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新疆棉花黄萎病菌致病性分化监测研究 被引量:31
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作者 李国英 +3 位作者 张莉 郭立新 冶海林 龚双 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第5期324-328,共5页
对新疆棉区采集的35个棉花黄萎病菌代表性菌系进行了生物学特性研究、鉴别寄主法测定及营养亲和群研究。依据鉴别寄主法测定结果,新疆棉花黄萎病菌可分为强、中、弱三种致病型,其中以中等致病类型居多。营养亲和群测定将新疆棉花黄萎病... 对新疆棉区采集的35个棉花黄萎病菌代表性菌系进行了生物学特性研究、鉴别寄主法测定及营养亲和群研究。依据鉴别寄主法测定结果,新疆棉花黄萎病菌可分为强、中、弱三种致病型,其中以中等致病类型居多。营养亲和群测定将新疆棉花黄萎病菌分为2个亲合群,其中一个亲合群中的所有菌系均与标准落叶型菌系相亲和,另一亲和群中的所有菌系与标准非落叶型菌系相亲和,从而证实在新疆存在落叶型黄萎菌系。 展开更多
关键词 新疆 棉花 黄萎病菌 致病性分化 监测 营养亲和群 生物学特性 鉴别寄主法
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实时荧光RT-PCR一步法检测苹果茎沟病毒 被引量:22
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作者 郭立新 向本春 +3 位作者 陈红运 陈洪俊 朱水芳 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期57-61,共5页
根据苹果茎沟病毒(ASGV)各分离物外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对ASGV的实时荧光RT-PCR检测方法。TaqMan-MGB探针3’端具有小沟结合分子(Minor groove binder, MGB),提高了探针的Tm值... 根据苹果茎沟病毒(ASGV)各分离物外壳蛋白(CP)基因的保守序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对ASGV的实时荧光RT-PCR检测方法。TaqMan-MGB探针3’端具有小沟结合分子(Minor groove binder, MGB),提高了探针的Tm值,缩短了探针长度,解决了病毒各分离物之间基因组变异较大、难以找到较长一致的序列来设计探针的困难。该方法的检测灵敏度比常规RT-PCR电泳检测高约10倍,对于ASGV等在果树体内含量较低的病毒尤为适用。此方法快速、灵敏,整个检测过程完全闭管,无需PCR后处理。 展开更多
关键词 苹果茎沟病毒(ASGV) 实时荧光RT-PCR 检测 TAQMAN-MGB探针
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基于PCR技术的植物病原真菌检测技术研究进展 被引量:19
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作者 郭立新 《植物检疫》 2008年第6期385-388,384,共5页
植物病原真菌是可以在植物上引起病害的一类重要病原物,对该类病原的快速检测是对其进行植物检疫、监测预报及病害防治必不可少的基础工作。近年来,以PCR为基础的分子检测技术的日益发展使得植物病原真菌的检测更加快速、灵敏和可靠。... 植物病原真菌是可以在植物上引起病害的一类重要病原物,对该类病原的快速检测是对其进行植物检疫、监测预报及病害防治必不可少的基础工作。近年来,以PCR为基础的分子检测技术的日益发展使得植物病原真菌的检测更加快速、灵敏和可靠。本文对近年来基于PCR技术的植物病原真菌检测方法进行了介绍与评述,这些方法包括ITS-PCR、巢式PCR、多重PCR、PCRELISA和实时荧光定量PCR技术。 展开更多
关键词 植物病原真菌 检测 PCR技术
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应用聚合酶链式反应鉴定新疆棉花落叶型黄萎病菌 被引量:17
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作者 张莉 +1 位作者 李国英 宋蓓 《植物检疫》 北大核心 2004年第5期266-268,共3页
