生长分化因子11在胰腺癌中的表达及临床意义 被引量：4

1

作者 柳俨哲 邵丽娟 +4 位作者 陈况 王子政 王瑨 樊克兴 胡明根 《解放军医学院学报》 CAS 2018年第6期498-501,506,共5页

目的探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF11)在胰腺癌中的表达及意义。方法收集解放军总医院肝胆外二科2016年12月-2017年3月胰腺切除手术的28例胰腺癌组织及对应癌旁组织,以及购于上海芯超公司组织芯片中的63例... 目的探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF11)在胰腺癌中的表达及意义。方法收集解放军总医院肝胆外二科2016年12月-2017年3月胰腺切除手术的28例胰腺癌组织及对应癌旁组织,以及购于上海芯超公司组织芯片中的63例胰腺癌及对应癌旁组织。通过实时定量PCR检测28对胰腺癌和对应癌旁组织中的m RNA表达量,免疫组化法检测91对(包括自取的28对与组织芯片中的63对)胰腺癌及对应癌旁组织中的GDF11蛋白的表达情况,并分析GDF11的蛋白表达水平与临床病理指标之间的关系。结果 GDF11的m RNA水平在癌旁组织中的表达量显著高于癌组织中的表达(P=0.003);免疫组化结果显示胰腺癌组织中GDF11蛋白的高表达率为40.7%,显著性低于癌旁组织中的高表达率(71.4%)(P<0.001);GDF11的蛋白表达水平与年龄、性别、组织学分级和远处转移与否不相关(P均>0.05),GDF11的高表达与神经浸润较少(P=0.004)、T分期较低(P=0.003)、N分期较低(P=0.018)相关。结论 GDF11在胰腺癌中表达量下调,且GDF11的表达升高可能抑制胰腺癌的进展。 展开更多

关键词 生长分化因子11 胰腺癌 病理

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小鼠Foxp3融合蛋白的原核表达及纯化

2

作者 胡水清 危华峰 +6 位作者 张大鹏 史菊鲜 樊克兴 王皓 戴建新 郭亚军 张雁云 《中国血液流变学杂志》 CAS 2007年第2期181-184,共4页

目的克隆小鼠Foxp3(MFoxp3)基因,构建含该基因的原核表达载体,并表达、纯化出小鼠的Foxp3融合蛋白。方法RT-PCR方法从小鼠淋巴细胞扩增出小鼠Foxp3基因,连入T Easy Vector进行测序,然后将序列正确的小鼠Foxp3基因用酶切的方法从T Easy v... 目的克隆小鼠Foxp3(MFoxp3)基因,构建含该基因的原核表达载体,并表达、纯化出小鼠的Foxp3融合蛋白。方法RT-PCR方法从小鼠淋巴细胞扩增出小鼠Foxp3基因,连入T Easy Vector进行测序,然后将序列正确的小鼠Foxp3基因用酶切的方法从T Easy vector切下,并将其连接到用相同酶切,含有硫氧还蛋白(含6个组氨酸“标签”)的pET 32a(+)原核表达载体中构建pET 32a(+)-MFoxp3表达载体。用IPTG诱导转化pET 32a(+)-MFoxp3表达载体的大肠杆菌BL21(DE3),并以镍螯合层析法纯化MFoxp3融合蛋白。结果经RT-PCR成功地克隆了1,290 bp的小鼠Foxp3基因,测序正确后转化大肠杆菌原核表达载体pET 32a(+),重组质粒在BL21(DE3)中成功表达出分子质量约为63 kD的融合蛋白,运用Ni-NTA方法纯化出目的蛋白,纯化后的蛋白纯度达80%,并用Western Blotting检测蛋白的灵敏度和特异性。结论构建了小鼠Foxp3的融合蛋白原核表达载体并成功表达与纯化出小鼠Foxp3的融合蛋白。 展开更多

关键词 小鼠Foxp3基因 原核表达 蛋白纯化

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骨桥蛋白单克隆抗体的制备及其特异性分析 被引量：1

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作者 曹志国 杨海鸥 +5 位作者 樊克兴 王华菁 姬广辉 袁林林 康延申 戴建新 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期474-478,共5页

