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石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应影响因素的研究 被引量：11
1
作者 赵吉生 盖宝东 +4 位作者 森隆弘 滕盛启成 大内宪明 里见进 张德恒 《中国实验诊断学》 2003年第4期330-331,共2页
目的　探讨石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。方法　应用从石蜡包埋组织中提取的DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子 ,分析石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。结果　 10 .0 μm× 1组织切... 目的　探讨石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。方法　应用从石蜡包埋组织中提取的DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子 ,分析石蜡包埋组织中提取DNA应用于PCR反应的影响因素。结果　 10 .0 μm× 1组织切片组 ,PCR反应循环次数 4 0次组 ,PCR反应模板量 0 .0 5 μg组PCR反应取得高质量目的基因DNA。结论　减少提取组织用量有利于减少抑制PCR物质的量 ,有利于反应的成功 ;PCR反应循环次数一般应大于 4 0次 ;PCR反应时减少模板量有利于PCR反应成功。 展开更多
关键词 石蜡包埋组织 DNA PCR反应 影响因素 研究
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PCR反应体系中Mg^(2+)浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响 被引量：2
2
作者 盖宝东 杨新宇 +6 位作者 赵吉生 张学文 森隆弘 滕盛启成 大内宪明 里见进 张德恒 《中国实验诊断学》 2004年第4期384-386,共3页
目的　探讨PCR反应体系中Mg2 + 浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响。方法　从石蜡包埋组织中提取DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 13外显子 ,分析PCR反应体系中Mg2 + 浓度分别为1 5mmol L、2 0mmol L、2 5mmol L... 目的　探讨PCR反应体系中Mg2 + 浓度对从石蜡包埋组织中提取DNA进行PCR反应的影响。方法　从石蜡包埋组织中提取DNA ,PCR反应扩增甲状腺髓样癌RET基因第 13外显子 ,分析PCR反应体系中Mg2 + 浓度分别为1 5mmol L、2 0mmol L、2 5mmol L、3 0mmol L、4 0mmol L时PCR反应产物中目的基因含量及对PCR产物基因序列测定的影响。结果　 5种条件扩增的目的基因经纯化后DNA含量分别为 4 8ng μl(1 5mmol L)、2 6 6ng μl(2 0mmol L)、4 0 2ng μl(2 5mmol L)、38 5ng μl(3 0mmol L)、4 4 5ng μl(4 0mmol L) ;Mg2 + 浓度为 4 0mmol L时PCR产物电泳图见到多条非特异性条带 ;Mg2 + 浓度为 2 5mmol L时PCR产物直接测序反应曲线峰图背景噪音 (噪峰 )减小 ,信噪比 (信号 噪音 )增高。结论　从石蜡包埋组织中提取DNA行PCR反应 ,Mg2 + 浓度为 2 5mmol L时反应特异性强 ,PCR产物质量高。较高的Mg2 + 浓度可以增加PCR反应产量 。 展开更多
关键词 MG^2+ 石蜡包埋组织 DNA提取 多聚酶链反应 DNA序列测定
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散发型甲状腺髓样癌RET基因突变的研究 被引量：2
3
作者 盖宝东 金仲田 +4 位作者 森隆弘 张德恒 滕盛启成 里见进 郑泽霖 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期618-620,共3页
目的 :研究散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因 ( RET)的突变情况。方法 :提取1 7例中国人散发型甲状腺髓样癌基因组 DNA,PCR扩增该基因第 1 3外显子全部序列 ,纯化目的基因 DNA后直接序列测定。结果 :分析测序图发现所有散发型甲状... 目的 :研究散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因 ( RET)的突变情况。方法 :提取1 7例中国人散发型甲状腺髓样癌基因组 DNA,PCR扩增该基因第 1 3外显子全部序列 ,纯化目的基因 DNA后直接序列测定。结果 :分析测序图发现所有散发型甲状腺髓样癌在该基因的第 1 8973和 1 8974位点之间均有一个鸟嘌呤插入突变 ,插入突变位于该基因的第 1 3外显子和内含子之间。结论 :此位点突变对酪氨酸激酶受体蛋白表达的影响和在散发型甲状腺髓样癌的发生。 展开更多
关键词 散发型甲状腺髓样癌 酪氨酸激酶受体基因 基因突变
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散发型甲状腺髓样癌RET基因第11外显子序列分析 被引量：1
4
作者 赵吉生 盖宝东 +5 位作者 张学文 森隆弘 滕盛启成 大内宪名 里见进 张德恒 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第12期736-737,共2页