用一对棉花落叶型黄萎病菌的特异性引物D1和D2进行PCR扩增 ,对于落叶型黄萎病菌 ,该对引物可特异性地扩增产生一段 550bp的产物 ,而非落叶型黄萎病菌则不能被扩增。供试的 35个新疆黄萎菌系中 ,有 3个菌系扩增出 550bp大小的落叶型黄萎... 用一对棉花落叶型黄萎病菌的特异性引物D1和D2进行PCR扩增 ,对于落叶型黄萎病菌 ,该对引物可特异性地扩增产生一段 550bp的产物 ,而非落叶型黄萎病菌则不能被扩增。供试的 35个新疆黄萎菌系中 ,有 3个菌系扩增出 550bp大小的落叶型黄萎病菌特异性片段 ,表明目前新疆已存在落叶型黄萎病菌 ,用此技术可快速、准确地检疫和鉴定落叶型黄萎病菌。 展开更多
关键词 聚合酶 链式反应 鉴定技术 新疆棉花 落叶型黄萎病菌
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检疫性轮枝菌及其近似种的鉴定 被引量:15
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作者 郭立新 +3 位作者 张祥林 夏侯阳 张慧丽 陈先锋 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期274-285,277-285,共12页
大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)和黑白轮枝菌(V.albo-atrum)在世界范围内引起多种作物的黄萎病,属于我国重要进境植物检疫对象。本研究对采自我国部分地区和CBS保存的多种植物病原性轮枝菌,包括黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其变种大丽... 大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)和黑白轮枝菌(V.albo-atrum)在世界范围内引起多种作物的黄萎病,属于我国重要进境植物检疫对象。本研究对采自我国部分地区和CBS保存的多种植物病原性轮枝菌,包括黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其变种大丽轮枝菌长孢变种(V.dahliae var.longisporum)、三体轮枝菌(V.tricorpus)、变黑轮枝菌(V.nigrescens)和云状轮枝菌(V.nubilum),采用生物学特性观察,结合rDNA-ITS序列分析的方法,进行了比较和分析。结果表明:不同种类轮枝菌在休眠结构形态上具有一定差异,部分菌株不产生任何休眠结构。各供试菌株在15~25℃范围内均可生长,但黑白轮枝菌在30℃下生长受到强烈抑制,而其他菌株受影响较小。对供试菌株rDNA-ITS序列分析结果表明植物病原性轮枝菌可聚为9个分支,包括三体轮枝菌、变黑轮枝菌、云状轮枝菌、V.theobromae、大丽轮枝菌、大丽轮枝菌长孢变种和3个不同的黑白轮枝菌分支,黑白轮枝菌、大丽轮枝菌及其长孢变种亲缘关系较近。采用生物学性状结合rDNA-ITS序列分析能够更加有效地将两种检疫性轮枝菌从其他植物病原性轮枝菌中区分出来。 展开更多
关键词 大丽轮枝菌 黑白轮枝菌 生物学特性 分子鉴定
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我国进境植物检疫性菌物截获现状与展望 被引量:14
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作者 严进 +1 位作者 蔡磊 朱水芳 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1311-1331,共21页
植物检疫性菌物是一类严重危害植物健康的有害生物,我国现行的进境植物检疫性有害生物名录中共收录130种。本文总结了2007年至2016年间全国口岸进境植物检疫性菌物的截获情况,从检疫性菌物分布类群、寄主及与不同检疫业务和来源国或地... 植物检疫性菌物是一类严重危害植物健康的有害生物,我国现行的进境植物检疫性有害生物名录中共收录130种。本文总结了2007年至2016年间全国口岸进境植物检疫性菌物的截获情况,从检疫性菌物分布类群、寄主及与不同检疫业务和来源国或地区关系等方面进行了分析和比较,并从检测鉴定技术方面对存在问题进行了探讨和展望,以期提高疫情截获率,促进口岸检疫性菌物检疫工作的发展。 展开更多
关键词 外来物种 生物安全 植物病害 检疫 鉴定
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进境意大利苹果苗上葡萄茎枯病菌的截获鉴定 被引量:12
