期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到448篇文章
< 1 2 … 23 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
从疑似猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒 被引量：61
1
作者 王新平 涂长春 +7 位作者 李红卫 金扩世 宣华 常国权 孙红梅 朱维正 费恩阁 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第4期341-345,共5页
根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株和猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株的核苷酸序列，设计合成了１对ＢＶＤＶ引物和３对ＨＣＶ引物。以从吉林、长春、哲盟３个地区经临床及病理学诊断为猪瘟的病料中提取的ＲＮＡ为模板，采... 根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株和猪瘟病毒（ＨＣＶ）Ａｌｆｏｒｔ株的核苷酸序列，设计合成了１对ＢＶＤＶ引物和３对ＨＣＶ引物。以从吉林、长春、哲盟３个地区经临床及病理学诊断为猪瘟的病料中提取的ＲＮＡ为模板，采用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ），分别以ＢＶＤＶ和ＨＣＶ引物进行扩增。结果，用ＢＶＤＶ引物从哲盟地区的疑似猪瘟病料中扩增出大小约４００ｂｐ的片段，而用３对ＨＣＶ引物在不同的条件下均未从该病料中扩增出相应大小的ＨＣＶ基因片段。此外，用ＨＣＶ的ＰＥ０／ＰＥ４引物从吉林、长春的病料中扩增出了ＨＣＶ的基因片段，但用ＢＶＤＶ引物从这两个地区的病料中均未扩增出ＢＶＤＶ的基因片段。从哲盟疑似猪瘟病料中扩增出的片段经克隆、序列测定及计算机分析证实，该片段的核苷酸序列和氨基酸序列与ＢＶＤＶ的同源性明显高于与ＨＣＶ的同源性。将哲盟病料接种于ＭＤＢＫ传代细胞，出现典型而规律的ＢＶＤＶ样细胞病变。由此证明。 展开更多
关键词 猪瘟 牛 腹泻病毒 聚合酶链反应
下载PDF
猪瘟病毒E2基因真核表达质粒的构建及基因疫苗的研究 被引量：50
2
作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李红卫 陈创夫 李作生 马正海 孙明 殷震 《中国病毒学》 CSCD 2000年第3期264-271,共8页
构建了猪瘟病毒 (classicalswinefevervirus,CSFV)主要保护性抗原E2基因 4种不同的真核表达质粒。小鼠免疫试验表明 ,E2基因上不同的功能区对基因疫苗的免疫应答有很大影响 ,有信号肽序列的E2基因可诱导产生特异性免疫反应 ,且无跨膜区... 构建了猪瘟病毒 (classicalswinefevervirus,CSFV)主要保护性抗原E2基因 4种不同的真核表达质粒。小鼠免疫试验表明 ,E2基因上不同的功能区对基因疫苗的免疫应答有很大影响 ,有信号肽序列的E2基因可诱导产生特异性免疫反应 ,且无跨膜区序列的E2基因所诱导的免疫应答反应比有跨膜区序列的强 ,而无信号肽序列的E2基因则不能诱导产生CSFV特异性的免疫反应。攻毒保护试验表明 ,免疫家兔最少可抵抗 10个最小感染剂量 (MID)的猪瘟兔化弱毒苗 (Hogcholeralap inizedvirus,HCLV)的攻击 ;免疫猪可抵抗致死剂量的CSFV石门株强毒的攻击。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2基因 真核表达质粒 基因疫苗
下载PDF
以重组mE2蛋白为抗原建立检测猪瘟病毒抗体间接ELISA方法的研究 被引量：45
3
作者 余兴龙 涂长春 +5 位作者 李作生 马正海 李红卫 吴健敏 吕宗吉 殷震 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第3期220-222,共3页
