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我国首例非洲猪瘟的确诊 被引量:186
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作者 王清华 任炜杰 +12 位作者 包静月 戈胜强 李金明 李林 刘春菊 王华 张永强 徐天刚 段亚良 顾贵波 周晨阳 《中国动物检疫》 CAS 2018年第9期1-4,共4页
2018年8月1日,辽宁省报告沈阳市一养猪户饲养的猪陆续发生不明原因死亡,病死猪剖检发现脾脏异常肿大,疑似非洲猪瘟病毒感染。国家外来动物疫病研究中心采集病料进行了检测,确诊为非洲猪瘟病毒核酸阳性,序列分析发现,其B646L/p72基因序列... 2018年8月1日,辽宁省报告沈阳市一养猪户饲养的猪陆续发生不明原因死亡,病死猪剖检发现脾脏异常肿大,疑似非洲猪瘟病毒感染。国家外来动物疫病研究中心采集病料进行了检测,确诊为非洲猪瘟病毒核酸阳性,序列分析发现,其B646L/p72基因序列417个碱基与俄罗斯毒株100%匹配,与俄罗斯和东欧目前流行的格鲁吉亚毒株(Georgia 2007)属于同一进化分支。这是我国发现的首例非洲猪瘟。疫情来源有待进一步调查。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 非洲猪瘟病毒 荧光定量PCR 普通PCR ASFV特异性抗体
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智能网联汽车技术与标准发展研究 被引量:43
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作者 张亚萍 刘华 +1 位作者 李碧钰 《上海汽车》 2015年第8期55-59,共5页
介绍了智能网联汽车的概念和系统构成。详细分析了智能网联汽车的关键技术和标准制定情况。分析认为智能网联汽车未来的技术发展集中体现在智能交通与大数据扩展,而标准体系与技术要求相结合势必将更加趋于完善化。
关键词 智能网联汽车 系统构成 关键技术 标准体系
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重组酶聚合酶扩增技术在疾病快速检测中的研究进展 被引量:35
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作者 赵永刚 +2 位作者 李林 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2016年第8期72-77,共6页
重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是近年来开发的核酸扩增技术,在保证灵敏、特异的同时,操作简单、耗时短,能够在常温下10~20分钟内对靶DNA进行扩增,对实验设备、资源的要求低,适用于兽医、食品安全、生物防御、农业等领域的快速诊断。本文... 重组酶聚合酶扩增技术(RPA)是近年来开发的核酸扩增技术,在保证灵敏、特异的同时,操作简单、耗时短,能够在常温下10~20分钟内对靶DNA进行扩增,对实验设备、资源的要求低,适用于兽医、食品安全、生物防御、农业等领域的快速诊断。本文介绍了该技术的原理及目前在病毒、细菌、寄生虫等病原检测方面的应用,展望了其现场检测方面的应用前景。 展开更多
关键词 重组酶聚合酶扩增 快速诊断 应用
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实现基本公共教育服务均等化——《中国教育现代化2035》的战略与政策 被引量:32
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作者 薛二勇 李健 +1 位作者 单成蔚 《中国电化教育》 CSSCI 北大核心 2019年第10期1-7,共7页
基本公共教育服务均等化是教育现代化的基本要求,是维护社会公平的基本途径。该文基于文本分析、影子评价等方法,运用政策规划的路线图理论思路,发现实现中国基本公共教育服务均等化有十项政策,分别为:实现义务教育学校建设标准化;推进... 基本公共教育服务均等化是教育现代化的基本要求,是维护社会公平的基本途径。该文基于文本分析、影子评价等方法,运用政策规划的路线图理论思路,发现实现中国基本公共教育服务均等化有十项政策,分别为:实现义务教育学校建设标准化;推进城乡义务教育的均衡发展;办好乡村学校,支撑乡村振兴;县域内义务教育基本均衡到优质均衡发展;优化和完善城镇学校布局规划;随迁子女平等享受基本公共教育服务;完善流动人口子女异地考试政策;健全家庭经济困难学生资助体系;教育脱贫,阻断代际贫困;推进融合教育,办好特殊教育。从规划设计、基本内涵、实施路径三个方面对十项政策进行了系统和针对性的分析,以剖析政策意图,推进规划落实。 展开更多
关键词 基本公共教育 服务均等化 教育现代化 政策
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温度和光照对塔胞藻生长的影响 被引量:20
5
