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吉林省规模化猪场断奶仔猪大肠杆菌分离鉴定与耐药表型及耐药基因检测 被引量：7
1
作者 冀亚路 姜秋杰 +8 位作者 袭恒豫 张昊 毕斓婷 陈椿桦 付殿国 孙长江 冯新 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2357-2363,共7页
为了解"禁抗"前吉林省不同地区规模化生猪养殖场耐药现状以及耐药基因存在情况,本研究对吉林省20个市(县)35个规模化生猪养殖场断奶仔猪的粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定、药物敏感性测定以及耐药基因检测,共采集粪便样本1144... 为了解"禁抗"前吉林省不同地区规模化生猪养殖场耐药现状以及耐药基因存在情况,本研究对吉林省20个市(县)35个规模化生猪养殖场断奶仔猪的粪便样本进行大肠杆菌分离鉴定、药物敏感性测定以及耐药基因检测,共采集粪便样本1144份(994份腹泻粪便样本,150份健康粪便样本),通过平板划线、16S rRNA测序以及生化鉴定,共分离到892株大肠杆菌,总分离率为77.97%。药物敏感性测定结果表明,大肠杆菌分离株存在严重的多重耐药性,其中对β-内酰胺类、大环内酯类、四环素类、磺胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类以及氯霉素类抗生素耐药率较高。相比之下,大肠杆菌分离株对头孢类和多磷类抗生素耐药率较低,未发现多黏菌素耐药菌株。对不同猪场的175株大肠杆菌分离株进行耐药基因检测,共检出15种耐药基因,bla;(30.85%)、floR(57.14%)、aac(3)-Ⅰb(36.57%)、ant(3)-Ⅰa(66.28%)、aac(3)-Ⅱb(40.57%)、sulⅠ(37.71%)以及aac(6)-Ⅰb(41.71%)检出率较高。其中,含有2类以上抗生素耐药基因的大肠杆菌比例高达82.28%(144/175)。本研究结果表明,吉林省猪场大肠杆菌存在严重的多重耐药性,并携带多种耐药基因,为临床用药、进一步研究大肠杆菌耐药分子机制以及"禁抗"前了解吉林省大肠杆菌耐药情况提供依据。 展开更多
关键词 断奶仔猪 大肠杆菌 耐药性 耐药基因
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仔猪致泻性大肠杆菌毒力因子多重PCR检测方法的建立与应用 被引量：5
2
作者 毕斓婷 冀亚路 +10 位作者 袭恒豫 张昊 陈椿桦 姜秋杰 付殿国 牛伟 孙长江 冯新 吕伟 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期250-255,共6页
本研究以致泻性大肠杆菌(DEC)的4种毒力因子EAST1、LT、STa和STb为模板设计特异性引物并优化各项反应条件,以建立仔猪DEC的多重PCR检测方法。该方法具有较好的特异性,只对DEC产生特异性条带,对非DEC及其他病菌则呈阴性。利用所建立的多... 本研究以致泻性大肠杆菌(DEC)的4种毒力因子EAST1、LT、STa和STb为模板设计特异性引物并优化各项反应条件,以建立仔猪DEC的多重PCR检测方法。该方法具有较好的特异性,只对DEC产生特异性条带,对非DEC及其他病菌则呈阴性。利用所建立的多重PCR方法对吉林省各猪场采集的样本进行检测,结果表明,在测定的猪场中,携带EAST1毒力基因的阳性菌株引起的大肠杆菌感染广泛存在,携带STb毒力基因的阳性菌株次之,携带STa及LT毒力基因的阳性菌株引起的大肠杆菌感染相较于以上2个毒力因子在所测猪场中占比略低。综上所述,本方法的建立为DEC中常见毒力因子的快速检测及分子流行病学调查提供了新的手段。 展开更多
关键词 致泻性大肠杆菌 毒力因子 多重PCR
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吉林省规模化猪场断奶仔猪金黄色葡萄球菌和肠球菌的分离鉴定和耐药性分析
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作者 冀亚路 姜秋杰 +8 位作者 袭恒豫 张昊 毕斓婷 牛伟 付殿国 孙长江 冯新 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期40-45,共6页