以在Ｅ．ｃｏｌｉ高效表达的猪瘟病毒Ｅ２基因主要抗原编码区（ｍＥ２）为抗原，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的兔抗猪ＩｇＧ为二抗，建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法。经检测筛选出最佳反应条件为：１２μｇ／孔纯化... 以在Ｅ．ｃｏｌｉ高效表达的猪瘟病毒Ｅ２基因主要抗原编码区（ｍＥ２）为抗原，以辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的兔抗猪ＩｇＧ为二抗，建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法。经检测筛选出最佳反应条件为：１２μｇ／孔纯化的Ｅ．ｃｏｌｉ表达的ｍＥ２重组蛋白包被酶标板，用１０％的兔血清或马血清进行封闭，以正常Ｅ．ｃｏｌｉ裂解上清液稀释待检血清。试验表明应用重组ｍＥ２蛋白作为诊断ＨＣＶ抗原具有特异性高、抗原易纯化和成本低等特点。 展开更多
关键词 mE2重组蛋白 猪瘟病毒 抗体 间接ELISA
下载PDF
犬瘟热病毒反转录-聚合酶链反应诊断方法的建立和初步应用 被引量：40
4
作者 李金中 何洪彬 +4 位作者 夏咸柱 殷震 涂长春 金宁一 李佑民 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期180-184,共5页
根据Ｂａｒｅｔ报道的犬瘟热病毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列，设计合成了一对能扩增３２４ｂｐ基因片段的引物。将异硫氰酸胍－酚－仿一步法提取得到的细胞总ＲＮＡ进行反转录，以此产物为模板进行ＰＣＲ扩增... 根据Ｂａｒｅｔ报道的犬瘟热病毒Ｏｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株的融合蛋白基因序列，设计合成了一对能扩增３２４ｂｐ基因片段的引物。将异硫氰酸胍－酚－仿一步法提取得到的细胞总ＲＮＡ进行反转录，以此产物为模板进行ＰＣＲ扩增，并对ＰＣＲ扩增条件进行了优化。经鉴定，以此对引物进行的ＰＣＲ扩增，得到了与设计片段大小和酶切位点相同的产物，且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的三种病原的核酸，这表明此方法为特异性的。对２７条（只）临床病例和３２份细胞培养物进行检查，并与电子显微镜负染检查结果进行了比较。初步应用研究的结果表明，此方法可用于犬瘟热病毒的临床诊断和实验研究。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 反转录 聚合酶链式反应 诊断
下载PDF
我国部分地区猪瘟病毒流行株的基因差异 被引量：23
5
作者 吕宗吉 李红卫 +4 位作者 涂长春 余兴龙 吴健敏 李月红 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期313-316,共4页
采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表... 采用 RT-PCR方法 ,从我国 1 0个省、市、自治区收集的 2 3个猪瘟病毒 ( CSFV)流行毒株中 ,扩增了CSFV E2基因中主要抗原位点编码区。对各扩增片段进行了序列测定 ,通过计算机分析构建了系统发生树 ,并确定了它们间的遗传相关性。结果表明 ,2 3个流行毒株中的 1 8株属基因 群 ,占 78.2 6%;另外 5个流行株与传统石门强毒、兔化弱毒株属基因 群 ,占 2 1 .74 %。两群间测序区的核酸同源性只有 78.90 %。此外 ,根据序列差异程度 ,将基因 群流行株分为 3个亚群 ,各基因群 CSFV在地域分布上未发现有明显的特征性。本研究初步揭示了我国较大范围内流行的 CSFV毒株与传统的石门强毒和疫苗用兔化弱毒在抗原基因上存在较大的差异 。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 RT-PCR 基因差异 疫苗株 流行株
下载PDF
牛病毒性腹泻病毒P125基因重要区的比较与分析 被引量：24
6
作者 王新平 涂长春 +4 位作者 李红卫 宣华 朱维正 费恩阁 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第6期546-553,共8页