作者 何振平 王秀云 +1 位作者 王冬冬 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第4期218-221,共4页
采用梯度法比较了温度、光照度、光照周期对一次性培养的塔胞藻生长的影响。结果表明:塔胞藻对温度的适应范围较广,10~30℃时塔胞藻均可生长,24~28℃为塔胞藻生长的最适温度;光照度4000~10 000 lx时,塔胞藻生物量随光照度的增加而增大... 采用梯度法比较了温度、光照度、光照周期对一次性培养的塔胞藻生长的影响。结果表明:塔胞藻对温度的适应范围较广,10~30℃时塔胞藻均可生长,24~28℃为塔胞藻生长的最适温度;光照度4000~10 000 lx时,塔胞藻生物量随光照度的增加而增大,并在10 000 lx时达到最大;塔胞藻在光照周期为16L∶8D时生长最快。 展开更多
关键词 温度 光照度 光照周期 塔胞藻
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塞尼卡谷病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:22
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作者 赵永刚 +3 位作者 迟田英 哈登楚日亚 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期959-962,共4页
为建立一种快速、灵敏的塞尼卡谷病毒(SVV)检测方法,本研究针对病毒基因保守区域设计了一对引物和探针,并优化反应条件,建立了检测SVV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在2.8×107拷贝/μL^2.8&#... 为建立一种快速、灵敏的塞尼卡谷病毒(SVV)检测方法,本研究针对病毒基因保守区域设计了一对引物和探针,并优化反应条件,建立了检测SVV的TaqMan荧光定量PCR方法。结果表明,以重组质粒为标准品建立的标准曲线在2.8×107拷贝/μL^2.8×10~1拷贝/μL范围内具有良好的线性关系;该方法与口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应;检测灵敏度可达2.8拷贝/μL,灵敏度高于普通PCR;批内和批间的变异系数为1.73%~4.00%,具有良好的稳定性。本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法可以用于SVV的检测,还可以作为诊断技术储备,应对我国未来可能出现流行的猪原发性疱疹病。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 荧光定量PCR TAQMAN探针
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非洲猪瘟病毒实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(RPA)检测方法的建立 被引量:21
7
作者 哈登楚日亚 +6 位作者 赵永刚 王淑娟 张志诚 戈胜强 李林 王志亮 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第11期3270-3277,共8页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,给养猪业造成了严重的经济损失。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),针对ASFVB646L(p72)基因设计... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,给养猪业造成了严重的经济损失。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),针对ASFVB646L(p72)基因设计了3组引物和探针,并进行筛选、反应条件优化、灵敏性、特异性和重复性试验,建立了实时荧光RPA方法。结果显示,该方法在39℃、20 min内即可检测10个拷贝的DNA分子,且与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒均无交叉反应,检测5.5×106至5.5×100拷贝/μL共7个稀释度样品在各时间点的荧光强度,变异系数范围在0.38%~28.30%。该等温、快速扩增方法可用于ASFV的定性检测,为中国ASFV感染的早期诊断提供技术支持,对疫情暴发后相应控制方案的制定具有重要意义。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) 实时荧光重组酶聚合酶扩增(RPA) 灵敏性 特异性 重复性
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野生与养殖曼氏无针乌贼肌肉的营养成分和评价 被引量:18