为了研制骨桥蛋白(OPN)特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性。本研究在毕赤酵母中表达具有良好免疫原性的重组人OPN蛋白的基础上,用重组人骨桥蛋白(rhOPN)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选杂交瘤细胞,并... 为了研制骨桥蛋白(OPN)特异性单克隆抗体(mAb),并鉴定其特异性。本研究在毕赤酵母中表达具有良好免疫原性的重组人OPN蛋白的基础上,用重组人骨桥蛋白(rhOPN)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选杂交瘤细胞,并结合免疫印迹对抗体的特异性进行鉴定,通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别的抗原位点进行分析。结果共获得4株能够识别OPN不同抗原位点的mAb,亚类测定显示,3株为IgG1,1株为IgG2a。这些mAb能与重组人OPN特异性结合。本研究的四株抗体中,只有4G2B5能够检出与肿瘤转移密切相关的OPN-c的条带,预示该抗体可用于判断肿瘤预后和高转移肿瘤的临床检测。本研究成功获得了针对骨桥蛋白的特异性mAb,同时为进一步研究OPN蛋白的结构和功能提供了重要工具。 展开更多

关键词 骨桥蛋白 肿瘤侵袭 单克隆抗体

原文传递

小细胞肺癌治疗现状 被引量：2

4

作者 田甜 张波 +2 位作者 刘洋 顾晓斌 樊克兴 《中国药物与临床》 CAS 2014年第11期1521-1523,共3页

小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）在肺癌范畴中具有临床和组织学独特性，其广泛的发病及高病死率让它成为世界瞩目的卫生问题。全球范围内有13％新诊断肺癌病例是SCLC，每年超过18万例。SCLC病例中有超过90％者现在或既往有... 小细胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）在肺癌范畴中具有临床和组织学独特性，其广泛的发病及高病死率让它成为世界瞩目的卫生问题。全球范围内有13％新诊断肺癌病例是SCLC，每年超过18万例。SCLC病例中有超过90％者现在或既往有吸烟嗜好，而且吸烟对SCLC发病的影响随着吸烟的年限及频率增加而呈正相关，也有罕见病例是没有吸烟史的［1］。过去30年，在工业化程度高的国家SCLC年发病率有所下降，这可能与吸烟方式改变有关。同时世界卫生组织（WHO）对于肺癌的分型变化可能也部分导致了这一下降趋势，因为以前被认为是界限不清的肺癌亚型后来都被归入非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）。而在那些烟民多的地区与国家诸如东欧和亚洲，SCLC的发病率仍在升高，且由于其高病死率，给人民健康和经济财产带来巨大损失。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 NSCLC 世界卫生组织 年发病率 治疗 罕见病例 CELL LUNG

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重组hTRAIL腺病毒载体的构建及其体外抗肿瘤效应的初步观察

5

作者 张瑞萍 云琳 +4 位作者 金增强 倪海东 樊克兴 周倩 郭亚军 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1144-1147,共4页