根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株的序列，以计算机辅助设计，化学合成１对引物（Ｗ１／Ｗ２）；应用ＲＴ－ＰＣＲ对国内不同地区分离的４株ＢＶＤＶ的Ｐ１２５基因外源序列插入区进行了扩增，并将扩增的片段进行克隆和序列... 根据牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）ＮＡＤＬ株的序列，以计算机辅助设计，化学合成１对引物（Ｗ１／Ｗ２）；应用ＲＴ－ＰＣＲ对国内不同地区分离的４株ＢＶＤＶ的Ｐ１２５基因外源序列插入区进行了扩增，并将扩增的片段进行克隆和序列测定，同时以ＤＮＡＳＩＳ和ＰＲＯＳＩＳ计算机软件将测定的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行比较分析。结果证实，国内分离的４株ＢＶＤＶ在这一区域中既没有外源序列的插入，也没有基因重组、基因重排或基因缺失，但存在某些核苷酸和氨基酸的替换，表明病毒的致细胞病变作用除与外源序列的插入、基因重组、基因重排或基因缺失有关外，可能还存在其他机制。核苷酸序列的同源性及系统树分析的结果表明，国内的ＢＶＤＶ毒株存在Ｉａ和Ｉｂ２个基因亚型。 展开更多
关键词 牛病 腹泻病毒 P125基因 基因型
下载PDF
抗菌肽的特性及其应用前景 被引量：18
7
作者 李恩民 刘维全 殷震 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期209-211,共3页
抗菌肽的特性及其应用前景李恩民刘维全殷震（中国人民解放军农牧大学军事兽医研究所全军基因工程重点实验室，长春１３００６２）中国图书分类号Ｒ９７８．１抗菌肽（ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＡＢＰ）是在诱导条... 抗菌肽的特性及其应用前景李恩民刘维全殷震（中国人民解放军农牧大学军事兽医研究所全军基因工程重点实验室，长春１３００６２）中国图书分类号Ｒ９７８．１抗菌肽（ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＡＢＰ）是在诱导条件下，动物免疫防卫系统产生的一类对... 展开更多
关键词 抗菌肽 抗菌素 理化特性 生物活性
下载PDF
鸡卵清蛋白基因5′调控序列表达载体的构建及其在鸡原代输卵管上皮细胞及鸡成纤维细胞的表达 被引量：18
8
作者 宇丽 赵君 +6 位作者 张艳玲 刘斌 张守峰 王凤阳 赵宝全 扈荣良 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期21-24,共4页
将氯霉素乙酰转移酶 ( CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合 ,构建了 p CAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因 5′调控序列 )表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液 ,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表... 将氯霉素乙酰转移酶 ( CAT)基因与鸡卵清蛋白基因上游调控序列融合 ,构建了 p CAT-3-OVP(鸡卵清蛋白基因 5′调控序列 )表达载体。将构建的载体与脂质体混合后制备转染液 ,转染鸡原代输卵管上皮细胞和鸡成纤维细胞进行瞬时表达。结果表明 ,在鸡原代输卵管上皮细胞 ,转染后 4 8h表达量最高 ,为 0 .67μg/L;而在鸡成纤维细胞 ,不论有无类固醇激素存在 ,均不表达。结果提示 ,在输卵管细胞中存在细胞特异性转录因子。 展开更多
关键词 鸡 卵清蛋白基因 调控序列 表达 载体构建
下载PDF
减蛋综合征病毒pVⅢ基因和E3区序列测定及结构分析 被引量：17
9
作者 李茂祥 金奇 +3 位作者 章金钢 曾力宇 殷震 侯云德 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期27-31,共5页
克隆了减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国分离株基因组ＨｉｎｄⅢ－Ｅ片段，并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央５８．７～６８．９物理图谱单位（ｍｕ），片段全长共３１９４ｂｐ。其中含有１个完整的和２个不完整的开放性读码... 克隆了减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）中国分离株基因组ＨｉｎｄⅢ－Ｅ片段，并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央５８．７～６８．９物理图谱单位（ｍｕ），片段全长共３１９４ｂｐ。