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作者 宋超霞 王春琳 +2 位作者 邵银文 王津伟 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期301-303,共3页
野生曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)资源越来越稀缺,需要人工养殖。本研究比较野生曼氏无针乌贼与第六代养殖乌贼的营养成分,为人工养殖提供科学依据。
关键词 曼氏无针乌贼 营养成分 野生 养殖
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塞尼卡谷病毒病研究进展 被引量:16
9
作者 迟田英 +2 位作者 赵永刚 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期831-834,共4页
2015年9月以来,美国中西部多个地区的猪群发生水疱性疫情,几呈蔓延之势,感染猪的鼻吻、蹄冠状带部位出现水疱样病变,偶见腹泻症状,病情急促,新生仔猪病死率达30%-70%。经梅岛外来动物疾病实验室(FADDL)病原学鉴别诊断,排除口蹄疫、猪... 2015年9月以来,美国中西部多个地区的猪群发生水疱性疫情,几呈蔓延之势,感染猪的鼻吻、蹄冠状带部位出现水疱样病变,偶见腹泻症状,病情急促,新生仔猪病死率达30%-70%。经梅岛外来动物疾病实验室(FADDL)病原学鉴别诊断,排除口蹄疫、猪水疱病和水疱性口炎等重要外来动物疫病,最终被确诊为塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)感染。 展开更多
关键词 水疱病 仔猪病死率 腹泻症状 蹄冠 病毒分类 动物疾病 口蹄疫病毒 实验室诊断 FMDV 疫病控制
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塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条检测方法的建立 被引量:16
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作者 宋翥远 +11 位作者 赵永刚 赵明 董雅琴 张永强 李园丽 迟田英 刘春菊 戈胜强 张志诚 王树双 王志亮 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期406-410,共5页
为建立塞尼卡谷病毒(SVV)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对SVV 3D基因设计了引物和探针,通过反应条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了SVV RPA-LFD检测方法。特异性试验结果显示,该方法与口蹄疫病... 为建立塞尼卡谷病毒(SVV)重组酶聚合酶扩增-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,本研究针对SVV 3D基因设计了引物和探针,通过反应条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了SVV RPA-LFD检测方法。特异性试验结果显示,该方法与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸道综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、圆环病毒、伪狂犬病毒无交叉反应;在40℃、20 min内可检测的最低浓度为56拷贝/μL质粒标准品;通过3次重复试验检测,LFD检测线灰度值变异系数范围在4.49%~9.73%。利用该方法对120份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究首次建立了检测SVV的等温、快速RPA-LFD方法,读取结果不依赖任何仪器设备,为猪群感染SVV的现场快速诊断、流行病学研究和根除方案的制定提供帮助。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 重组酶聚合酶扩增 侧向流试纸条
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塞尼卡谷病毒重组酶聚合酶扩增技术(RPA)实时荧光检测方法的建立 被引量:15
11
作者 哈登楚日亚 +7 位作者 王英丽 王姣 刘春菊 迟田英 赵永刚 张志诚 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2017年第8期81-86,共6页