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作者 顾建锋 +2 位作者 张慧丽 陈先锋 吴品珊 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期542-545,共4页
葡萄茎枯病菌{Phoma glomerata(Corda)Wol—lenweber&Hochapfel]已被列入我国进境植物检疫性有害生物名录,是一种检疫性植物病原真菌。目前,该病菌分布于意大利、希腊、瑞典、印度、澳大利亚、以色列、秘鲁、匈牙利美国等国家。该... 葡萄茎枯病菌{Phoma glomerata(Corda)Wol—lenweber&Hochapfel]已被列入我国进境植物检疫性有害生物名录,是一种检疫性植物病原真菌。目前,该病菌分布于意大利、希腊、瑞典、印度、澳大利亚、以色列、秘鲁、匈牙利美国等国家。该病菌寄主范围广,可为害近百种植物,造成葡萄枯萎病、松树猝倒病、小麦叶斑病、苹果叶部和果实病害、番茄、马铃薯和柑桔腐烂等[1,2], 展开更多
关键词 苹果苗 葡萄茎枯病菌 截获鉴定 鉴定方法
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进境日本罗汉松上可可花瘿病菌的截获鉴定 被引量:10
8
作者 郭立新 丽君 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期309-312,共4页
可可花瘿病菌(Albonectria rigidiuscula(Berk.&Broome)Rossman&Samuels)属菌物界(Fungi)、子囊菌门(Ascomycota)、粪壳菌纲(Sordariomycetes)、肉座菌目(Hypocreales)、丛赤壳科(Nectriaceae)、白壳属(Albonectria)。
关键词 病菌 可可 罗汉松 鉴定 截获 日本 进境 子囊菌门
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逆转录环介导等温扩增技术检测南方菜豆花叶病毒 被引量:10
9
作者 郭立新 +3 位作者 徐亚飞 徐颖 张永江 张吉红 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期349-356,共8页
根据南方菜豆花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了4组RT-LAMP引物,通过引物筛选试验,确定SB1组引物为最佳引物,并进行了引物特异性与灵敏度检测试验,最终建立了南方菜豆花叶病毒的RT-LAMP检测方法。灵敏度检测试验显示,RT-LAMP方法比... 根据南方菜豆花叶病毒外壳蛋白基因序列设计并合成了4组RT-LAMP引物,通过引物筛选试验,确定SB1组引物为最佳引物,并进行了引物特异性与灵敏度检测试验,最终建立了南方菜豆花叶病毒的RT-LAMP检测方法。灵敏度检测试验显示,RT-LAMP方法比普通RT-PCR法灵敏度高10倍,而检测时间明显缩短,整个反应过程只需40 min。此外,体系中加入钙黄绿素,反应结束后,可裸眼观察颜色变化来判定结果。本研究所建立的SBMV RT-LAMP方法具有快速、稳定、灵敏、特异、操作简单的特点,适合于SBMV的现场快速检测。 展开更多
关键词 南方菜豆花叶病毒 逆转录环介导等温扩增 检测
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进境日本杜鹃中杜鹃花枯萎病菌的检疫鉴定 被引量:9
10
作者 丽君 +2 位作者 李雪莲 张慧丽 陈先锋 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期289-295,共7页
自宁波口岸进境日本杜鹃花种苗上,采用常规平板分离法获得1株疑似杜鹃花枯萎病菌的菌株OV5。该菌株可在马铃薯葡萄糖琼脂和玉米粉琼脂培养基上生长,但在麦芽汁培养基上不生长。经培养可产生少量气生菌丝和大量小型分生孢子,小型分生孢... 自宁波口岸进境日本杜鹃花种苗上,采用常规平板分离法获得1株疑似杜鹃花枯萎病菌的菌株OV5。该菌株可在马铃薯葡萄糖琼脂和玉米粉琼脂培养基上生长,但在麦芽汁培养基上不生长。经培养可产生少量气生菌丝和大量小型分生孢子,小型分生孢子球状,直径3.0~3.5μm,在纺锤体状菌丝的尖端产生,易脱落,有时呈短链状。菌核卵圆形或饼形,明显杯状,凹面光滑,(1.5~6) mm×(2~8) mm×(0.5~1.5) mm,成熟时黑色。经r DNA ITS基因序列比对分析,发现该菌株与来源于CBS的2株杜鹃花枯萎病菌标准菌株的ITS基因序列同源性达99%以上,位于同一个发育分支。致病性测定结果表明,该菌株可侵染杜鹃花,引起典型杜鹃花枯萎病菌症状。上述研究结果表明,所截获病菌为杜鹃花枯萎病菌,这是我国首次截获该种检疫性真菌。 展开更多