目的分析散发型甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子碱基序列 ,明确RET基因突变与散发型甲状腺髓样癌的关系。方法提取 17例散发型甲状腺髓样癌基因组DNA ,PCR扩增RET基因第 11外显子 ,PCR产物经纯化后直接测序。结果分析测序图发现 1例病... 目的分析散发型甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子碱基序列 ,明确RET基因突变与散发型甲状腺髓样癌的关系。方法提取 17例散发型甲状腺髓样癌基因组DNA ,PCR扩增RET基因第 11外显子 ,PCR产物经纯化后直接测序。结果分析测序图发现 1例病例在该基因第15 16 5位碱基处G→A突变 ,导致丝氨酸691→赖氨酸错意突变。结论散发型甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子基因突变率较低 ;散发型甲状腺髓样癌致病的关键基因可能位于该基因的其他外显子或其他基因上。 展开更多
关键词 散发型甲状腺髓样癌 RET基因 第11外显子 序列分析
原文传递
散发型甲状腺髓样癌及正常甲状腺组织RET基因第13外显子碱基序列分析 被引量：1
5
作者 盖保东 森隆弘 +5 位作者 滕盛启成 大内宪名 里见进 张德恒 郑泽霖 刘晶 《内分泌外科杂志》 2008年第5期292-294,共3页
目的研究散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因（RET）第13外显子的突变情况。方法提取17例散发型甲状腺髓样癌和4例正常甲状腺组织基因组的DNA,PCR扩增该基因第13外显子全部序列,纯化目的基因DNA后直接序列测定。结果与Genebank比较... 目的研究散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因（RET）第13外显子的突变情况。方法提取17例散发型甲状腺髓样癌和4例正常甲状腺组织基因组的DNA,PCR扩增该基因第13外显子全部序列,纯化目的基因DNA后直接序列测定。结果与Genebank比较全部散发型甲状腺髓样癌和正常甲状腺组织在RET基因第18973和18974位点之间均有一个鸟嘌呤插入,插入点位于该基因的第13外显子和第13内含子之间。结论该位点处鸟嘌呤插入不是基因突变,可能为不同人种间基因组差异或Genebank存在错误。 展开更多
关键词 散发型甲状腺髓样癌 酪氨酸激酶受体基因 基因突变 GENEBANK
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散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因第918位点基因突变及意义 被引量：1
6
作者 盖宝东 森隆弘 +4 位作者 膝盛启成 大内宪名 里见进 张德恒 郑泽霖 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期319-321,共3页
目的研究不同人种散发型甲状腺髓样癌(sMTC)酪氨酸激酶受体基因(RET)第 918位点基因突变及意义。方法提取17例中国人sMTC基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增 RET基因第16外显子,PCR产物经纯化后直接测序,分析中国人sMTC RET基因第918位点... 目的研究不同人种散发型甲状腺髓样癌(sMTC)酪氨酸激酶受体基因(RET)第 918位点基因突变及意义。方法提取17例中国人sMTC基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增 RET基因第16外显子,PCR产物经纯化后直接测序,分析中国人sMTC RET基因第918位点处基因突变,并与文献报道的其他人种sMTC该位点处基因突变比较。结果中国人sMTC此位点处未发现基因突变;黄种人、白种人、棕种人此位点处基因突变率分别为:7．1％、33．5％、50．0％,基因突变形式均为ATG→ACG点突变。白种人与黄种人,棕种人与黄种人间比较均差异有统计学意义 (P<0．05)。结论中国人sMTC发病与RET基因第918位点处基因突变无关;不同人种sMTC此位点处基因突变率有差异;不同人种sMTC发病的基因基础可能不同。 展开更多
关键词 甲状腺癌 基因突变
原文传递
西藏山南地区甲状腺疾病的实地考察报告——关于缺碘地区食用加碘食盐后甲状腺疾病的变化
7
作者 次仁顿单 陈瑞新 +7 位作者 田晓丰 张德恒 滕盛启成 中岛范昭 渡边道雄 大友浩志 森隆弘 福田かぉり 《西藏科技》 2005年第2期24-26,共3页
自 2 0世纪 70年代以来 ,我国各地逐步食用加碘食盐后 ,西藏地区的缺碘状况也得到了改善。地方性甲状腺肿的发病率明显减少 ,但实际情况并不完全明确。因此 ,我们于 2 0 0 0年 ,2 0 0 1年在西藏山南地区进行了甲状腺触诊 ,B型超声检查... 自 2 0世纪 70年代以来 ,我国各地逐步食用加碘食盐后 ,西藏地区的缺碘状况也得到了改善。地方性甲状腺肿的发病率明显减少 ,但实际情况并不完全明确。因此 ,我们于 2 0 0 0年 ,2 0 0 1年在西藏山南地区进行了甲状腺触诊 ,B型超声检查、甲状腺功能及尿中碘的测定。根据实地考察测定结果 ,明确了山南地区甲状腺疾病的发病情况及补碘现状 ,为今后的防治工作提供参考依据。 展开更多
关键词 甲状腺疾病 缺碘地区 食用 B型超声检查 甲状腺触诊 甲状腺功能 地方性甲状腺肿 山南地区 实地考察 参考依据
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