塞尼卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)可感染猪,引起类似口蹄疫病毒感染造成的水疱性病变,新生仔猪病死率达30%~70%。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),针对SVV 3D基因设计了引物和探针,并进行筛选、反应条件优化以及敏感性、特... 塞尼卡谷病毒(Seneca valley virus,SVV)可感染猪,引起类似口蹄疫病毒感染造成的水疱性病变,新生仔猪病死率达30%~70%。本研究利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),针对SVV 3D基因设计了引物和探针,并进行筛选、反应条件优化以及敏感性、特异性和重复性试验,建立了实时荧光RPA方法。结果显示,本方法在40℃、10 min内检测的最低浓度为28拷贝/μL;与口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒无交叉反应;通过3次重复试验检测2.8×10~6~2.8×10~1拷贝/μL的6个稀释度样品,在荧光强度达1500 mV所需时间变异系数范围在2.44%~14.95%。该等温、快速扩增方法为猪群出现水疱性疾病的鉴别诊断提供了技术支持,对及时采取适当防控措施具有重要意义。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 实时 荧光 重组酶聚合酶扩增
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非洲猪瘟病毒实时荧光RPA快速检测方法的建立 被引量:15
12
作者 李林 刘拂 +6 位作者 李金明 邹艳丽 刘珊 包静月 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2017年第8期87-91,共5页
非洲猪瘟是一种跨境动物疫病,对世界养猪业危害严重。目前,该病的流行范围越来越广。为防止该病传入我国,当前急需建立快速、简便、可靠的检测方法。本研究通过分析非洲猪瘟病毒B646L基因保守区域,设计并合成了特异性引物和exo探针,建... 非洲猪瘟是一种跨境动物疫病,对世界养猪业危害严重。目前,该病的流行范围越来越广。为防止该病传入我国,当前急需建立快速、简便、可靠的检测方法。本研究通过分析非洲猪瘟病毒B646L基因保守区域,设计并合成了特异性引物和exo探针,建立了检测非洲猪瘟病毒的实时荧光RPA方法。利用该方法可在20 min内完成检测过程,最低可检测到16拷贝/反应;与猪的其他常见病原核酸无交叉反应;与荧光PCR方法具有相似的灵敏度和特异性;利用该方法对100份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究所建立的非洲猪瘟病毒实时荧光RPA检测方法具有简单、快速、敏感性高、特异性强的优点,在临床鉴别诊断、检验检疫和病原监测等方面具有广泛的应用价值。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 非洲猪瘟病毒 实时荧光RPA 实时荧光PCR
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江苏省首例非洲猪瘟的现场诊断 被引量:14
13
作者 陈昌海 董永毅 +5 位作者 开妍 李锋 蒋向君 单玉平 《中国动物检疫》 CAS 2018年第9期5-8,共4页
2018年8月18日,江苏省连云港市某养猪场发生不明原因生猪疫情。技术人员第一时间赶赴现场开展现场诊断和调查工作,从流行病学、临床症状、病理变化等多角度开展现场诊断,判定为非洲猪瘟临床可疑病例。国家外来动物疫病研究中心实验室检... 2018年8月18日,江苏省连云港市某养猪场发生不明原因生猪疫情。技术人员第一时间赶赴现场开展现场诊断和调查工作,从流行病学、临床症状、病理变化等多角度开展现场诊断,判定为非洲猪瘟临床可疑病例。国家外来动物疫病研究中心实验室检测确诊此次疫情。此次疫情符合非洲猪瘟急性发病特点。本报告将为现阶段我国非洲猪瘟疫情排查工作提供重要参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 临床症状 病例剖检 现场诊断
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泔水传播非洲猪瘟的历史案例与启示 被引量:13
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作者 戈胜强 张秀娟 +6 位作者 张志诚 李金明 刘雨田 徐天刚 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2019年第1期50-53,共4页
目前我国已有多个省暴发非洲猪瘟(ASF)。根据农业农村部公开的数据,泔水是传播ASF的重要因素之一。泔水传播ASF的风险也已被国际广泛认可。本文通过分析泔水传播ASF的原因,解读泔水传播ASF的国际实例,结合我国泔水饲喂情况,提出了避免AS... 目前我国已有多个省暴发非洲猪瘟(ASF)。根据农业农村部公开的数据,泔水是传播ASF的重要因素之一。泔水传播ASF的风险也已被国际广泛认可。本文通过分析泔水传播ASF的原因,解读泔水传播ASF的国际实例,结合我国泔水饲喂情况,提出了避免ASF通过泔水饲喂扩散,必须依据现实、堵疏兼顾、科学规划整个养殖链条的想法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 泔水 防控
