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微管结合蛋白tau互作蛋白的筛选
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作者 王雄雄 张圣权 +1 位作者 孙静 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第2期158-166,共9页
Tau作为微管相关蛋白,对微管的稳定具有重要作用。为了在体内找到与tau互作的基因,我们以具有粗糙眼的tau高表达果蝇为模型,进行遗传学筛选。以具有粗糙眼的tau高表达果蝇为背景,采用RNA干扰手段来下调前期肌肉系统筛选出具有微管异常... Tau作为微管相关蛋白,对微管的稳定具有重要作用。为了在体内找到与tau互作的基因,我们以具有粗糙眼的tau高表达果蝇为模型,进行遗传学筛选。以具有粗糙眼的tau高表达果蝇为背景,采用RNA干扰手段来下调前期肌肉系统筛选出具有微管异常表型的基因,观察粗糙眼的变化,从而找出与tau互作的候选基因。发现雌雄果蝇有粗糙眼表型的有11株。为了研究粗糙眼表型是否对发育造成影响,通过免疫染色观察眼睛的成虫盘凋亡。发现在11株粗糙眼表型中有5株凋亡细胞数量增加,1株凋亡细胞数量减少,其他无变化。同时,我们对粗糙眼增强的基因型进行睡眠监测,发现有一株RNAi对于光线改变不敏感。因此,我们猜测该基因可能与tau有互作,这对我们找出新的微管调控因子提供了依据。 展开更多
关键词 TAU 微管 粗糙眼 凋亡 睡眠监测 果蝇
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微管剪切蛋白Fidgetin在黑腹果蝇神经发育过程中的功能初探 被引量:2
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作者 王其霖 王珊 +2 位作者 李港 金珊 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2020年第5期484-490,共7页
微管(microtubule,MT)是一种具有极性的细胞骨架.在微管动态变化过程中,有两类蛋白参与微管组装和解聚的动态调节.Fidgetin(Fign)的编码基因为CG3326,它是其中的去组装因子之一,参与微管剪切和末端解聚.本实验使用CRISPR/Cas9系统,构建f... 微管(microtubule,MT)是一种具有极性的细胞骨架.在微管动态变化过程中,有两类蛋白参与微管组装和解聚的动态调节.Fidgetin(Fign)的编码基因为CG3326,它是其中的去组装因子之一,参与微管剪切和末端解聚.本实验使用CRISPR/Cas9系统,构建fidgetin无功能突变体果蝇品系(fidgetin^null),观察fidgetin功能缺失对果蝇的神经发育的影响.结果表明fidgetin^M14-2会导致神经肌肉突触(neuromuscular junction,NMJ)的扣结数增多.通过观察fidgetin^M14-2的表型从而初步判断fidgetin基因对神经系统发育的影响,为fidgetin基因功能与致病机制的进一步研究提供基础. 展开更多
关键词 微管 CRISPR/Cas9系统 Fidgetin
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用CRISPR/Cas9系统构建原位表达d XPR1-GFP的果蝇品系 被引量:2
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作者 李云鹏 胡君成 +2 位作者 牛晓晓 金珊 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第3期241-245,共5页
XPR1是最近鉴定出的一个原发性家族性脑钙化症(primary familial brian calcification,PFBC)的致病基因,它在果蝇体内的同源基因是CG10483(dXPR1).使用CRISPR/Cas9系统,构建原位表达dXPR1-GFP的果蝇品系,在CG10483终止密码子之前插入绿... XPR1是最近鉴定出的一个原发性家族性脑钙化症(primary familial brian calcification,PFBC)的致病基因,它在果蝇体内的同源基因是CG10483(dXPR1).使用CRISPR/Cas9系统,构建原位表达dXPR1-GFP的果蝇品系,在CG10483终止密码子之前插入绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的编码序列,使果蝇表达dXPR1-GFP融合蛋白.该融合蛋白既可以被CG10483编码蛋白的抗体和GFP的抗体识别又能在激发光下发出绿色荧光,能为dXPR1编码蛋白提供准确的定位,从而为研究XPR1基因的功能提供方便. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9系统 XPR1 GFP