关键词 杜鹃花枯萎病菌 形态学特征 序列分析 致病性测定 检测鉴定
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宁波口岸植物疫情截获情况分析 被引量:8
11
作者 王江岭 徐瑛 +6 位作者 张慧丽 顾建锋 崔俊霞 刘丽 邱明娥 陈先锋 《植物检疫》 北大核心 2011年第6期90-93,共4页
宁波口岸2011年上半年检测进出口样品数量、疫情截获率、检疫性有害生物检出率同比2010年均有明显提高;疫情首次截获情况突出;各类检疫性有害生物中,杂草所占比例最大,但昆虫比例有所上升;各类检测样品中,大豆、大麦中的检疫性有害生物... 宁波口岸2011年上半年检测进出口样品数量、疫情截获率、检疫性有害生物检出率同比2010年均有明显提高;疫情首次截获情况突出;各类检疫性有害生物中,杂草所占比例最大,但昆虫比例有所上升;各类检测样品中,大豆、大麦中的检疫性有害生物数量最多。本文对宁波口岸疫情截获率增长的原因进行了分析,并对存在的问题提出了建议。 展开更多
关键词 宁波口岸 疫情 检疫性有害生物 问题 分析
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新疆棉花黄萎病菌病原种群监测研究 被引量:8
12
作者 张莉 +1 位作者 李国英 杨之为 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2006年第11期189-193,共5页
采用致病性测定、营养亲和群测定及PCR特异性扩增3种方法,对新疆棉区采集的35个棉花黄萎病菌代表性菌系进行致病型鉴定。结果表明,新疆棉花黄萎病菌存在强、中、弱3种不同的致病类型,其中以中等致病类型居多。利用营养亲和群方法将新疆... 采用致病性测定、营养亲和群测定及PCR特异性扩增3种方法,对新疆棉区采集的35个棉花黄萎病菌代表性菌系进行致病型鉴定。结果表明,新疆棉花黄萎病菌存在强、中、弱3种不同的致病类型,其中以中等致病类型居多。利用营养亲和群方法将新疆棉花黄萎病菌分为2个亲和群,其中1个亲和群中的所有菌系均与标准落叶型菌系相亲和,另1个亲和群中的所有菌系均与标准非落叶型菌系相亲和。利用棉花黄萎病菌落叶型特异引物进行PCR特异性扩增,有3个菌系扩增出550bp的落叶型黄萎病菌特异性片段。用营养亲和群及PCR特异性扩增均进一步证实目前新疆存在落叶型黄萎病菌菌系。 展开更多
关键词 棉花黄萎病菌 致病性 营养亲和性 PCR扩增 新疆棉区
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番石榴黑斑病病原菌的分离鉴定 被引量:7
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作者 张慧丽 徐瑛 +2 位作者 王江岭 顾建锋 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第28期17310-17311,共2页
[目的]从送检番石榴样品上发现一种黑斑病,对病原真菌进行分离鉴定,以明确其分类地位及重要性。[方法]通过致病性测定、形态学观察和ITS序列分析对病菌进行了鉴定。[结果]形态学观察和ITS序列分析表明,病原菌为芒果球座菌(Guignardia ma... [目的]从送检番石榴样品上发现一种黑斑病,对病原真菌进行分离鉴定,以明确其分类地位及重要性。[方法]通过致病性测定、形态学观察和ITS序列分析对病菌进行了鉴定。[结果]形态学观察和ITS序列分析表明,病原菌为芒果球座菌(Guignardia mangiferae)。[结论]引起番石榴黑斑病的病原菌为芒果球座菌(G.mangiferae)。此前还未有G.mangiferae引起番石榴病害的报道。 展开更多
关键词 番石榴 黑斑病 分离鉴定 芒果球座菌
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光强和二氧化碳浓度变化对浒苔幼苗生长及生理的影响 被引量:6
14
作者 高秀秀 李亚鹤 +1 位作者 徐年 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期80-87,共8页