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投喂四种饵料对曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)繁殖性能的影响 被引量:11
15
作者 王春琳 +3 位作者 邵银文 王津伟 宋超霞 蒋霞敏 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期634-642,共9页
以双齿围沙蚕、泥鳅、黄鲫、福寿螺4种不同饵料强化培育胴长(6.50±0.20)cm的曼氏无针乌贼,用曼氏无针乌贼肝脏和卵巢的氨基酸与脂肪酸变化、亲体产卵量、卵径、卵子孵化率及其幼体成活率等指标来评价4种饵料对其繁殖性能的影响。... 以双齿围沙蚕、泥鳅、黄鲫、福寿螺4种不同饵料强化培育胴长(6.50±0.20)cm的曼氏无针乌贼,用曼氏无针乌贼肝脏和卵巢的氨基酸与脂肪酸变化、亲体产卵量、卵径、卵子孵化率及其幼体成活率等指标来评价4种饵料对其繁殖性能的影响。结果表明,黄鲫组曼氏无针乌贼肝脏与卵巢中∑EAA、∑SEAA、∑EAA+SEAA、∑NEAA、∑AA含量在第一次卵巢成熟与第二次卵巢成熟时均显著高于其它投喂组(P<0.05)。黄鲫组乌贼肝脏DHA/EPA在第一次卵巢成熟时显著高于其它投喂组,在第二次卵巢成熟时DHA、DHA/EPA、∑n3PUFA、∑n6PUFA、∑n3/n6PUFA都显著高于其它投喂组(P<0.05);该组乌贼第一次卵巢成熟卵巢DHA、∑n3PUFA、∑n6PUFA、∑n3/n6PUFA及在第二次卵巢成熟时卵巢DHA、DHA/EPA、∑n3PUFA、∑n3/n6PUFA均显著高于其它投喂组(P<0.05),该组第二次卵巢成熟时∑n6PUFA百分含量与沙蚕组无显著差异(P>0.05)。产卵量多少顺序为黄鲫组>沙蚕组>泥鳅组>福寿螺组(P<0.05);孵化率高低顺序为黄鲫组>福寿螺组>泥鳅组>沙蚕组(P<0.05);所产卵子平均直径大小顺序为黄鲫组>泥鳅组>沙蚕组>福寿螺组(P<0.05);幼体成活率高低顺序为黄鲫组>泥鳅组>沙蚕组、福寿螺组(P<0.05)。各指标吻合程度高。 展开更多
关键词 曼氏无针乌贼 氨基酸 脂肪酸 产卵量 孵化率 卵径 幼体成活率
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表达非洲猪瘟病毒P72蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定 被引量:11
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作者 胡永新 赵永刚 +4 位作者 张永强 刘拂 王志亮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1635-1641,共7页
本研究旨在构建能够表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白的缺陷型重组腺病毒。参考ASFV China-SY18株的基因序列,合成B646L基因。先将合成的B646L基因通过TOPO连接克隆到过渡载体pENTR/D-TOPO中;再将插入B646L基因的过渡载体pENTR/D-TOPO-ASF... 本研究旨在构建能够表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P72蛋白的缺陷型重组腺病毒。参考ASFV China-SY18株的基因序列,合成B646L基因。先将合成的B646L基因通过TOPO连接克隆到过渡载体pENTR/D-TOPO中;再将插入B646L基因的过渡载体pENTR/D-TOPO-ASFV-P72与pAd/CMV/V5-DEST腺病毒骨架载体进行重组,得到pAd-ASFV-P72重组质粒;重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,连续传代后获得重组腺病毒。结果表明,获得的Ad5-ASFV-P72重组腺病毒的滴度为2.53×10^9 IFU·m^L^-1;经免疫荧光方法及Western blot鉴定ASFV-P72蛋白在Vero细胞中成功表达,且能够与ASFV标准阳性血清发生特异性反应。本研究成功获得能够表达ASFV P72蛋白的重组腺病毒Ad5-ASFV-P72,不仅为ASFV多基因重组腺病毒载体疫苗的研制奠定了一定基础,还为ASFV相关血清学诊断方法的建立提供了安全有效的抗原。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 复制缺陷型腺病毒 P72蛋白
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曼氏无针乌贼墨囊组织学及墨汁形成的超微结构 被引量:9
17
作者 王春琳 +1 位作者 余红卫 缪妙 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第2期366-372,共7页
