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橙皮素通过ROS介导内质网应激诱导吉非替尼耐药NCI-H1975细胞发生凋亡
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作者 庄敏 谢钱龙 +2 位作者 檀灵芳 庄捷 眭玉霞 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1220-1231,共12页
目的:研究橙皮素(hesperetin,HST)对人吉非替尼耐药NCI-H1975肺腺癌细胞的抑制作用及机制。方法:采用CCK-8法检测HST对NCI-H1975细胞增殖能力的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测HST诱导NCI-H1975细胞发生凋亡;采用流式细胞仪观察HST及H... 目的:研究橙皮素(hesperetin,HST)对人吉非替尼耐药NCI-H1975肺腺癌细胞的抑制作用及机制。方法:采用CCK-8法检测HST对NCI-H1975细胞增殖能力的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测HST诱导NCI-H1975细胞发生凋亡;采用流式细胞仪观察HST及HST+乙酰半胱氨酸(N-Acetyl-L-cysteine,NAC)联合对NCI-H1975细胞活性氧(ROS)水平的影响;采用Western blot法检测HST、NAC+HST及Salubrinal+HST对NCI-H1975细胞Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、p-eIF2α、eIF2α和CHOP蛋白表达情况;通过构建裸鼠移植瘤模型研究HST体内抑瘤作用;采用HE染色观察HST对荷瘤鼠心、肝、肾和移植瘤组织病理学形态的影响;采用免疫组织化学检测HST对移植瘤组织p-eIF2α蛋白的影响。结果:与对照组比较,37.5μmol/L HST作用24 h能明显抑制NCI-H1975细胞活性(P<0.05),NAC可减弱HST的抑制作用;浓度大于150μmol/L时可提高细胞内ROS水平(P<0.05)、诱导细胞凋亡(P<0.05)、Caspase3活性增加(P<0.01),与HST 300μmol/L组比较,NAC+HST 300μmol/L组ROS水平、细胞凋亡率及Caspase3活性明显下降(P<0.01);HST呈浓度依赖性上调Bax、Cleaved Caspase-3、CHOP和p-eIF2α表达、下调Bcl-2表达(P<0.01),与HST 300μmol/L组比较,Sal+HST 300μmol/L组Bax、Cleaved Caspase-3表达下降,Bcl-2表达升高;NAC+HST 300μmol/L组和Sal+HST 300μmol/L组p-eIF2α和CHOP表达明显下调(P<0.01)。体内实验显示HST能明显抑制移植瘤的生长,上调p-eIF2α蛋白表达(P<0.05),对裸鼠生长状态、体质量及重要脏器(心、肝、肾)无明显不良影响。结论:HST在体内外均可抑制吉非替尼耐药NCI-H1975肺腺癌细胞的增殖,其机制可能与HST通过ROS介导内质网应激诱导NCIH1975细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 橙皮素 NCI-H1975细胞 活性氧 内质网应激 凋亡
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