其中含有１个完整的和２个不完整的开放性读码框架（ＯＲＦ），分别编码ｐＶⅢ蛋白、１００Ｋ蛋白基因Ｃ端和纤维蛋白Ｎ末端部分。ｐＶⅢ蛋白基因由７５３个碱基（ｎｔ）组成，编码２５０个氨基酸（ａａ），编码产物的分子量为２８５００。氨基酸水平的同源性比较表明，ＥＤＳＶ的ｐＶⅢ蛋白与禽腺病毒１型（ＦＡＶ１）及人和其他动物腺病毒ｐＶⅢ蛋白的同源性为２８％～３６％，而与羊腺病毒（ＯＡＶ）的同源性高达５２％，提示ＥＤＳＶ与ＯＡＶ间的亲缘关系更近。按照人腺病毒基因组结构的特征，在ｐＶⅢ和纤维蛋白基因之间，应为Ｅ３区，但该序列只有２４５个ｎｔ组成，序列中保留了ＴＡＴＡＢｏｘ和ｐｏｌｙＡ信号。但除了２个仅编码４９ａａ和３２ａａ多肽的ＯＲＦｓ外，不编码任何产物，且核苷酸序列与其他腺病毒的Ｅ３区无同源性，证实此区无明显Ｅ３区样结构。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 PVⅢ 蛋白基因 序列分析
下载PDF
人红细胞生成素乳腺特异性表达载体构建及其可行性检验方法的建立 被引量：11
10
作者 阎喜军 乔贵林 +3 位作者 岳军明 梅柱中 赖良学 殷震 《生物技术》 CAS CSCD 1999年第3期42-44,共3页
将大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的上游调控序列与人红细胞生成素基因组ＤＮＡ融合，构建了ｐＷＡＰ－ＥＰＯ－ＷＡＰ３乳腺特异性表达载体，该载体经脂质体包裹后，通过显微外科技术，经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠乳腺中进行表达。经... 将大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的上游调控序列与人红细胞生成素基因组ＤＮＡ融合，构建了ｐＷＡＰ－ＥＰＯ－ＷＡＰ３乳腺特异性表达载体，该载体经脂质体包裹后，通过显微外科技术，经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠乳腺中进行表达。经ＥＬＩＳＡ检测，大鼠乳汁中有ＥＰＯ表达，外周血网织红细胞计数法测定表达的ＥＰＯ具有体内生物活性。 展开更多
关键词 人红细胞生成素 乳腺导管注入法 表达 EPO
下载PDF
hEPO乳腺定位表达载体的构建及其在大鼠和家兔乳腺中的暂时表达 被引量：8
11
作者 乔贵林 阎喜军 +5 位作者 岳军明 梅柱中 赖良学 黄伟民 贾补年 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期7-11,共5页
将人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）基因组ＤＮＡ（ｇＤＮＡ）与大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的上游调控序列融合，分别构建了ｐＷＡＰ－ＥＰＯ－ＷＡＰ３′ＵＴＲ（ｐＷＥ３′）和ｐＣＭＶ－ＷＡＰ－ＥＰＯ－ＢＧＨｐｏｌｙＡ（ｐＣＷＥＡ... 将人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）基因组ＤＮＡ（ｇＤＮＡ）与大鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的上游调控序列融合，分别构建了ｐＷＡＰ－ＥＰＯ－ＷＡＰ３′ＵＴＲ（ｐＷＥ３′）和ｐＣＭＶ－ＷＡＰ－ＥＰＯ－ＢＧＨｐｏｌｙＡ（ｐＣＷＥＡ）２个乳腺定位表达载体。表达载体经脂质体包裹后，以显微外科方法，经乳腺导管注入妊娠中后期大鼠和家兔乳腺内，进行暂时表达。分别于大鼠分娩后４８、７２ｈ，家兔分娩后１～１０ｄ采奶，ＥＬＩＳＡ方法检测乳汁中ＥＰＯ含量。ｐＷＥ３′和ｐＣＷＥＡ在大鼠乳汁中的含量分别为０．４０～０．４５μｇ／Ｌ和０．４５～０．７１μｇ／Ｌ；在家兔乳汁中的含量分别为０．３００～０．３６９μｇ／Ｌ和０．６８６～０．７１０μｇ／Ｌ。 展开更多
关键词 人红细胞生成素 乳腺 基因转移 表达 大鼠 兔
下载PDF
肌注狂犬病病毒糖蛋白cDNA表达载体诱导的小鼠体液免疫反应 被引量：15
12
作者 扈荣良 杜坚 +4 位作者 涂长春 李红卫 殷震 崔青山 侯世宽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1996年第4期321-326,共6页
将狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡＢｇｌⅡ（１．６７ｋｂ）片段分别正向插入ｐｍＭＴ－１ＢｇｌⅡ位点和ｐＭＴ０１０／Ａ＋ＢａｍＨＩ位点，构建重组质粒ｐｍＭＴ－Ｒｇｐ和ｐＭＴ０１０／Ａ＋－Ｒｇｐ，通过磷酸钙共沉淀法转染ＢＨＫ－２... 将狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡＢｇｌⅡ（１．６７ｋｂ）片段分别正向插入ｐｍＭＴ－１ＢｇｌⅡ位点和ｐＭＴ０１０／Ａ＋ＢａｍＨＩ位点，构建重组质粒ｐｍＭＴ－Ｒｇｐ和ｐＭＴ０１０／Ａ＋－Ｒｇｐ，通过磷酸钙共沉淀法转染ＢＨＫ－２１细胞，经ＰＣＲ、打点杂交及ＥＬＩＳＡ检测，证明糖蛋白基因发生了整合并获得表达。以该表达载体给小鼠肌肉内注射２～３次，采其注射前、后双份血清，经ＥＬＩＳＡ检测证明，注射了表达载体的小鼠，血清中病毒特异性抗体明显升高，表明狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡ在小鼠体内表达后。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白 基因免疫 小鼠 抗体
下载PDF
熊猫等动物犬瘟热病毒附着蛋白基因的遗传多样性 被引量：15
13
作者 何洪彬 李金中 +5 位作者 夏咸柱 余春 范泉水 黄耕 邱薇 殷震 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期238-241,共4页
为了研究犬瘟热病毒 (caninedistempervirus,CDV)大熊猫株、小熊猫株和长春犬株附着蛋白 (H)基因的遗传变异 ,对H基因进行了序列测定。上述 3个CDV毒株的H基因全长均为 1946bp ,开放阅读框架 (ORF)始于 2 1～2 3位的ATG ,终止于 1842～ ... 为了研究犬瘟热病毒 (caninedistempervirus,CDV)大熊猫株、小熊猫株和长春犬株附着蛋白 (H)基因的遗传变异 ,对H基因进行了序列测定。上述 3个CDV毒株的H基因全长均为 1946bp ,开放阅读框架 (ORF)始于 2 1～2 3位的ATG ,终止于 1842～ 1844位的TGA ,编码 6 0 7个氨基酸。与GenBank中 15个CDV株推导的H蛋白氨基酸序列比较发现 ,16个野毒株潜在的N -联糖基化位点为 8或 9个 ,而疫苗株Onderstepoort和Convac分别为 4个和 7个 ,其中 30 9～ 311位氨基酸所形成的潜在的糖基化位点是疫苗株没有而野毒株共有的 ,N -联糖基化位点的不同可能影响H蛋白的抗原性。用DNASIS软件分析H基因的系统发生 ,其中野毒株组成一组 ,该组又分成 5个谱系 ,分别为GP、LP、MINK ,2 5 44、40 4、45 13、DANDOG ,A92 - 6、LEOP、JAVE、RACC、AMEDOG ,HAMA、UENO ,GREEN、LIU谱系 ;而疫苗株与野毒株H基因之间存在明显的差异 ,组成了另一组 ,上述结果表明CDVH蛋白基因存在基因型的差别 ,具有广泛的遗传多样性。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒病毒 附着蛋白基因 遗传多样性
下载PDF
两个猪瘟病毒野毒株gp55基因抗原编码区序列的分析及比较 被引量：13
14
作者 李红卫 涂长春 +2 位作者 吕宗吉 金扩世 殷震 《中国病毒学》 CSCD 1997年第4期354-359,共6页
利用反转录－PCR方法扩增了吉林省猪瘟病毒（HCV）两个野毒株gp55基因的主要保护性抗原编码区，并将其克隆到pGEM－T载体中，然后用Sanger双脱氧法测定了其核苷酸序列，并推导了其氨基酸序列。将测定的这两个HCV野毒株的部分序列（350b... 利用反转录－PCR方法扩增了吉林省猪瘟病毒（HCV）两个野毒株gp55基因的主要保护性抗原编码区，并将其克隆到pGEM－T载体中，然后用Sanger双脱氧法测定了其核苷酸序列，并推导了其氨基酸序列。将测定的这两个HCV野毒株的部分序列（350bp）与国内外已知的HCV序列进行比较，结果表明：这两个野毒株的核苷酸序列的同源性为94．9％，氨基酸序列同源性为97．4％，与1985～1992年意大利中部分离4个野毒株的同源性明显高于其它HCV毒株，核苷酸同源性分别为97．2％～98．3％和94.0％～949％，氨基酸同源性分别为98．3％～991％和97.4％～98.3％，而与我国的HCV标准强毒株即石门株的核苷酸同源性仅分别为83.1％和83.1％，氨基酸同源性仅分别为90.6％和91.4％。因此认为吉林省这两个野毒株与意大利中部的4个野毒株具有密切的关系，而与石门株很可能来源不同。 展开更多