采用组织学和电镜技术对曼氏无针乌贼的墨囊及墨腺细胞进行了研究。结果表明:墨囊壁和导管壁由外膜、肌肉层和黏膜三部分组成;墨腺体集中在墨囊底部,呈索状,腺体中部含丰富的结缔组织;墨汁颗粒以游离态形式分布于索状腺体的间隙及墨囊... 采用组织学和电镜技术对曼氏无针乌贼的墨囊及墨腺细胞进行了研究。结果表明:墨囊壁和导管壁由外膜、肌肉层和黏膜三部分组成;墨腺体集中在墨囊底部,呈索状,腺体中部含丰富的结缔组织;墨汁颗粒以游离态形式分布于索状腺体的间隙及墨囊腔中。实验观察到无分泌黑色素功能的A型细胞和有分泌黑色素功能的B型细胞;在B型细胞中可见黑色素颗粒储存在囊泡中,囊泡在移出细胞的过程中逐渐变大,泡内的黑色素颗粒逐渐变多。囊泡可能通过胞吐的方式排出细胞外,黑色素排出后以颗粒的形式游离于细胞间隙中,形成墨汁。 展开更多
关键词 曼氏无针乌贼 墨汁 墨囊 组织学 超微结构
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液压爬模快速施工工艺在高墩中的应用 被引量:11
18
作者 程攀 黄思友 《公路交通科技(应用技术版)》 CSCD 北大核心 2017年第7期72-74,共3页
以黄延高速扩能工程LJ-6标董家沟特大桥为工程背景,采用液压爬模装置进行高墩施工,从液压爬模的工作原理、工作效率及现场的施工工艺等方面阐述了液压爬模施工特点及优点,并对施工中应注意的问题及安全措施进行了分析,从而保证了工程安... 以黄延高速扩能工程LJ-6标董家沟特大桥为工程背景,采用液压爬模装置进行高墩施工,从液压爬模的工作原理、工作效率及现场的施工工艺等方面阐述了液压爬模施工特点及优点,并对施工中应注意的问题及安全措施进行了分析,从而保证了工程安全质量,缩短工程施工工期。 展开更多
关键词 高墩施工 液压爬模 施工工艺
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多杀性巴氏杆菌荧光RAA快速检测方法的建立 被引量:5
19
作者 杜秋明 郑秀红 +5 位作者 赵永刚 乔启波 南文龙 许龙春 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第2期120-125,共6页
为建立一种敏感特异、简便快速的多杀性巴氏杆菌检测方法,根据多杀性巴氏杆菌kmt1基因保守区序列设计特异性引物和探针,通过对反应条件优化筛选,建立了重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法。结果显示,建立的多杀性巴氏杆菌RAA荧光检... 为建立一种敏感特异、简便快速的多杀性巴氏杆菌检测方法,根据多杀性巴氏杆菌kmt1基因保守区序列设计特异性引物和探针,通过对反应条件优化筛选,建立了重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法。结果显示,建立的多杀性巴氏杆菌RAA荧光检测方法在39℃恒温条件下20 min内即可特异性的检出多杀性巴氏杆菌,与鸭疫里默氏杆菌、副猪嗜血杆菌、支原体、链球菌、大肠杆菌、附红细胞体、新孢子虫无交叉反应,方法的最低检出限为10 copies/μL,组内和组间重复性试验的变异系数均小于10%,用该方法对45份临床样本进行检测,结果阳性率为33.33%,与荧光定量PCR方法检测结果一致。本研究建立的多杀性巴氏杆菌荧光RAA检测方法操作简单、反应时间短、具有较高的特异性和敏感性,不依赖于复杂的仪器,适合临床上对多杀性巴氏杆菌的快速检测。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 重组酶介导等温扩增 快速检测
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猪塞尼卡谷病毒病现状与未来防控思考 被引量:9
20
作者 迟田英 +1 位作者 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2018年第2期53-58,共6页
最近研究发现,塞尼卡谷病毒(SVV)是引起猪原发性水疱病(PIVD)的主要原因,可导致感染猪的鼻吻、蹄冠部出现水疱性病变,新生仔猪死亡。近年来,猪塞尼卡谷病毒病陆续波及加拿大、美国、巴西、中国、泰国和哥伦比亚等国,值得高度关注。本文... 最近研究发现,塞尼卡谷病毒(SVV)是引起猪原发性水疱病(PIVD)的主要原因,可导致感染猪的鼻吻、蹄冠部出现水疱性病变,新生仔猪死亡。近年来,猪塞尼卡谷病毒病陆续波及加拿大、美国、巴西、中国、泰国和哥伦比亚等国,值得高度关注。本文介绍了猪塞尼卡谷病毒病的发现、流行现状及临床表现。提示我国应重视该病的防控工作,具体措施包括:建立健全动物水疱性疫病诊断处置方案;做好追溯研究,加强主动监测;分析病毒基因分子进化规律,关注SVV演变;继续进行病毒致病机制及宿主抗感染免疫机制等基础研究;制定SVV诊断国家标准,同时开发快速、灵敏、方便的现场诊断方法及高通量鉴别诊断方法;研制新型安全有效的SVV疫苗;加强饲养管理,提高生物安全水平。 展开更多
关键词 塞尼卡谷病毒 流行现状 临床表现 防控
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