目的:利用AdEasy载体系统构建含人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)全长基因的重组腺病毒载体,并初步观察其体外对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:利用RTPCR法从人外周血单个核细胞(PBMCs)克隆人T... 目的:利用AdEasy载体系统构建含人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)全长基因的重组腺病毒载体,并初步观察其体外对肿瘤细胞的杀伤作用。方法:利用RTPCR法从人外周血单个核细胞(PBMCs)克隆人TRAIL全长基因。将hTRAIL cDNA克隆入穿梭质粒pAdTrack CMV中,与腺病毒骨架结构pAdEasy1共同转化入大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,重组子经酶切鉴定正确后,用脂质体转染入人胚肾293细胞中,包装获得重组腺病毒颗粒,Westernblot检测TRAIL蛋白的表达。将重组腺病毒颗粒体外感染对TRAIL敏感的3种人肿瘤细胞(淋巴瘤细胞Jurkat、前列腺癌细胞PC3、宫颈癌细胞HeLa)后,进行AnnexinⅤFITC/PI染色流式细胞术检测、细胞基因组的DNA电泳和锥虫蓝染色,以观察TRAIL对肿瘤细胞的杀伤作用。结果:利用RTPCR法从人PBMCs中扩增出843bp的cDNA片段,测序证实为人TRAIL基因。重组子经酶切鉴定正确,Western印迹证实感染TRAIL腺病毒的293细胞中有TRAIL蛋白的正确表达。将重组腺病毒颗粒体外感染HeLa、PC3和Jurkat细胞,4h后用AnnexinⅤFITC/PI染色,流式细胞术检测AnnexinⅤ+PI-细胞群分别占(41.15±3.12)%、(46.20±4.07)%、(38.56±3.45)%;24h后,抽提Jurkat细胞的基因组进行DNA电泳,出现细胞凋亡时特有的DNA条带;36h后用锥虫蓝对HeLa、PC3、Jurkat细胞染色,细胞死亡率分别为(75±5)%、(82±7)%、(70±5)%。结论:成功构建了hTRAIL腺病毒载体,体外感染HeLa、PC3、Jurkat肿瘤细胞后,能通过诱导细胞的凋亡而杀伤肿瘤细胞;为下一步的基因治疗和基础研究打下了基础。 展开更多

关键词 人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因 腺病毒载体 凋亡 肿瘤

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LTβR-Ig融合蛋白的真核表达及其体外生物学功能的研究 被引量：1

6

作者 周倩 崔淑芳 +3 位作者 樊克兴 吴桐 钱卫珠 郭亚军 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2007年第3期11-15,共5页

目的为了研究LTβR-Ig的生物学功能,构建重组的LTβR-Ig/pcDNA3.1(+)真核表达载体,在CHO细胞中表达,无血清扩大培养,并初步研究了融合蛋白LTβR-Ig的体外生物学活性。方法将鼠LTβR胞外段cDNA与人IgG1 Fc段cDNA共同克隆至真核表达载体pc... 目的为了研究LTβR-Ig的生物学功能,构建重组的LTβR-Ig/pcDNA3.1(+)真核表达载体,在CHO细胞中表达,无血清扩大培养,并初步研究了融合蛋白LTβR-Ig的体外生物学活性。方法将鼠LTβR胞外段cDNA与人IgG1 Fc段cDNA共同克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),转染CHO-K细胞表达,阳性克隆进行无血清培养,采用PtoteinA亲和层析的方法进行纯化;3[H]TdR参入法检测对细胞增殖的影响。结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序,结果表明克隆了正确序列的LTβR胞外段序列,成功构建了重组表达质粒LTβR-Ig/pcDNA3.1,并在CHO细胞中稳定表达了LTβR-Ig的融合蛋白,证明LTβR-Ig融合蛋白能抑制混合淋巴细胞反应。结论本研究建立了能稳定表达有生物活性的LTβR-Ig融合蛋白的真核表达系统,为今后研究LTβR在移植排斥中的作用机制,及开展基因重组药物进行疾病的生物治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 鼠LTβR 基因表达 CHO细胞株 LTβR—Ig融合蛋白

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维甲酸抗肝癌作用的研究进展 被引量：1

7

作者 樊克兴 徐荷 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期468-469,共2页

关键词 维甲酸 抗肝癌作用 肝癌 细胞凋亡

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髓系抑制性细胞在慢性乙型肝炎中的表达特点及与肝病相关性研究 被引量：1

