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专一性PCR和变性梯度胶电泳协助从焦化废水处理装置中分离优势功能菌Thauera属菌株 被引量：11
1
作者 毛跃建 张晓君 +1 位作者 张宝让 赵立平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1634-1641,共8页
【目的】在专一性PCR和变性梯度胶电泳(DGGE)的协助下,从废水处理装置的微生物群落中分离较难分离的功能菌Thauera。【方法和结果】本研究首先使用Thauera特异性PCR-DGGE的方法鉴定了焦化废水处理装置反硝化池生物膜中的Thauera在6种培... 【目的】在专一性PCR和变性梯度胶电泳(DGGE)的协助下,从废水处理装置的微生物群落中分离较难分离的功能菌Thauera。【方法和结果】本研究首先使用Thauera特异性PCR-DGGE的方法鉴定了焦化废水处理装置反硝化池生物膜中的Thauera在6种培养基、好氧/厌氧条件下的生长情况。挑选Thauera多样性较高的培养基1/10 NB与MMQ在好氧条件下进行分离培养。然后使用Thauera特异性PCR方法确定分离得到的菌落是否呈阳性,并使用DGGE的方法检验其是否为纯菌。使用不同培养基对含有Thauera的混合菌落进行进一步纯化,DGGE检测发现MMP培养基对混合细菌菌落Q20中的Thauera有明显的富集作用。经过Thauera特异性PCR结合DGGE检测对Thauera属细菌进行追踪,将混合菌落在MMP培养基上多次划线,最终分离得到纯菌。通过这种方法,从反硝化池样品中分离获得了3株在样品中最为主要的Thauera菌株。【结论】以特异性分子标记为导向分离培养细菌,不仅提高了分离效率及细菌筛选的灵敏度,还能协助分离常规方法难以分离的细菌。 展开更多
关键词 THAUERA 特异性PCR 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 分离纯化
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小麦LMW-GS基因的分离与归类 被引量：1
2
作者 崔翠菊 马凤云 +3 位作者 王洪文 毛跃建 汪越胜 何光源 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第4期788-792,共5页
本研究以湖北省小麦栽培品种鄂麦18为材料,采用Glu-D3位点特异性的引物,以叶片DNA为模板,进行PCR扩增。经过PCR产物与克隆载体的连接、连接产物转化感受态E.coliDH5α、蓝白斑筛选以及菌落PCR鉴定,获得34个阳性克隆;经测序分析获得两个L... 本研究以湖北省小麦栽培品种鄂麦18为材料,采用Glu-D3位点特异性的引物,以叶片DNA为模板,进行PCR扩增。经过PCR产物与克隆载体的连接、连接产物转化感受态E.coliDH5α、蓝白斑筛选以及菌落PCR鉴定,获得34个阳性克隆;经测序分析获得两个LMW-GS基因完整编码序列,在GenBank中的基因登记注册号为DQ822593和DQ822596,其中,DQ822593编码序列全长1287bp,DQ822596编码序列全长908bp,所推导的蛋白质都含有8个半胱氨酸残基,1～19个氨基酸为前导信号肽序列,前者属于LMW-GS中的TypeⅠ类,后者属于TypeⅡ类,目前正在鉴定这两类基因的功能。 展开更多
关键词 小麦(Triticum AESTIVUM L.) 低分子量麦谷蛋白 基因分离
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喹啉降解反应器菌群内整合子检测和菌株耐药性分析
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作者 陈睿佳 张晓君 +2 位作者 毛跃建 岳思青 赵立平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1014-1021,共8页
运用PCR技术及克隆文库方法,对一个实验室规模的喹啉降解反应器生物膜系统中的整合子进行了分析。结果表明,在该反硝化喹啉降解反应器的生物膜群落中,整合子携带着丰富多样的基因盒。主要为编码与抗生素耐药性相关的基因盒,如氨基糖苷... 运用PCR技术及克隆文库方法,对一个实验室规模的喹啉降解反应器生物膜系统中的整合子进行了分析。结果表明,在该反硝化喹啉降解反应器的生物膜群落中,整合子携带着丰富多样的基因盒。主要为编码与抗生素耐药性相关的基因盒,如氨基糖苷类耐药基因(aadA基因等),也带有与工业废水环境发现的整合子中可能与芳香族化合物降解有关的基因(如FldF基因)。还有一些功能未知的基因。鉴于耐药性相关基因的广泛存在,对该反应器中分离的优势菌株进行了耐药性分析。结果表明,44.1%的菌株存在耐药性,29.4%的菌株有多重耐药性。它们对4种抗生素的耐药率分别为:氨苄青霉素29.4%、卡那霉素23.5%、氯霉素20.6%、链霉素23.5%。不存在抗生素选择压力环境的微生物群落中分离的群落优势菌株普遍具有抗生素耐药性,而且群落基因组的整合子中携带多种抗生素抗性基因的基因盒。这一现象还未曾见报道,其成因值得进一步研究。 展开更多
关键词 反应器 整合子 基因盒 耐药性 喹啉降解
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县域邮政攻坚速递专业化经营 被引量：1
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作者 毛跃建 《中国邮政》 2007年第3期32-32,33,共2页
随着我国速递业务对外正式开放，国际快递公司全面进驻国内速递市场，国际四大快递公司将进一步放开手脚，与中国邮政EMS展开正面竞争，速递业务面临更为激烈的竞争局面。根据有关方面调查，中国的速递业务市场每年达1000亿元，并以年... 随着我国速递业务对外正式开放，国际快递公司全面进驻国内速递市场，国际四大快递公司将进一步放开手脚，与中国邮政EMS展开正面竞争，速递业务面临更为激烈的竞争局面。根据有关方面调查，中国的速递业务市场每年达1000亿元，并以年均30％速度增长，随着我国经济持续、快速发展，速递业务还将保持高速增长的态势。 展开更多
关键词 专业化经营 邮政 县域 业务 EMS 市场 国际 竞争
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