大气CO2浓度升高引起的海洋酸化如何在光变环境下影响大型海藻固碳量的问题,关系到未来海洋初级生产力的变化趋势。为研究大型海藻对CO2浓度升高和光强变化的响应,本文选取浒苔(Ulva prolifera)幼苗为实验材料,探讨其在不同光强下[80、... 大气CO2浓度升高引起的海洋酸化如何在光变环境下影响大型海藻固碳量的问题,关系到未来海洋初级生产力的变化趋势。为研究大型海藻对CO2浓度升高和光强变化的响应,本文选取浒苔(Ulva prolifera)幼苗为实验材料,探讨其在不同光强下[80、260μmol/(m2·s)]和两种CO2浓度(正常CO2浓度:400μL/L和高CO2浓度:1 000μL/L)下的生理变化。研究发现,在正常CO2浓度、高光条件下,浒苔幼苗的生长最快,超氧化物特化酶(SOD)活性最高,而过氧化氢酶(CAT)活性在低光、高CO2处理下有最大值。光合色素含量和光系统Ⅱ的光化学效率在不同处理间没有显著性差异,但叶绿素a与类胡萝卜素的比值在低光正常CO2处理下有最大值。同时,高光高CO2处理下,浒苔幼苗的可溶性蛋白含量最低。 展开更多
关键词 CO2 光强 浒苔幼苗 叶绿素荧光效率 抗氧化活性
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进境法国大麦中夹杂向日葵种子内大丽轮枝菌的种类鉴定 被引量:7
15
作者 丽君 +1 位作者 郭立新 陈先锋 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1429-1430,共2页
向日葵是世界第二大油料作物,在我国的种植面积仅次于大豆和油菜,且逐年增加,其病害发生也日趋严重(卜浩宇等,2014)。向日葵黄萎病于1948年在北美地区首次报道,是威胁向日葵生产的重要病害,可降低向日葵籽粒的产量和品质,其致病菌大丽... 向日葵是世界第二大油料作物,在我国的种植面积仅次于大豆和油菜,且逐年增加,其病害发生也日趋严重(卜浩宇等,2014)。向日葵黄萎病于1948年在北美地区首次报道,是威胁向日葵生产的重要病害,可降低向日葵籽粒的产量和品质,其致病菌大丽轮枝菌在温带和亚热带广泛分布,可侵染600多种植物(Pegg&Brady,2002)。 展开更多
关键词 向日葵种子 大丽轮枝菌 种类鉴定 法国大麦 夹杂 进境 病害发生 油料作物
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苹果茎沟病毒KRL-1分离物外壳蛋白基因序列测定 被引量:4
16
作者 郭立新 向本春 +2 位作者 陈红运 朱水芳 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期576-578,共3页
以KRL-1(库尔勒香梨分离物)总RNA为模板,采用RT-PCR技术,扩增外壳蛋白(CP)基因的cDNA片段,将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定,分析结果表明:KRL-1CP基因由714个核苷酸组成,编码237个氨基酸。KRL-1与ASGV其它分离物CP基因的核苷酸... 以KRL-1(库尔勒香梨分离物)总RNA为模板,采用RT-PCR技术,扩增外壳蛋白(CP)基因的cDNA片段,将其克隆到pMD18-T载体上。通过序列测定,分析结果表明:KRL-1CP基因由714个核苷酸组成,编码237个氨基酸。KRL-1与ASGV其它分离物CP基因的核苷酸同源性为90%-93%,氨基酸同源性为94%-98%。根据KRL-1与其他分离物CP基因序列和生物学症状上的差异,可推断KRL-1存在较大的分子变异。 展开更多
关键词 苹果茎沟病毒 外壳蛋白基因 克隆 序列分析
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啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测 被引量:6
17
作者 郭立新 +3 位作者 张祥林 邓丛良 闻伟刚 李世访 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期466-473,共8页
根据啤酒花潜隐类病毒(HpLVd)各分离物基因序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对HpLVd的实时荧光RT-PCR检测方法。通过对反应体系的优化,确定了HpLVd的实时荧光RT-PCR最佳反应条件:Mg2+终浓度为5.5 mmol/L,引物终... 根据啤酒花潜隐类病毒(HpLVd)各分离物基因序列,设计并合成1对特异性引物和1条TaqMan-MGB探针,建立了对HpLVd的实时荧光RT-PCR检测方法。通过对反应体系的优化,确定了HpLVd的实时荧光RT-PCR最佳反应条件:Mg2+终浓度为5.5 mmol/L,引物终浓度为0.7μmol/L,探针终浓度为0.5μmol/L。灵敏度对比试验结果显示,实时荧光RT-PCR的灵敏度较普通RT-PCR通过琼脂糖凝胶电泳高10倍,在25μL反应体系中,总RNA含量达到20 pg就能通过实时荧光RT-PCR检测出来。此方法也能成功检测田间样品上的啤酒花潜隐类病毒。 展开更多