关键词 家畜病毒 猪瘟病毒 野毒株 gp55基因 序列分析
下载PDF
应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测Ⅱ.JEV、PPV、PRRSV、PRV单项PCR检测方法的建立 被引量：15
15
作者 孙明 李红卫 +5 位作者 高显明 涂长春 何旭玉 白晓鸿 金宁一 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期10-13,共4页
在利用计算机设计出检测流行性乙型脑炎病毒 ( JEV)、猪细小病毒 ( PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)、猪伪狂犬病病毒 ( PRV)的多联 PCR引物的基础上 ,分别进行各单项 PCR检测相应病毒试验 ,确定了各单项 PCR反应条件范围 ,并对各... 在利用计算机设计出检测流行性乙型脑炎病毒 ( JEV)、猪细小病毒 ( PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)、猪伪狂犬病病毒 ( PRV)的多联 PCR引物的基础上 ,分别进行各单项 PCR检测相应病毒试验 ,确定了各单项 PCR反应条件范围 ,并对各 PCR扩增产物进行了点杂交和部分测序鉴定。用单项 PCR对感染猪相关病毒的检测证实 ,本试验已经建立了有效、特异、敏感的检测 JEV、PPV、PRRSV、PRV的单项 PCR技术 ,为进一步建立多联 展开更多
关键词 JEV PPV PRRSV PRV PCR 猪 繁殖障碍 病毒 检测方法
下载PDF
老虎感染猫传染性鼻-结膜炎病毒的研究 被引量：20
16
作者 范泉水 夏咸柱 +9 位作者 邱薇 黄耕 何洪彬 张建滨 乔军 余春 邹啸环 李金钟 武银莲 殷震 《中国病毒学》 CSCD 2000年第4期373-378,共6页
用猫肾传代细胞从发病虎的病料中分到了一株杯状病毒粒子样病毒。该病毒大小为 35～ 39nm、无囊膜、在胞浆中病毒前体呈晶格状排列 ,抗乙醚、不能被 5 IUDR所抑制 ,能被来源于标准疫苗的猫传染性鼻 结膜炎病毒 (或杯状病毒Felinecalici... 用猫肾传代细胞从发病虎的病料中分到了一株杯状病毒粒子样病毒。该病毒大小为 35～ 39nm、无囊膜、在胞浆中病毒前体呈晶格状排列 ,抗乙醚、不能被 5 IUDR所抑制 ,能被来源于标准疫苗的猫传染性鼻 结膜炎病毒 (或杯状病毒Felinecalicivirus ,FCV)抗血清所中和 ,人工感染猫出现典型的FCV感染症状。RT PCR能扩增出与设计值相符的电泳带 ,PCR产物直接测序结果与Genebank发表的FCV序列比较 ,具有较高的同源性。系统鉴定证明所分离的这株病毒为FCV强毒株 ,从老虎中分到FCV在世界上尚属首次报道。 展开更多
关键词 虎 猫杯状病毒 传染性鼻-结膜炎病毒
下载PDF
新城疫病毒HN蛋白及其基因的分子生物学 被引量：10
17
作者 丁壮 金宁一 殷震 《中国兽医科技》 CSCD 1999年第8期17-21,共5页
新城疫（ＮｅｗｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅ，ＮＤ）是一种在鸡群中具有高度传染性的病毒性传染病，能感染雉、鸽和野生鹦鹉等多种鸟类。目前全世界已分离出致病性不同的ＮＤＶ毒株达数十种之多，不同的毒株致病性差异很大，可分为速发... 新城疫（ＮｅｗｃａｓｔｌｅＤｉｓｅａｓｅ，ＮＤ）是一种在鸡群中具有高度传染性的病毒性传染病，能感染雉、鸽和野生鹦鹉等多种鸟类。目前全世界已分离出致病性不同的ＮＤＶ毒株达数十种之多，不同的毒株致病性差异很大，可分为速发型（Ｖｅｌｏｇｅｎｉｃｓｔｒａｉｎ... 展开更多
关键词 鸡 传染性 病毒性 新城疫 HN蛋白 分子生物学
下载PDF
基因导入的脂质体转染法和磷酸钙转染法之比较 被引量：14
18
作者 李华 刘维全 +1 位作者 王太一 殷震 《中国实验动物学杂志》 2000年第2期65-68,共4页
将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外... 将外源基因导入真核细胞的方法很多。我们通过对绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因在真核细胞中表达的研究 ,比较了较常用的两种方法—脂质体转染法和磷酸钙转染法。研究结果表明 :脂质体转染法的转染效率较磷酸钙转染法高 ,且简单易行 ,是外源基因导入体外培养细胞内较理想的方法。 展开更多
