦文欣 林雨丝 王永晨 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2022年第5期419-425,共7页
目的研究姜黄素对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法将两种人黑素瘤细胞系(A375和A875)分别用不同浓度的姜黄素处理,应用MTT、划痕、Transwell实验观察姜黄素对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,利用蛋白印迹技术测... 目的研究姜黄素对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法将两种人黑素瘤细胞系(A375和A875)分别用不同浓度的姜黄素处理,应用MTT、划痕、Transwell实验观察姜黄素对黑素瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响,利用蛋白印迹技术测定细胞周期蛋白A2(CyclinA2)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,FoxM1)、神经前体细胞表达发育下调蛋白4(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达情况。结果MTT与集落形成实验结果显示,姜黄素处理后细胞相对活力下降,细胞增殖能力显著下降,且具有剂量依赖性(P<0.001)。划痕和侵袭实验结果显示,姜黄素处理后黑素瘤细胞迁移相对距离明显增加,侵袭的相对细胞数明显减少,差异具有统计学意义(P<0.001;P<0.05)。Western blot结果显示,姜黄素处理后Cyclin D1和Cyclin A2、FoxM1表达水平降低(P<0.001;P<0.05);过表达FoxM1促进NEDD4表达,敲减FoxM1则抑制NEDD4表达(P<0.001)。与对照组比较,姜黄素处理后细胞核中β-catenin水平明显降低,而细胞质中β-catenin水平明显升高(P<0.001)。结论姜黄素可通过下调FoxM1/NEDD4和β-catenin抑制黑素瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 姜黄素 黑素瘤 神经前体细胞表达发育下调蛋白4 叉头框蛋白M1 Β-连环蛋白
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蛋白质组学及其相关技术的研究进展
7
作者 张帅 沃晓嫚 +1 位作者 郭东林 王同昌 《牡丹江师范学院学报（自然科学版）》 2004年第4期11-13,共3页
对蛋白质、蛋白质组、蛋白质组学、蛋白质组学相关技术(尤其是双向凝胶电泳技术)作以简要介绍，并对孽领域近年来的发展动态进行了综述．
关键词 蛋白质组学 相关技术 研究进展 凝胶电泳技术 发展动态
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网络环境下行动导向成人混合学习模式的构建
8
作者 沃晓嫚 《黑龙江生态工程职业学院学报》 2012年第3期72-73,148,共3页
随着社会变革和职业变迁的不断加剧,终身学习已成为全球化发展的重要趋势。基于网络的现代远程教育成为支持人们持续学习的重要学习通道,而对学习质量的影响,除了提供具有针对性、实用性的学习内容外,学习方式的选择也是重要的影响因素... 随着社会变革和职业变迁的不断加剧,终身学习已成为全球化发展的重要趋势。基于网络的现代远程教育成为支持人们持续学习的重要学习通道,而对学习质量的影响,除了提供具有针对性、实用性的学习内容外,学习方式的选择也是重要的影响因素。以信息技术为依托,开展网络环境下行动导向的成人混合学习模式研究,旨在为成人开展有效的网络学习提供指导,促进其有效学习。 展开更多
关键词 网络环境 工作过程导向 成人 混合学习模式
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