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ETS-2转录因子与启动子的+1^+40区结合是肝癌相关基因HCCS1的转录所必需
1
作者
王鹏
毛
大
芩
+1 位作者
蓝斐
朱景德
《肿瘤》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期407-413,共7页
目的:阐明HCCS1基因启动子的转录调控机制。方法:引物延伸法确定HCCS1基因的转录起始点,通过限制性内切酶酶切介导对HCCS1基因全长启动子做进行性的5'缺失,用瞬时转染/双荧光素酶报告系统确定最小启动子,连接体扫描突变分析来确定...
目的:阐明HCCS1基因启动子的转录调控机制。方法:引物延伸法确定HCCS1基因的转录起始点,通过限制性内切酶酶切介导对HCCS1基因全长启动子做进行性的5'缺失,用瞬时转染/双荧光素酶报告系统确定最小启动子,连接体扫描突变分析来确定启动子功能的关键顺式序列区,电泳迁移率实验并附以抗体介导超迁移实验来确定关键的反式因子。结果:HCCS1基因的转录起始点被定位于-177/-178处的C残基(ATG为+1)。最小启动子位于-60^+148区(转录起始点为+1)之中。在关键的调控区(+1^+40)所含的已知顺式序列中有2个ETS转录因子识别序列,而不是p53或NF-κB,识别序列与其相应的转录因子(ETS-2)的结合有着重要的功能内涵。结论:ETS-2转录因子与启动子的+1^+40区中相应的顺式序列结合,在肝癌相关基因HCCS1的转录活性中起着关键作用。
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关键词
肝肿瘤
癌
肝细胞
基因表达调控
基因
肿瘤抑制
基因
HCCS1
SMMC-7721细胞
下载PDF
职称材料
人蛋白激酶Bγ基因的cDNA克隆、组织表达谱分析及染色体定位
2
作者
蓝斐
余龙
+5 位作者
胡培蓉
毛
大
芩
李晓泉
张民
黄海
赵寿元
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2000年第10期1009-1017,共9页
蛋白激酶B(PKB)是受第二信使调控的一类蛋白激酶,在细胞周期调控、葡萄糖吸收和促进细胞分化等生命活动中具有重要作用由于其活性在某些人类肿瘤组织中有明显提高,且参与了Ras信号传导通路,提示其在某些肿瘤的形成过程中起...
蛋白激酶B(PKB)是受第二信使调控的一类蛋白激酶,在细胞周期调控、葡萄糖吸收和促进细胞分化等生命活动中具有重要作用由于其活性在某些人类肿瘤组织中有明显提高,且参与了Ras信号传导通路,提示其在某些肿瘤的形成过程中起介导作用以小鼠Pkbγ基因的核苷酸序列为探针,用同源筛选方法,从人肝cDNA文库中步移获得一个长1998bp的cDNA片段,包含一段长1440 bp的ORF,它编码了 479个氨基酸残基.而后用“电子步移”筛选法,将该cDNA的3’端延伸至2 788 bp,并用 PCR扩增法予以证实.该基因与已知的人PKBα, β的氨基酸序列的同源度分别高达83%和78%.表达谱分析发现该基因有两个转录本,其表达丰度基本相同,大小分别为 6.5和8.5 kb.该基因在人脑组织中表达量最高,在另15种组织也有不同量的表达.经过 RH制图分析,发现人PKBγ基因位于染色体1q43区带的D1S304和D1S2693位标之间,这对于候选克隆已连锁定位于该区带的前列腺癌,右心室扩张性心肌病, NK细胞缺陷和甲状旁腺功能减退性身材矮小、智力低下及癫痫发作综合征等疾病基因亦将具有重要的参考价值。
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关键词
蛋白激酶Bγ基因
CDNA克隆
组织表达谱
染色体
原文传递
题名
ETS-2转录因子与启动子的+1^+40区结合是肝癌相关基因HCCS1的转录所必需
1
作者
王鹏
毛
大
芩
蓝斐
朱景德
机构
复旦大学上海医学院
上海交通大学肿瘤研究所癌基因与相关基因国家重点实验室
出处
《肿瘤》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期407-413,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30450001)
国家973计划项目(编号:2004CB518804)
+1 种基金
