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血红素氧化酶1调控巨噬细胞极化对动脉粥样硬化的影响 被引量：4
1
作者 毕颖超 鲜雪梅 +6 位作者 王珍珍 门燕娟 常佳佳 陈全刚 韩旭峰 陈仁金 郑葵阳 《徐州医科大学学报》 CAS 2020年第4期255-260,共6页
目的探讨血红素氧化酶1(HO-1)调节巨噬细胞对动脉粥样硬化的作用。方法100 mg/L脂多糖(LPS)和20 mg/L白介素4(IL-4)分别诱导RAW264.7细胞24 h,提取信使核糖核酸(mRNA)和蛋白,实时定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测LPS和IL-4诱导后巨噬... 目的探讨血红素氧化酶1(HO-1)调节巨噬细胞对动脉粥样硬化的作用。方法100 mg/L脂多糖(LPS)和20 mg/L白介素4(IL-4)分别诱导RAW264.7细胞24 h,提取信使核糖核酸(mRNA)和蛋白,实时定量聚合酶链式反应法(RT-qPCR)检测LPS和IL-4诱导后巨噬细胞中HO-1、CD163和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测LPS和IL-4诱导巨噬细胞后HO-1蛋白表达。大体油红O染色检测载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠喂食高脂饮食后主动脉斑块面积变化,RT-qPCR和Western blot检测主动脉中HO-1 mRNA和蛋白表达。组织免疫荧光检测HO-1在主动脉窦部斑块中与促炎型(M1)和抑炎型(M2)巨噬细胞的共定位表达。结果LPS和IL-4成功诱导巨噬细胞分化为M1型与M2型巨噬细胞;IL-4诱导巨噬细胞中HO-1表达显著高于LPS及对照组(P<0.05);动脉粥样硬化模型构建成功;HO-1在ApoE-/-小鼠中表达显著高于C57BL/6对照组(P<0.05),主动脉窦中HO-1与CD206的共定位表达显著高于HO-1与CD86。结论HO-1在M2型巨噬细胞中的表达显著高于M1型巨噬细胞,在动脉硬化发展中起保护作用。 展开更多
关键词 血红素氧化酶1 巨噬细胞 极化 动脉粥样硬化 小鼠
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真核起始因子6调控转化生长因子β1对动脉粥样硬化的影响 被引量：1
2
作者 杨帅 黄欣兴 +4 位作者 孙雪梅 鲜雪梅 毕颖超 常佳佳 陈仁金 《现代医药卫生》 2021年第10期1629-1631,共3页
目的探讨真核起始因子6(eIF6)调控转化生长因子β1(TGF-β1)对小鼠动脉粥样硬化的影响。方法将RAW264.7细胞分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、脂多糖(LPS)组和白细胞介素4(IL-4)组,定量PCR测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核... 目的探讨真核起始因子6(eIF6)调控转化生长因子β1(TGF-β1)对小鼠动脉粥样硬化的影响。方法将RAW264.7细胞分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、脂多糖(LPS)组和白细胞介素4(IL-4)组,定量PCR测M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞化学趋化蛋白(MCP-1)及M2型巨噬细胞标志物(CD163、Arg-1)及TGF-β1 mRNA表达。定量PCR和Western blotting检测TGF-β1在M1/M2型巨噬细胞中mRNA和蛋白的表达。在ApoE^(-/-)和ApoE^(-/-)/eIF6^(+/-)小鼠动脉粥样硬化模型,定量PCR检测小鼠腹主动脉中TGF-β1、IL-6、MCP-1和Arg-1 mRNA的表达。结果与PBS组比较,IL-4诱导后,细胞中CD163和Arg-1表达显著增加;LPS诱导后,细胞中iNOS和MCP-1表达显著增加。TGF-β1在M2型巨噬细胞中表达显著高于M1型巨噬细胞。eIF6慢病毒过表达转染细胞后,TGF-β1 mRNA在eIF6过表达细胞中表达水平显著下降(P<0.05)。ApoE^(-/-)/eIF6^(+/-)小鼠主动脉中TGF-β1和Arg-1 mRNA表达较ApoE^(-/-)小鼠显著升高;MCP-1和IL-6 mRNA表达显著降低。结论eIF6通过调节TGF-β1表达影响巨噬细胞极化,影响动脉粥样硬化发展。 展开更多