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Klotho调控果蝇幼虫的运动行为
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作者 李港 胡君成 +2 位作者 刘志华 金珊 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第2期223-228,共6页
klotho基因在人体内行使诸多重要功能,其在延长寿命、改善肾脏功能和缓解神经退行性疾病等方面都具有一定的作用,但其作用机制目前尚不明确.在果蝇中,人类klotho的同源基因为CG9701(klotho),目前与之相关的研究较少.本实验通过CRISPR/C... klotho基因在人体内行使诸多重要功能,其在延长寿命、改善肾脏功能和缓解神经退行性疾病等方面都具有一定的作用,但其作用机制目前尚不明确.在果蝇中,人类klotho的同源基因为CG9701(klotho),目前与之相关的研究较少.本实验通过CRISPR/Cas9技术构建CG9701的无功能突变体klF13-3.klF13-3表现出运动速率降低,翻滚时间延长,但其运动轨迹正常,提示klotho主要在果蝇幼虫肌肉系统中发挥作用.我们的结果为后续klotho基因功能和调控机制的研究提供基础. 展开更多
关键词 KLOTHO CRISPR/Cas9 运动行为
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果蝇微管互作蛋白的大规模筛选研究
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作者 王珊 王雄雄 +2 位作者 金珊 刘志华 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 2023年第5期657-663,共7页
微管是一种具有极性的、管状的细胞内动态结构,是细胞骨架的重要组分.一些跟微管相关的基因发生突变时,有可能致使严重的人类疾病的发生.这些相关基因编码的蛋白即为微管互作蛋白.影响微管的基因众多,目前发现的影响微管正常组装的蛋白... 微管是一种具有极性的、管状的细胞内动态结构,是细胞骨架的重要组分.一些跟微管相关的基因发生突变时,有可能致使严重的人类疾病的发生.这些相关基因编码的蛋白即为微管互作蛋白.影响微管的基因众多,目前发现的影响微管正常组装的蛋白还只是冰山一角,仍有诸多影响微管的互作蛋白等待人类“挖掘”.我们利用已有的果蝇RNAi文库,通过UAS/Gal4系统,对部分基因进行敲减(RNAi),使基因在果蝇幼虫肌肉中特异性沉默,经过免疫染色后观察这些基因功能敲降果蝇的肌肉微管形态,以此来筛选微管互作蛋白.我们共鉴定了541个基因,筛选出微管有表型的40个.其中一些基因在线粒体、内质网、高尔基体、过氧化物酶体等细胞器中具有特定的功能.因此,我们的筛选工作不仅为构建微管相关疾病模型提供了铺垫,为微管相关疾病治疗工作提供了一定的帮助;而且对细胞结构中微管的非中心体微管组织中心探究提供了思路. 展开更多
关键词 微管 互作蛋白 筛选 疾病
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高校细胞生物学翻转课堂的教学探究
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作者 《课程教育研究(学法教法研究)》 2019年第15期18-18,共1页
细胞生物学是一门发展迅猛的生命科学基础学科,是现代生命科学的前沿学科。为了提升课堂教学效率,并培养创新型人才,翻转课堂的运用显得尤为重要。通过翻转课堂教学,培养学生的主观能动性,促进学生对微观抽象知识的理解,建立学生对科学... 细胞生物学是一门发展迅猛的生命科学基础学科,是现代生命科学的前沿学科。为了提升课堂教学效率,并培养创新型人才,翻转课堂的运用显得尤为重要。通过翻转课堂教学,培养学生的主观能动性,促进学生对微观抽象知识的理解,建立学生对科学研究的浓厚兴趣和创新精神。 展开更多
关键词 高等教育 细胞生物学 翻转课堂
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