国家863计划项目(编号:2002AA2Z3352)
上海市科学技术委员会基金(编号:04DZ14006)
文摘
目的:阐明HCCS1基因启动子的转录调控机制。方法:引物延伸法确定HCCS1基因的转录起始点,通过限制性内切酶酶切介导对HCCS1基因全长启动子做进行性的5'缺失,用瞬时转染/双荧光素酶报告系统确定最小启动子,连接体扫描突变分析来确定启动子功能的关键顺式序列区,电泳迁移率实验并附以抗体介导超迁移实验来确定关键的反式因子。结果:HCCS1基因的转录起始点被定位于-177/-178处的C残基(ATG为+1)。最小启动子位于-60^+148区(转录起始点为+1)之中。在关键的调控区(+1^+40)所含的已知顺式序列中有2个ETS转录因子识别序列,而不是p53或NF-κB,识别序列与其相应的转录因子(ETS-2)的结合有着重要的功能内涵。结论:ETS-2转录因子与启动子的+1^+40区中相应的顺式序列结合,在肝癌相关基因HCCS1的转录活性中起着关键作用。
关键词
肝肿瘤
癌
肝细胞
基因表达调控
基因
肿瘤抑制
基因
HCCS1
SMMC-7721细胞
Keywords
Liver neoplasms
Carcinoma, hepatocellular
Gene expression regulation
Genes, tumor suppression
Genes, HCCS1
SMMC-7221 cells
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
R730.231 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
人蛋白激酶Bγ基因的cDNA克隆、组织表达谱分析及染色体定位
2
作者
蓝斐
余龙
胡培蓉
毛
大
芩
李晓泉
张民
黄海
赵寿元
机构
复旦大学生命科学学院遗传学研究所遗传工程国家重点实验室
出处
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2000年第10期1009-1017,共9页
基金
国家杰出青年基金!(批准号:39525015)
国家自然科学基金!(批准号:39680019)
国家"八六三"高技术计划!(8
文摘
蛋白激酶B(PKB)是受第二信使调控的一类蛋白激酶,在细胞周期调控、葡萄糖吸收和促进细胞分化等生命活动中具有重要作用由于其活性在某些人类肿瘤组织中有明显提高,且参与了Ras信号传导通路,提示其在某些肿瘤的形成过程中起介导作用以小鼠Pkbγ基因的核苷酸序列为探针,用同源筛选方法,从人肝cDNA文库中步移获得一个长1998bp的cDNA片段,包含一段长1440 bp的ORF,它编码了 479个氨基酸残基.而后用“电子步移”筛选法,将该cDNA的3’端延伸至2 788 bp,并用 PCR扩增法予以证实.该基因与已知的人PKBα, β的氨基酸序列的同源度分别高达83%和78%.表达谱分析发现该基因有两个转录本,其表达丰度基本相同,大小分别为 6.5和8.5 kb.该基因在人脑组织中表达量最高,在另15种组织也有不同量的表达.经过 RH制图分析,发现人PKBγ基因位于染色体1q43区带的D1S304和D1S2693位标之间,这对于候选克隆已连锁定位于该区带的前列腺癌,右心室扩张性心肌病, NK细胞缺陷和甲状旁腺功能减退性身材矮小、智力低下及癫痫发作综合征等疾病基因亦将具有重要的参考价值。
关键词
蛋白激酶Bγ基因
CDNA克隆
组织表达谱
染色体
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
ETS-2转录因子与启动子的+1^+40区结合是肝癌相关基因HCCS1的转录所必需
王鹏
毛
大
芩
蓝斐
朱景德
《肿瘤》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
下载PDF
职称材料
2
人蛋白激酶Bγ基因的cDNA克隆、组织表达谱分析及染色体定位
蓝斐
余龙
胡培蓉
毛
大
芩
李晓泉
张民
黄海
赵寿元
《科学通报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2000
0
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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