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固氮模块在耐辐射异常球菌底盘中的表达特性分析
1
作者
邱雪萌
郑娟
+5 位作者
薛威
毋
少
宇
祁陈
韩月月
燕永亮
战嵛华
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期77-86,共10页
利用生物技术方法将固氮模块转入真核细胞实现真核生物自主固氮具有重大科学意义和应用价值,迄今为止始终未能获得具有自主固氮能力的真核生物。为了探究固氮模块在真核底盘中的表达适配性,以进化地位介于原核生物和真核生物之间的极端...
利用生物技术方法将固氮模块转入真核细胞实现真核生物自主固氮具有重大科学意义和应用价值,迄今为止始终未能获得具有自主固氮能力的真核生物。为了探究固氮模块在真核底盘中的表达适配性,以进化地位介于原核生物和真核生物之间的极端微生物耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)R1为底盘,将类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)WLY78的固氮模块导入耐辐射异常球菌中获得重组耐辐射异常球菌R78,并利用qPCR(quantitative real-time PCR)和Western Blot等方法,同时结合转录组分析,对重组耐辐射异常球菌的表达特性进行探究。结果表明,重组耐辐射异常球菌固氮模块中的9个固氮基因均能够正常转录,但是固氮酶铁蛋白的翻译受到影响;转录组测序结果显示,参与能量传递、氮代谢以及铁硫转运的相关基因的表达变化可能是影响重组菌株中固氮酶表达的限制因子。以上研究结果为进一步的固氮模块设计和微生物底盘优化,并最终构建人工高效固氮装置奠定了理论基础。
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关键词
生物固氮
耐辐射异常球菌
固氮模块
底盘适配
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职称材料
施氏假单胞菌氮代谢调控蛋白GlnK与碳信号分子α-酮戊二酸的体外互作研究
2
作者
王珊珊
毋
少
宇
+4 位作者
刘一超
战嵛华
柯秀彬
陆伟
燕永亮
《生物技术进展》
2021年第1期91-98,共8页
细菌中PⅡ蛋白是一类氮代谢调控因子,可通过感知胞内碳氮信号变化调整自身与靶蛋白的相互作用,从而实现对下游基因的级联调控。α-酮戊二酸是胞内碳状态的重要信号分子,前期研究发现PⅡ蛋白可结合α-酮戊二酸感应细胞内的碳状态,但不同...
细菌中PⅡ蛋白是一类氮代谢调控因子,可通过感知胞内碳氮信号变化调整自身与靶蛋白的相互作用,从而实现对下游基因的级联调控。α-酮戊二酸是胞内碳状态的重要信号分子,前期研究发现PⅡ蛋白可结合α-酮戊二酸感应细胞内的碳状态,但不同菌中二者的结合存在差异。施氏假单胞菌A1501(Pseudomononas stutzeri A1501)只含有1种PⅡ蛋白GlnK,其在A1501固氮调控中发挥重要作用,但具体碳信号感知与转导机制有待进一步探索。基于此,通过大肠杆菌外源表达GlnK蛋白,并通过微量热泳动(microscale thermophoresis,MST)方法研究GlnK蛋白与碳信号分子α-酮戊二酸的体外互作,发现二者可以体外结合,且进一步证实GlnK蛋白的第89位甘氨酸(G89,Gly89)可能与互作相关。研究结果为进一步解析α-酮戊二酸在A1501中的信号转导奠定了基础,也为深入解析固氮菌的碳氮代谢偶联机制提供了理论支持。
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关键词
施氏假单胞菌A1501
GlnK蛋白
Α-酮戊二酸
分子互作
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职称材料
题名
固氮模块在耐辐射异常球菌底盘中的表达特性分析
1
作者
邱雪萌
郑娟
薛威
毋
少
宇
祁陈
韩月月
燕永亮
战嵛华
机构
中国农业科学院生物技术研究所
出处
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第5期77-86,共10页
基金
国家重点研发计划项目(2019YFA0904702)。
文摘
利用生物技术方法将固氮模块转入真核细胞实现真核生物自主固氮具有重大科学意义和应用价值,迄今为止始终未能获得具有自主固氮能力的真核生物。为了探究固氮模块在真核底盘中的表达适配性,以进化地位介于原核生物和真核生物之间的极端微生物耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)R1为底盘,将类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)WLY78的固氮模块导入耐辐射异常球菌中获得重组耐辐射异常球菌R78,并利用qPCR(quantitative real-time PCR)和Western Blot等方法,同时结合转录组分析,对重组耐辐射异常球菌的表达特性进行探究。结果表明,重组耐辐射异常球菌固氮模块中的9个固氮基因均能够正常转录,但是固氮酶铁蛋白的翻译受到影响;转录组测序结果显示,参与能量传递、氮代谢以及铁硫转运的相关基因的表达变化可能是影响重组菌株中固氮酶表达的限制因子。以上研究结果为进一步的固氮模块设计和微生物底盘优化,并最终构建人工高效固氮装置奠定了理论基础。
关键词
生物固氮
耐辐射异常球菌
固氮模块
底盘适配
Keywords
biological nitrogen fixation
Deinococcus radiodurans
nitrogen-fixing module
chassis adaptation
分类号
Q935 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
施氏假单胞菌氮代谢调控蛋白GlnK与碳信号分子α-酮戊二酸的体外互作研究
2
作者
王珊珊
毋
少
宇
刘一超
战嵛华
柯秀彬
陆伟
燕永亮
机构
中国农业科学院生物技术研究所
出处
《生物技术进展》
2021年第1期91-98,共8页
基金
国家自然科学基金项目(31770067,31930004)
国家重点研发计划项目(2019YFA0904700)
中央级公益性科研院所基本科研业务费项目(Y2020GH04-3)。
文摘
细菌中PⅡ蛋白是一类氮代谢调控因子,可通过感知胞内碳氮信号变化调整自身与靶蛋白的相互作用,从而实现对下游基因的级联调控。α-酮戊二酸是胞内碳状态的重要信号分子,前期研究发现PⅡ蛋白可结合α-酮戊二酸感应细胞内的碳状态,但不同菌中二者的结合存在差异。施氏假单胞菌A1501(Pseudomononas stutzeri A1501)只含有1种PⅡ蛋白GlnK,其在A1501固氮调控中发挥重要作用,但具体碳信号感知与转导机制有待进一步探索。基于此,通过大肠杆菌外源表达GlnK蛋白,并通过微量热泳动(microscale thermophoresis,MST)方法研究GlnK蛋白与碳信号分子α-酮戊二酸的体外互作,发现二者可以体外结合,且进一步证实GlnK蛋白的第89位甘氨酸(G89,Gly89)可能与互作相关。研究结果为进一步解析α-酮戊二酸在A1501中的信号转导奠定了基础,也为深入解析固氮菌的碳氮代谢偶联机制提供了理论支持。
关键词
施氏假单胞菌A1501
GlnK蛋白
Α-酮戊二酸
分子互作
Keywords
Pseudomonas stutzeri A1501
GlnK protein
α-ketoglutarate
interaction
分类号
Q945.13 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
固氮模块在耐辐射异常球菌底盘中的表达特性分析
邱雪萌
郑娟
薛威
毋
少
宇
祁陈
韩月月
燕永亮
战嵛华
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
施氏假单胞菌氮代谢调控蛋白GlnK与碳信号分子α-酮戊二酸的体外互作研究
王珊珊
毋
少
宇
刘一超
战嵛华
柯秀彬
陆伟
燕永亮
《生物技术进展》
2021
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
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引证文献
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