关键词 啤酒花潜隐类病毒 实时荧光RT-PCR 检测 TAQMAN-MGB探针
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检疫性真菌DNA提取方法的比较 被引量:6
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作者 丽君 +2 位作者 党晨阳 朱鹏 陈先锋 《植物检疫》 北大核心 2015年第4期43-47,共5页
为获得一种简便、快速、较低费用的DNA提取方法,用于口岸检疫性真菌后续识别检测工作。本文系统比较了8种不同提取方法对DNA浓度、纯度、DNA中蛋白质含量、以及后续PCR扩增、测序的影响,同时对不同方法的提取时间、价格、原理等进行了... 为获得一种简便、快速、较低费用的DNA提取方法,用于口岸检疫性真菌后续识别检测工作。本文系统比较了8种不同提取方法对DNA浓度、纯度、DNA中蛋白质含量、以及后续PCR扩增、测序的影响,同时对不同方法的提取时间、价格、原理等进行了比较。结果表明,基于磁珠法提取的DNA得率较高,耗时较少,但较易蛋白质污染;CTAB法得率与磁珠法相似,但耗时最长,人力成本高;膜吸附法得率较低,但纯度较高。 展开更多
关键词 检疫性真菌 DNA提取 比较
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宁波地区石莼属绿藻形态学观察及分子生物学鉴定 被引量:5
19
作者 孙东 孙存华 +3 位作者 施剑杰 李百伟 王丹 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第12期6936-6938,6942,共4页
采用形态学观察与分子生物学技术相结合的方法,对宁波周边海域采集的11个石莼属样品进行分析鉴定。结果表明,宁波地区石莼属绿藻有4个种类,其中3个为已知种类,分别为浒苔(Ulva prolifera)、曲浒苔(Ulva flexuosa)和孔石莼(Ulva.pertusa... 采用形态学观察与分子生物学技术相结合的方法,对宁波周边海域采集的11个石莼属样品进行分析鉴定。结果表明,宁波地区石莼属绿藻有4个种类,其中3个为已知种类,分别为浒苔(Ulva prolifera)、曲浒苔(Ulva flexuosa)和孔石莼(Ulva.pertusa);1个为无法确定的种类(Ulva spp)。 展开更多
关键词 石莼属 种类鉴定 宁波地区
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杜鹃芽枯病菌PCR及实时荧光PCR检测
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作者 龚静如 +3 位作者 龚婕 王寅鹏 崔金璐 易建平 《植物检疫》 2024年第4期49-54,共6页
根据GenBank中杜鹃芽枯病菌(Seifertia azaleae)及其相关种ITS序列设计特异引物SA1/SA2和探针SA-P,建立杜鹃芽枯病菌常规PCR和实时荧光PCR检测方法。引物SA1/SA2能扩增5株S. azaleae菌株DNA,得到351 bp的预期扩增产物,其他供试菌株均不... 根据GenBank中杜鹃芽枯病菌(Seifertia azaleae)及其相关种ITS序列设计特异引物SA1/SA2和探针SA-P,建立杜鹃芽枯病菌常规PCR和实时荧光PCR检测方法。引物SA1/SA2能扩增5株S. azaleae菌株DNA,得到351 bp的预期扩增产物,其他供试菌株均不能扩增出预期产物,检测灵敏度达60 pg菌体DNA。探针SA-P对5株S. azaleae均表现为阳性扩增,其他供试菌株均为阴性扩增,检测灵敏度可达60 fg菌体DNA,比常规PCR高1000倍。对杜鹃花苞样品和叶片样品的检测结果表明常规PCR和实时荧光PCR检测方法均可用于进境杜鹃种苗中杜鹃芽枯病菌的快速检测。 展开更多
关键词 杜鹃芽枯病菌 检测 常规PCR 实时荧光PCR
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