为了解吉林省不同地区规模化生猪养殖场金黄色葡萄球菌和肠球菌的耐药情况,本试验对采自吉林省7个市(县)共20个规模化生猪养殖场的断奶仔猪粪便样本(420份)进行了金黄色葡萄球菌和肠球菌的分离鉴定和药物敏感性测定。结果显示,共分离到9... 为了解吉林省不同地区规模化生猪养殖场金黄色葡萄球菌和肠球菌的耐药情况,本试验对采自吉林省7个市(县)共20个规模化生猪养殖场的断奶仔猪粪便样本(420份)进行了金黄色葡萄球菌和肠球菌的分离鉴定和药物敏感性测定。结果显示,共分离到96株金黄色葡萄球菌和224株肠球菌,分离率分别为22.86%和53.33%。20种抗菌药物敏感性测定结果显示,猪源金黄色葡萄球菌对红霉素和四环素耐药最严重,耐药率均达到95.65%,对磷霉素敏感;猪源肠球菌对红霉素、复方新诺明、磺胺异噁唑、四环素、头孢他啶、多西环素和多黏菌素表现出高耐药率,耐药率均在90.00%以上,对磷霉素耐药率最低,仅为3.13%。多重耐药种数统计结果显示,金黄色葡萄球菌分离株至少耐3种抗菌药物,多重耐药种数在3~16种均有分布;肠球菌分离株至少耐5种抗菌药物,多重耐药种数在5~17种均有分布。结果表明,吉林省规模化猪场金黄色葡萄球菌和肠球菌均存在严重的多药耐药性,为吉林省金黄色葡萄球菌和肠球菌耐药情况和临床合理用药提供了参考依据。 展开更多
关键词 断奶仔猪 金黄色葡萄球菌 肠球菌 耐药性
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拮抗金黄色葡萄球菌的细菌分离及其作用机制 被引量：1
4
作者 张昊 袭恒豫 +7 位作者 毕斓婷 赵日虹 冀亚路 王心舞 薛一冰 王子晶 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期730-734,共5页
细菌耐药性问题越来越严重,迫切需要研发新型抗菌药物。而拮抗性细菌可以产生抗菌活性物质,在对抗耐药性细菌方面具有潜力。本研究以耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌USA300为指示菌,从污水中分离并纯化得到1株拮抗性菌株H223,通过16S rRNA... 细菌耐药性问题越来越严重,迫切需要研发新型抗菌药物。而拮抗性细菌可以产生抗菌活性物质,在对抗耐药性细菌方面具有潜力。本研究以耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌USA300为指示菌,从污水中分离并纯化得到1株拮抗性菌株H223,通过16S rRNA测序结果显示属于芽孢杆菌属,H223对指示菌USA300表现出较高的抑菌活性,并对葡萄球菌属均表现出不同程度的抑菌效果。对H223发挥抑菌活性物质进行研究,确认其存在于培养上清中。在液体培养基中静置培养36 h抑菌活性最强,最后结合超滤管和蛋白酶K处理判断H223培养上清中的抑菌活性物质为非蛋白类小分子。综上所述,该研究获得的拮抗性菌株H223培养物具有显著拮抗耐药性金黄色葡萄球菌作用,为新型抑菌成分的进一步研究和应用奠定基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 拮抗性细菌 芽孢杆菌 培养上清 抑菌作用
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浅绿色气球菌噬菌体vB_AviM_AVP编码蛋白的表达纯化和功能分析
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作者 张昊 袭恒豫 +6 位作者 毕斓婷 赵日虹 冀亚路 王心舞 王子晶 顾敬敏 韩文瑜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1558-1563,共6页
根据已报道的全球首个浅绿色气球菌噬菌体vB_AviM_AVP的基因组,通过比对分析对各个开放阅读框功能的预测,从中选取以下除裂解酶AVPL外可能具有裂解活性的蛋白基因ORF86、ORF90、ORF94、ORF98进行原核表达与纯化。试验表明,LysORF86、Lys... 根据已报道的全球首个浅绿色气球菌噬菌体vB_AviM_AVP的基因组,通过比对分析对各个开放阅读框功能的预测,从中选取以下除裂解酶AVPL外可能具有裂解活性的蛋白基因ORF86、ORF90、ORF94、ORF98进行原核表达与纯化。试验表明,LysORF86、LysORF94和LysORF90可成功表达,但是仅在酶谱试验中对不同细菌表现出了活性;直接平板涂布滴板试验、利用高碘酸以及蛋白酶K处理菌体试验及混合蛋白活性检测试验中,均未表现出活性。本研究为全球首个浅绿色气球菌噬菌体vB_AviM_AVP的进一步研究奠定基础。 展开更多
关键词 噬菌体 裂解酶 浅绿色气球菌
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