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miR-199b-3p通过靶向PLCε抑制前列腺癌细胞的恶性增殖 被引量：3
1
作者 郑永波 刘佳渝 +3 位作者 段李梅 杨锦潇 罗春丽 吴小候 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第5期803-811,共9页
该研究的目的是确定miR-199b-3p在前列腺癌(PCa)中的表达及其对PCa细胞增殖的影响及作用机制。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199b-3p在PCa组织、良性前列腺增生(BPH)组织、PCa细胞及人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)中的表达... 该研究的目的是确定miR-199b-3p在前列腺癌(PCa)中的表达及其对PCa细胞增殖的影响及作用机制。通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199b-3p在PCa组织、良性前列腺增生(BPH)组织、PCa细胞及人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)中的表达,并分析其表达与PCa临床病理特征的关系。蛋白质印迹法(Western blot)用于检测磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C epsilon(PLCε)的表达。采用CCK-8法和克隆形成实验对其体外增殖进行评估。Edu测定法用于检测细胞对Edu的吸收。荧光素酶报告实验被用来验证miR-199b-3p和PLCε的靶向结合情况。结果显示,在PCa组织中miR-199b-3p的表达水平明显低于BPH组织,且与临床病理特征中的组织学分期相关。上调miR-199b-3p可以显著抑制PCa细胞的增殖和Edu的摄取能力,PLCε被鉴定为miR-199b-3p的下游靶基因,且其表达量与miR-199b-3p的表达量呈负相关。此外,补救实验结果显示,上调PLCε能够逆转miR-199b-3p在PCa细胞增殖中的抑制作用。总之,miR-199b-3p可通过靶向PLCε3′非编码区(3′-UTR)负性调控PLCε进而抑制PCa细胞的恶性增殖。 展开更多
关键词 前列腺癌 恶性增殖 miR-199b-3p PLCε
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Sh-PLCε提高IL-2治疗肾癌疗效的研究 被引量：1
2
作者 杨锦潇 段李梅 +5 位作者 范佳鑫 李婷 范砚茹 袁鸿玲 吴小侯 罗春丽 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第12期2351-2359,共9页
该实验旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)是否在白介素2(interleukin 2,IL-2)治疗肾癌的过程中发挥一定的作用。采用sh-PLCε慢病毒转染肾癌细胞株786-o。MTT法检测IL-2处理肾癌细胞最适浓度,使用最适浓度IL-... 该实验旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)是否在白介素2(interleukin 2,IL-2)治疗肾癌的过程中发挥一定的作用。采用sh-PLCε慢病毒转染肾癌细胞株786-o。MTT法检测IL-2处理肾癌细胞最适浓度,使用最适浓度IL-2处理细胞。流式细胞术检测细胞凋亡。DAPI染色观察细胞中凋亡小体。q-PCR、Western blot检测Fas/FasL以及Fas下游相关分子在基因水平以及蛋白水平的表达变化。将肿瘤细胞与淋巴细胞进行共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示,敲低PLCε后,Fas/FasL表达降低,而IL-2处理后,会逆转这种效果。检测Fas下游相关通路后发现,IL-2处理阴性对照(negative control,NC)组后,Fas下游凋亡抑制信号通路FADD/cFlip/Traf2启动,IL-2处理sh-PLCε组后,Fas下游凋亡信号通路FADD/Caspase8/Caspase3启动。共培养实验后流式细胞术结果显示,IL-2处理与sh-PLCε联用组细胞凋亡比例最高。该实验证明,sh-PLCε可以通过启动Fas下游凋亡信号通路,抑制凋亡抑制信号通路来提高IL-2治疗肾癌的疗效。 展开更多
关键词 肾癌 FAS/FASL IL-2 细胞凋亡 免疫逃逸
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shPLCε通过YAP抑制前列腺癌细胞的丝氨酸/甘氨酸代谢和增殖
3
作者 段李梅 杨锦潇 +3 位作者 刘佳渝 郑永波 吴小候 罗春丽 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1-12,共12页
目的:该研究旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C epsilon(phospholipase C epsilon,PLCε)对前列腺癌细胞丝氨酸/甘氨酸代谢及细胞增殖的影响。方法:慢病毒及质粒转染LNCAP、PC3细胞,q-PCR、Western blot分别检测LNCAP、PC3细胞中PLCε、... 目的:该研究旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C epsilon(phospholipase C epsilon,PLCε)对前列腺癌细胞丝氨酸/甘氨酸代谢及细胞增殖的影响。方法:慢病毒及质粒转染LNCAP、PC3细胞,q-PCR、Western blot分别检测LNCAP、PC3细胞中PLCε、Yes相关蛋白(yes associated protein,YAP)、丝氨酸/甘氨酸生成酶[包括磷酸丝氨酸转氨酶1(phosphoserine aminotransferase1,PSAT1)、磷酸丝氨酸磷酸酶(phosphoserine phosphatase,PSPH)、丝氨酸羟甲基转移酶2(serine hydroxymethyltransferase2,SHMT2)及增殖相关基因细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)]的表达情况;克隆形成实验及MTT实验检测细胞的克隆形成率及增殖活性。结果:(1)感染LV-shPLCε可显著下调前列腺癌细胞LNCAP、PC3中的PLCε、YAP、PSAT1、PSPH、SHMT2及增殖相关基因的mRNA及蛋白质水平,同时抑制细胞的克隆形成能力和增殖活性;(2)在shPLCε组细胞中加入过表达YAP质粒后,能明显逆转YAP、PSAT1、PSPH、SHMT2及增殖相关基因的下调,但加入干扰YAP质粒后结果相反。结论:shPLCε可通过下调YAP的表达抑制前列腺癌细胞的丝氨酸/甘氨酸生成,从而抑制细胞的增殖。 展开更多
关键词 前列腺癌 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C epsilon Yes相关蛋白 丝氨酸/甘氨酸代谢 增殖
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南充市乡镇居民高血压患病率和知晓率的调查分析
4
作者 代欢欢 付玉仙 +5 位作者 钟红 李碧莲 陈俞宇 吴垚 牟荣跃 段李梅 《医学信息（医学与计算机应用）》 2014年第20期619-619,共1页
目的为了解乡镇居民患高血压病现状,分析相关的影响因素,并为制定具有针对性的干预措施提供科学依据。方法采用随机抽样调查的方法,按照《全国2012年高血压抽样调查工作手册》的要求,对南充市≥18岁常住居民采用标准化调查方法,在严格... 目的为了解乡镇居民患高血压病现状,分析相关的影响因素,并为制定具有针对性的干预措施提供科学依据。方法采用随机抽样调查的方法,按照《全国2012年高血压抽样调查工作手册》的要求,对南充市≥18岁常住居民采用标准化调查方法,在严格质控下进行调查和血压测定。结果在所抽查的总人数890例,其中男性中有475例,女性415例中。73.6%的人的血压正常;27.1%的人群患高血压病;高血压知晓率仅有78.1%。结论乡镇地区农村居民高血压流行状况相当严峻,是不容忽视的社会公共卫生问题。必须加强健康教育和健康促进活动,切实做好高血压的预防。 展开更多
关键词 乡镇居民 高血压 调查 分析
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