目的探讨胰岛素样生长因子I(IGF-I)对破骨细胞骨吸收的促进作用是否需要成骨细胞的协同。方法体外培养MC3T3小鼠成骨细胞及NF—KB受体的配体(receptor activator o fNF—KBligand,RANKL)诱导分化成熟的破骨细胞,分别给予重组人胰...目的探讨胰岛素样生长因子I(IGF-I)对破骨细胞骨吸收的促进作用是否需要成骨细胞的协同。方法体外培养MC3T3小鼠成骨细胞及NF—KB受体的配体(receptor activator o fNF—KBligand,RANKL)诱导分化成熟的破骨细胞,分别给予重组人胰岛素样生长因子I(rhIGF—I)进行干预,Western印迹检测IGF—I受体的活化情况。以0、10ng/ml的rhIGF—I直接干预破骨细胞或与成骨细胞在Transwell双层培养板中共培养的破骨细胞,MTT法测定破骨细胞增殖;流式细胞仪检测破骨细胞凋亡率:实时PCR检测组织蛋白酶K基因的表达。将不同方式干预的破骨细胞接种在骨磨片上,光镜观察骨吸收陷窝的形成。结果在成骨细胞、破骨细胞表面均检测到可被IGF—I激活的IGF—I受体。仅在成骨细胞、破骨细胞共培养时rhIGF—I能够促进破骨细胞活细胞的增殖(P〈0.05);抑制破骨细胞的凋亡(P〈0.05);上调组织蛋白酶K基因的表达(P〈0.05);增加骨吸收陷窝的数量及面积。IGF—I对单独培养的破骨细胞则作用不明显。结论IGF—I对破骨细胞骨吸收的促进作用需要成骨细胞的协同。展开更多
文摘目的探讨胰岛素样生长因子I(IGF-I)对破骨细胞骨吸收的促进作用是否需要成骨细胞的协同。方法体外培养MC3T3小鼠成骨细胞及NF—KB受体的配体(receptor activator o fNF—KBligand,RANKL)诱导分化成熟的破骨细胞,分别给予重组人胰岛素样生长因子I(rhIGF—I)进行干预,Western印迹检测IGF—I受体的活化情况。以0、10ng/ml的rhIGF—I直接干预破骨细胞或与成骨细胞在Transwell双层培养板中共培养的破骨细胞,MTT法测定破骨细胞增殖;流式细胞仪检测破骨细胞凋亡率:实时PCR检测组织蛋白酶K基因的表达。将不同方式干预的破骨细胞接种在骨磨片上,光镜观察骨吸收陷窝的形成。结果在成骨细胞、破骨细胞表面均检测到可被IGF—I激活的IGF—I受体。仅在成骨细胞、破骨细胞共培养时rhIGF—I能够促进破骨细胞活细胞的增殖(P〈0.05);抑制破骨细胞的凋亡(P〈0.05);上调组织蛋白酶K基因的表达(P〈0.05);增加骨吸收陷窝的数量及面积。IGF—I对单独培养的破骨细胞则作用不明显。结论IGF—I对破骨细胞骨吸收的促进作用需要成骨细胞的协同。