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鹿茸多肽对软骨终板细胞基质蛋白及其降解酶基因表达的影响 被引量：11
1
作者 李文超 林一峰 +6 位作者 梁祖建 沈国喜 原超 朱辉 池利业 张文财 刘洪江 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2019年第1期6-10,16,共6页
目的:观察鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的增殖及基质蛋白(Ⅱ,Ⅹ型胶原)、基质降解酶(金属蛋白酶-13)基因表达的影响。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,对其椎间盘软骨终板细胞进行分离与培养,取第3代软骨终板细胞实验,空... 目的:观察鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的增殖及基质蛋白(Ⅱ,Ⅹ型胶原)、基质降解酶(金属蛋白酶-13)基因表达的影响。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,对其椎间盘软骨终板细胞进行分离与培养,取第3代软骨终板细胞实验,空白对照组不做任何处置,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分三组,分别在培养基中加入10μg/L的IL-1β和10μg/mL,30μg/mL,50μg/mL的鹿茸多肽。MTT比色法检测三个时间节点(24h,48h,72h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况;qPCR检测法对软骨终板细胞中基质Ⅱ,Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达情况。结果:在24h,48h,72h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点软骨终板细胞增殖情况与IL-1β组比较,差异无统计学意义(P>0.05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能减轻IL-1β对软骨终板细胞増殖的抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。qPCR检测结果显示:IL-1β诱导组的Ⅱ型胶原蛋白基因的表达减弱,Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达增强,与空白组对比差异有统计学意义(P<0.05);鹿茸多肽各浓度组均能上升Ⅱ型胶原蛋白基因的表达,下调Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),以50μg/mL组效果显著,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽(50μg/mL组)能有效地拮抗IL-1β对软骨终板细胞增殖的抑制作用,上升Ⅱ型胶原蛋白基因的表达,下调Ⅹ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-13基因的表达,改善了基质的代谢,起到延缓椎间盘软骨终板退变的作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 软骨终板 椎间盘退变 白介素-1Β 基质金属蛋白酶-13
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鹿茸多肽对IL-1β诱导退变的椎间盘终板软骨细胞保护作用 被引量：6
2
作者 李文超 林一峰 +5 位作者 沈国喜 原超 朱辉 池利业 张文财 刘洪江 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2019年第9期47-51,共5页
目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘终板软骨细胞的影响,分析其对终板软骨细胞保护的作用机制。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,并对其椎间盘终板软骨细胞进行分离与培养,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分3组,... 目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘终板软骨细胞的影响,分析其对终板软骨细胞保护的作用机制。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,并对其椎间盘终板软骨细胞进行分离与培养,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分3组,分别在培养基中加入10μg/L的IL-1β和10、30、50μg/mL的鹿茸多肽,MTT比色法检测3个时间节点(24、48、72 h)各组椎间盘终板软骨细胞的增殖情况;流式细胞仪检测大鼠椎间盘终板软骨细胞的凋亡;qPCR法检测Collagen Ⅱ、Collagen X、caspase-3、MMP-13、Bax、Bcl-2基因的表达水平。结果:在24、48、72 h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点终板软骨细胞增殖情况与IL-1β诱导组比较,差异不具有统计学意义(P>0.05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能拮抗IL-1β对软骨终板细胞増殖的抑制作用,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);流式分析结果表明,不同浓度的鹿茸多肽均能够降低IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例(P<0.05,P<0.01);qPCR检测结果表明,IL-1β诱导组的Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达减弱,Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达增强,与空白对照组对比差异具有统计学意义(P<0.05);各浓度鹿茸多肽组均能够上调Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达(P<0.05,P<0.01),下调Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达(P<0.05,P<0.01),以50μg/mL组效果最为显著(P<0.01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽通过抑制软骨终板细胞的凋亡,促进其増殖,调控其相关基质蛋白及基质降解酶、凋亡因子等基因的表达,起到了对退变的椎间盘终板软骨细胞的保护作用。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 软骨终板 椎间盘退变 基质金属蛋白酶 基质蛋白
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鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠软骨终板细胞增殖和CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6 mRNA表达的影响 被引量：6
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作者 李文超 林一峰 +5 位作者 梁祖建 沈国喜 原超 朱辉 池利业 刘洪江 《中医学报》 CAS 2019年第7期1454-1459,共6页
目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖和Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)、CollagenⅡ、白细胞介素(interleukin-6,IL-6) mRNA表达的影响。方法:选取健康SD大鼠(1个月龄),取其脊柱椎间盘软骨终板... 目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖和Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)、CollagenⅡ、白细胞介素(interleukin-6,IL-6) mRNA表达的影响。方法:选取健康SD大鼠(1个月龄),取其脊柱椎间盘软骨终板细胞,并培养至第3代软骨终板细胞进行实验。空白对照组不做任何处理,诱导组只加入10μg·L-1的IL-1β,给药组在培养基中加入10μg·L-1的IL-1β和不同质量浓度的鹿茸多肽(分别为10 mg·L-1、30 mg·L-1、50 mg·L-1)。用MTT比色法检测3个时间点(24 h、48 h、72 h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况;qP CR法检测CollagenⅠ、CollagenⅡ及IL-6 mRNA的表达。结果:MTT法检测结果:鹿茸多肽10 mg·L-1组的软骨终板细胞增殖与诱导组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);鹿茸多肽30 mg·L-1组和鹿茸多肽50 mg·L-1组能促进软骨终板细胞的增殖,与诱导组比较,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。qP CR检测结果:IL-1β诱导组的CollagenⅡmRNA的表达降低,CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6的mRNA的表达升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P <0. 05);不同质量浓度的鹿茸多肽均能增强CollagenⅡmRNA的表达,降低CollagenⅠ和IL-6 mRNA的表达,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01),30 mg·L-1、50 mg·L-1鹿茸多肽效果更加显著(P <0. 01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽能减轻IL-1β对软骨终板细胞增殖的抑制,升高CollagenⅡmRNA的表达,降低CollaoenⅠ、IL-6 mRNA的表达,从而延缓椎间盘的退变。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 软骨终板 椎间盘退变 白细胞介素-1Β 白细胞介素-6 大鼠
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软骨终板细胞凋亡的影响因素及其调控途径的研究进展 被引量：4
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作者 李文超 林一峰 +5 位作者 沈国喜 原超 池利业 朱辉 张文财 刘洪江 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2019年第4期85-88,共4页
大约80%~90%的人在其一生中都或多或少的会受到颈腰痛的折磨,以颈腰痛为主要症状的退变性脊柱病,其病理基础责之于椎间盘的退变[1]。受年龄、异常应力等诱发,椎间盘软骨终板细胞的凋亡呈线性增加[2],导致活性细胞密度降低[3],刺激促炎... 大约80%~90%的人在其一生中都或多或少的会受到颈腰痛的折磨,以颈腰痛为主要症状的退变性脊柱病,其病理基础责之于椎间盘的退变[1]。受年龄、异常应力等诱发,椎间盘软骨终板细胞的凋亡呈线性增加[2],导致活性细胞密度降低[3],刺激促炎细胞因子(如白细胞介素-1、肿瘤坏死因子等)的上升. 展开更多
关键词 椎间盘退变 软骨终板细胞凋亡 细胞凋亡途径 颈腰痛
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