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非酯化脂肪酸对体外培养犊牛原代肝细胞中炎性因子表达及其活性的影响 被引量：7
1
作者 史晓霞 王建国 +13 位作者 李玉 宋玉祥 丁红研 韩盈盈 张玉明 殷立恒 王婷婷 张仁和 郭立辉 邓清华 李心慰 李小兵 刘国文 王哲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期92-96,共5页
在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上,通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸(Nonesterified fatty acids,NEFAs),运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达及其活性的影响。... 在建立犊牛原代肝细胞体外培养模型的基础上,通过培养液中添加不同浓度的非酯化脂肪酸(Nonesterified fatty acids,NEFAs),运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,测定NEFAs对肝细胞中炎性因子TNFα、IL-6和IL-1β的mRNA表达及其活性的影响。结果显示,NEFAs作用肝细胞9h后,与对照组相比,高浓度NEFAs(1.8mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β的mRNA表达水平显著增加(P<0.05),IL-6的mRNA表达水平在2.4mmol/L时极显著增加(P<0.01),低浓度NEFAs(0.6、1.2mmol/L)组肝细胞中TNFα、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平无显著差异(P>0.05);并且TNFα、IL-1β的活性在NEFAs浓度达到1.8、2.4mmol/L显著高于对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性作用,IL-6的活性在在NEFAs浓度达到1.8mmol/L显著高于对照组(P<0.01),在2.4mmol/L也高于对照组,但差异不显著。结果表明,高浓度NEFAs在一定程度上能引起或加剧奶牛肝细胞炎性反应,可能是导致产后奶牛肝功能炎性损伤主要因素。 展开更多
关键词 非酯化脂肪酸 肝细胞 炎性因子
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组胺对体外培养犊牛原代瘤胃上皮细胞炎性因子的影响 被引量：3
2
作者 王婷婷 郭立辉 +9 位作者 赵晨旭 王亚洲 邓清华 张玉明 殷立恒 张仁和 李心慰 李小兵 刘国文 王哲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期275-280,共6页
体外培养奶牛瘤胃上皮细胞，在不同pH的培养液（5．5和7．2）中添加不同浓度的组胺（0、0．5、2．5、12．5和62．5μmol／L）。运用实时荧光定量PCR和ELISA方法，检测组胺对瘤胃上皮细胞炎性因子白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）... 体外培养奶牛瘤胃上皮细胞，在不同pH的培养液（5．5和7．2）中添加不同浓度的组胺（0、0．5、2．5、12．5和62．5μmol／L）。运用实时荧光定量PCR和ELISA方法，检测组胺对瘤胃上皮细胞炎性因子白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）mRNA表达及其含量的影响。结果显示，PH5．5的培养液组，与对照组相比，TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平均显著或极显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）；TNF-α、IL-6和IL-1β的含量在2．5、12．5和62．5μmol／L组胺处理组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）。pH7．2的培养液组，TNF—α和IL-6mRNA表达水平在2．5和12．5μmol／L组胺处理组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-1βmRNA表达水平在2．5、12．5和到62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）；而TNF-α含量在62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-6在2．5、12．5和62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01），IL-1β在12．5和62．5μmol／L组显著高于对照组（P〈0．05／P〈0．01）。在组胺各浓度组，TNF-α、IL-6和IL-1β1TIRNA表达水平在pH5．5条件下均显著高于pH7．2，但含量差异不显著。结果表明，低pH条件下，高浓度组胺增加奶牛瘤胃上皮细胞炎性反应，促进奶牛亚急性瘤胃酸中毒的发展。 展开更多
关键词 组胺 瘤胃上皮细胞 炎性因子
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催乳素对奶牛脂肪细胞脂代谢关键基因的作用 被引量：2
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作者 殷立恒 杜希良 +7 位作者 雷林 邓清华 张玉明 王婷婷 郭立辉 张仁和 李心慰 刘国文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期809-814,共6页