关键词 真核起始因子6 转化生长因子Β1 巨噬细胞极化 动脉粥样硬化
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猪MOV10基因克隆表达及其对PRRSV增殖的影响
3
作者 门燕娟 陈仁金 +7 位作者 韩旭峰 鲜雪梅 毕颖超 王妍 常佳佳 王艺 陈全刚 郑葵阳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第9期5-8,14,166,共6页
为了研究猪MOV10基因功能及其在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染过程中的作用,试验成功克隆出猪MOV10基因并进行序列比对,在细胞水平上过表达猪MOV10基因并检测其在细胞中的表... 为了研究猪MOV10基因功能及其在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染过程中的作用,试验成功克隆出猪MOV10基因并进行序列比对,在细胞水平上过表达猪MOV10基因并检测其在细胞中的表达和定位,通过双荧光报告系统检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测猪MOV10基因诱导Ⅰ型干扰素的表达,以及Western-blot和空斑试验检测MOV10基因对PRRSV增殖的影响。结果表明:猪MOV10基因氨基酸序列与人MOV10基因的同源性为92.1%,猪MOV10基因能在细胞中表达,且为胞浆定位蛋白;PK-15细胞过表达猪MOV10基因可诱导IFN-β的表达,Marc-145细胞过表达猪MOV10基因可显著抑制PRRSV的增殖。说明猪的免疫系统与人的相似度较高,有可能成为研究人类免疫更好的动物模型,MOV10基因可抑制PRRSV的增殖,也为PRRSV防治药物的开发提供了新药物靶标。 展开更多
关键词 猪MOV10基因 RNA解旋酶 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 分子克隆 病毒增殖 β干扰素(IFN-β)
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真核起始因子4E对小鼠动脉粥样硬化发生、发展的炎症调节作用
4
作者 鲜雪梅 毕颖超 +6 位作者 王珍珍 门燕娟 常佳佳 陈全刚 韩旭峰 郑葵阳 陈仁金 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第23期1-5,共5页
目的探讨真核起始因子4E(eIF4E)在小鼠动脉粥样硬化发生、发展过程中的炎症调节作用。方法分别用200 ng/μl脂多糖(LPS)和20 ng/μl白细胞介素-4(IL-4)诱导RAW264.7细胞12 h后提取mRNA,24 h后提取蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT... 目的探讨真核起始因子4E(eIF4E)在小鼠动脉粥样硬化发生、发展过程中的炎症调节作用。方法分别用200 ng/μl脂多糖(LPS)和20 ng/μl白细胞介素-4(IL-4)诱导RAW264.7细胞12 h后提取mRNA,24 h后提取蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting检测eIF4E mRNA和蛋白在M1型和M2型巨噬细胞中的表达变化。复制ApoE^-/-动脉粥样硬化小鼠模型,检测小鼠腹主动脉eIF4E mRNA和蛋白表达变化;组织免疫荧光检测eIF4E在主动脉根部中分别与M1型和M2型巨噬细胞中的共表达。结果M1型巨噬细胞eIF4E mRNA和蛋白表达高于M2型巨噬细胞(P<0.05)。在ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化模型中,ApoE^-/-小鼠腹主动脉eIF4E mRNA和蛋白表达高于C57BL/6J小鼠(P<0.05);eIF4E与CD86的共定位表达高于eIF4E与CD206的共定位表达。结论eIF4E在动脉粥样硬化的发展过程中主要在M1型巨噬细胞中起作用,进而对动脉粥样硬化产生影响。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 真核起始因子4E M1型巨噬细胞 M2型巨噬细胞
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