8

作者 黄昂 闫伟伟 +5 位作者 张波 孙颖 滕光菊 李保森 樊克兴 邹正升 《肝脏》 2015年第11期844-846,共3页

目的观察不同人群和不同感染时期的慢性乙型肝炎患者外周血中CD14^+ HLA-DR^(-/low)髓系抑制性细胞(MDSC)频率、表型变化以及与疾病进程之间的关系。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD14^+ HLA-D... 目的观察不同人群和不同感染时期的慢性乙型肝炎患者外周血中CD14^+ HLA-DR^(-/low)髓系抑制性细胞(MDSC)频率、表型变化以及与疾病进程之间的关系。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD14^+ HLA-DR^(-/low)细胞频率及表面PD-L1/PD-1分子的表达。结果CHB患者外周血的CD14^+ HLA-DR^(-/low)频率明显高于健康对照;CHB患者CD14+HLA-DR-/lo频率与ALT呈负相关(R=-0.285,P=0.01),与HBV DNA载量成正相关(R=0.396,P=0.01);CHB患者外周血CD14^+ HLA-DR^(-/low)细胞上PD-1的表达高于CD14+HLA-DR+单核细胞。结论 CD14^+ HLA-DR^(-/low)细胞可能与HBV感染慢性化相关。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 CD14 HLA-DR 髓系抑制性细胞

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髓系抑制性细胞特点及在抗肿瘤治疗中研究进展

9

作者 黄昂 樊克兴 郭亚军 《中国卫生产业》 2013年第11期190-192,共3页

髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)作为一群具有免疫抑制功能的异质性细胞,与肿瘤免疫逃逸密切相关,可以通过多种途径促进肿瘤的发生发展及转移。当前研究提示MDSCs还在抗肿瘤治疗中发挥负性调控作用,降低临床治... 髓系抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)作为一群具有免疫抑制功能的异质性细胞,与肿瘤免疫逃逸密切相关,可以通过多种途径促进肿瘤的发生发展及转移。当前研究提示MDSCs还在抗肿瘤治疗中发挥负性调控作用,降低临床治疗措施的效能并可能协助肿瘤细胞产生耐药,但具体机制尚不很明确。本文就MDSCs的一般生物学特征,以及MDSCs在肿瘤免疫治疗、分子靶向治疗与化疗中所发挥作用及相应机制作一综述,以期为打破肿瘤内科治疗的局限性提供参考。 展开更多

关键词 肿瘤免疫 髓系抑制性细胞 免疫抑制 抗肿瘤治疗

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Foxp3在肺癌细胞中的表达及对肺癌细胞侵袭和转移的影响

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作者 林群英 樊克兴 +3 位作者 林国盛 郭丽景 陈国欢 林娟 《莆田学院学报》 2015年第5期11-15,共5页

研究Foxp3在三株人肺癌细胞系A549、NCI-H209和95-D中的表达情况及其对肺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。实时荧光定量RT-PCR和Western-blot方法检测Foxp3在三株肺癌细胞系中的m RNA和蛋白水平;构建Foxp3干扰RNA,并瞬时转染A549细胞;MT... 研究Foxp3在三株人肺癌细胞系A549、NCI-H209和95-D中的表达情况及其对肺癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。实时荧光定量RT-PCR和Western-blot方法检测Foxp3在三株肺癌细胞系中的m RNA和蛋白水平;构建Foxp3干扰RNA,并瞬时转染A549细胞;MTS细胞增殖实验、细胞侵袭及划痕实验研究Foxp3对A549细胞体外增殖、侵袭以及转移能力的影响。结果:在三株肺癌细胞系中,相对于正常肺上皮细胞,Foxp3的m RNA和蛋白水平均呈高表达,其中在A549细胞中表达水平最高。细胞免疫荧光检测发现Foxp3主要定位于肺癌的细胞质中。瞬转Foxp3干扰RNA至A549细胞,可以明显促进肺癌细胞的侵袭和转移,但是对肺癌细胞的增殖无显著影响。此外,还发现干扰Foxp3表达可以显著上调MMP-9和u PA的表达水平。结果表明,Foxp3在肺癌细胞中呈高表达,其在肺癌中可能发挥抑癌作用。 展开更多

关键词 FOXP3 肺癌细胞 细胞增殖 侵袭 转移

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一起由食物传播引起的伤寒爆发调查报告

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作者 樊克兴 徐荷 《现代预防医学》 CAS 2001年第3期336-336,共1页

关键词 食物传播 伤寒 爆发 流行病学

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