催乳素(prolactin,PRL)是启动和维持泌乳的重要激素,在泌乳期间能调节机体将营养物质和能量优先流向乳腺,用于乳脂和乳蛋白的合成。本试验采用体外分离培养奶牛前脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞,加入PRL探讨其对脂肪细胞脂代谢相关基... 催乳素(prolactin,PRL)是启动和维持泌乳的重要激素,在泌乳期间能调节机体将营养物质和能量优先流向乳腺,用于乳脂和乳蛋白的合成。本试验采用体外分离培养奶牛前脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞,加入PRL探讨其对脂肪细胞脂代谢相关基因的作用。结果显示,奶牛白色脂肪细胞存在催乳素受体(prolactin receptor,PRLR),且在PRL质量浓度为75μg/L,作用时间为9h时,PRLR表达量达到最高,此时调节脂合成的核转录因子SREBPE-1c及下游控制脂合成的基因FAS和LPL均显著降低,75μg/L组与对照组相比差异极显著(P<0.01);控制脂分解的基因HSL显著升高,75μg/L组与对照组相比差异显著(P<0.05);细胞培养上清液中的甘油含量显著升高,75μg/L组与对照组相比差异显著(P<0.05)。结果表明,PRL能直接作用于奶牛白色脂肪细胞,降低脂合成作用并促进脂分解作用。 展开更多
关键词 催乳素 奶牛 脂肪细胞 脂代谢基因
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p38介导β-羟丁酸对原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响 被引量：1
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作者 宋玉祥 李玉 +12 位作者 李心慰 史晓霞 丁红研 韩盈盈 李娜 张仁和 张玉明 王婷婷 殷立恒 郭立辉 李小兵 王哲 刘国文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1889-1895,共7页
本试验旨在探讨β-羟丁酸(BHBA)对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA(0、0.6、1.2、2.4mmol/L),培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580(10... 本试验旨在探讨β-羟丁酸(BHBA)对体外原代培养犊牛肝细胞凋亡的影响以及p38MAPK在其中的调控作用。选择培养72h的肝细胞,添加不同浓度的BHBA(0、0.6、1.2、2.4mmol/L),培养9h,每个浓度3个重复。另外选取细胞,p38MAPK抑制剂SB203580(10μmol/L)预处理1h后,添加BHBA,使其终浓度为2.4mmol/L;PI/Annexin V-FITC双染,运用荧光显微镜观察肝细胞凋亡情况;ELISA法检测p38的活性;实时荧光定量PCR方法检测p38、Caspase-3、Caspase-9、bcl-2基因的mRNA表达水平。结果表明,与对照组相比,1.2和2.4mmol/L BHBA组的肝细胞凋亡明显增加;p38酶活性明显升高;p38、caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平均显著增加(P<0.01),bcl-2基因mRNA表达水平显著降低(P<0.05);添加p38抑制剂后,caspase-3和caspase-9基因mRNA表达水平显著降低(P<0.01),bcl-2基因mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。高浓度的BHBA可以诱导体外原代培养犊牛肝细胞凋亡,p38在BHBA诱导的细胞凋亡中发挥重要作用。 展开更多
关键词 BHBA P38 凋亡基因 肝细胞 犊牛
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低pH环境对体外原代培养犊牛瘤胃上皮细胞炎性通路的影响 被引量：1
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作者 郭立辉 王婷婷 +10 位作者 赵晨旭 王亚洲 黄伟坤 邓清华 张玉明 殷立恒 张仁和 李心慰 李小兵 刘国文 王哲 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期3-5,8,I0001,共5页
本试验旨在研究低p H环境对瘤胃上皮细胞(REC)炎性因子表达的影响。建立犊牛原代REC体外培养模型,在不同p H(5.5和7.2)的培养环境下,采用VFA和NF-κB p65抑制剂PDTC处理。运用Western blot和RT-PCR技术,检测NF-κB p65和IκB蛋白的表达... 本试验旨在研究低p H环境对瘤胃上皮细胞(REC)炎性因子表达的影响。建立犊牛原代REC体外培养模型,在不同p H(5.5和7.2)的培养环境下,采用VFA和NF-κB p65抑制剂PDTC处理。运用Western blot和RT-PCR技术,检测NF-κB p65和IκB蛋白的表达与细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65 m RNA表达。结果显示,在低p H环境(p H 5.5)处理组,NF-κB p65和IκB蛋白的表达显著升高;IL-1β、IL-6、TNF-α和NF-κB p65的m RNA表达水平均显著或极显著高于对照组(P<0.05/P<0.01)。组内差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 亚急性瘤胃酸中毒(SARA) 瘤胃上皮细胞(REC) 炎性因子 低PH NF-κB
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美国华教精英：中文渐入主流社会，见证中国崛起
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作者 倪越人 刘浩 殷立恒 《海外华文教育动态》 2010年第5期153-154,共2页
1993年6月6日，马里兰大学中国留学生李珊英与其他中国学生一起，在极其艰难的条件下，建立起大华府地区第一个大陆人办的中文班时，她绝对没有想到，17年后这个中文班会成为全美最大的中文学校之一——希望中文学校。她没有满足，仍一... 1993年6月6日，马里兰大学中国留学生李珊英与其他中国学生一起，在极其艰难的条件下，建立起大华府地区第一个大陆人办的中文班时，她绝对没有想到，17年后这个中文班会成为全美最大的中文学校之一——希望中文学校。她没有满足，仍一直致力于研究海外中文教育。在随“青春中国”美国华侨华人世博演出团来沪演出之际，记者采访了这位传奇的女性。 展开更多
关键词 中国崛起 中文班 主流社会 美国 希望中文学校 精英 海外中文教育 中国留学生
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