关键词 磷酸钙转染法 脂质体转染法 真核细胞 体外培养细胞 转染效率 研究结果 表达 绿色荧光蛋白(GFP) 报告基因 外源基因
下载PDF
鸡痘病毒282E4株表达载体的构建及新城疫病毒F蛋白的表达 被引量：12
19
作者 郭志儒 金宁一 +6 位作者 王兴龙 金扩世 丁壮 罗坤 方厚华 李萍 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期423-428,共6页
将鸡痘病毒 2 82 E4株 TK基因和 1 .5kb B片段 2个非必需区克隆后 ,分别在 TK基因 Nco 位点和 B片段 Eco R 位点插入复合启动子 (由牛痘病毒 A型包涵体启动子和 2 0个串联的痘苗病毒 ( VV)突变型 p7.5早期启动子串联组成 ) ,然后在复合... 将鸡痘病毒 2 82 E4株 TK基因和 1 .5kb B片段 2个非必需区克隆后 ,分别在 TK基因 Nco 位点和 B片段 Eco R 位点插入复合启动子 (由牛痘病毒 A型包涵体启动子和 2 0个串联的痘苗病毒 ( VV)突变型 p7.5早期启动子串联组成 ) ,然后在复合启动子上游插入单一启动子 (人工合成的由 1 6个串联的 VV突变型p7.5早期启动子组成 )调控的 Lac Z基因或 GFP基因作为报告基因 ,构建成分别以 TK基因或 B片段为侧翼、以复合启动子调控目的基因的 2个以 Lac Z为报告基因的表达载体 p UTA-2 -1 6Lac Z和 p UBA-7-1 6Lac Z,2个以 GFP为报告基因的表达载体 p UTA-2 -F71 6和 p UBA-7-F71 6。在 TK基因 Nco 位点和 B片段 Eco R 位点插入单一启动子和单一启动子调控的 Lac Z基因 ,得到 2个分别以 TK基因或 B片段为侧翼、以单一启动子调控目的基因、以 Lac Z为报告基因的表达载体 p UT1 61 6Lac Z和 p UB1 61 6Lac Z。将构建的 6个表达载体分别转染 FPV HIPRA株感染的鸡胚成纤维 ( CEF)细胞 ,仅在转染以 TK基因为侧翼、以 Lac Z为报告基因的 2个表达载体 p UTA-2 -1 6Lac Z和 p UT1 61 6Lac Z收获的病毒中 ,在 X-gal存在下 ,筛选出了表达 Lac Z的蓝色重组病毒蚀斑 ,而转染以 B片段为侧翼的表达载体在同样条件下未筛选到蓝色病? 展开更多
关键词 鸡痘病毒疫苗 载体构建 新城疫病毒 F蛋白 表达
下载PDF
新城疫病毒F基因在新型杆状病毒表达系统中的表达及重组病毒的免疫原性 被引量：11
20
作者 王兴龙 金宁一 +5 位作者 丁壮 金扩世 米志强 王宏伟 郭志儒 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期533-535,共3页
将新城疫病毒 (四平株 ) F基因插入到 p Fast Bac 质粒中 ,构建了重组质粒 p FF。 p FF转化大肠杆菌 DH10 Bac后 ,F基因在助手质粒 (helper plasmid)提供转座酶的情况下 ,通过转座进入 Bacmid,构建了重组 Bacmid(re- Bacmid)。在含有 X-... 将新城疫病毒 (四平株 ) F基因插入到 p Fast Bac 质粒中 ,构建了重组质粒 p FF。 p FF转化大肠杆菌 DH10 Bac后 ,F基因在助手质粒 (helper plasmid)提供转座酶的情况下 ,通过转座进入 Bacmid,构建了重组 Bacmid(re- Bacmid)。在含有 X- gal/ IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上 ,筛选白色菌落后 ,提取 re- Bacm id转染 Sf- 9昆虫细胞。在昆虫细胞内 ,re- Bacm id经复制、表达、装配 ,形成重组杆状病毒 ,并表达 F蛋白。经 SDS- PAGE和 Western- blot分析 ,表达的 F蛋白的分子大小为 6 30 0 0 ,并证明在昆虫细胞内表达的蛋白能部分糖基化。表达的 F蛋白约占细胞总蛋白的 10 %。动物试验证明 。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 杆状病毒 重组病毒 免疫原性
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 23 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部