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一种β-1,3-木聚糖特异性结合蛋白的克隆表达、性质研究及其应用
1
作者 蒋笑笑 梅轩玮 +5 位作者 刘冠辰 张玉莹 孙海涛 陈环环 常耀光 薛长湖 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期11-16,共6页
β-1,3-木聚糖是紫菜等海藻中的重要结构多糖。多糖结合蛋白是多糖研究的关键工具,常被用作探针服务于多糖的原位分析;其中,碳水化合物结合结构域(carbohydrate-binding module,CBM)是一类被广泛应用的多糖结合蛋白。该研究从公共基因... β-1,3-木聚糖是紫菜等海藻中的重要结构多糖。多糖结合蛋白是多糖研究的关键工具,常被用作探针服务于多糖的原位分析;其中,碳水化合物结合结构域(carbohydrate-binding module,CBM)是一类被广泛应用的多糖结合蛋白。该研究从公共基因数据库中挖掘得到了一条潜在具有β-1,3-木聚糖结合能力的CBM6家族序列,并对该序列进行了异源表达及亲和纯化,得到电泳纯蛋白,命名为VaCBM6。该蛋白表现出对β-1,3-木聚糖的特异性结合能力,结合常数为3.0×10^(5)(mol/L)^(-1)。将该蛋白与绿色荧光蛋白EmGFP融合表达构建出首个β-1,3-木聚糖的特异性荧光探针,以该探针为工具实现了紫菜中β-1,3-木聚糖的荧光显微观察,证实了VaCBM6在β-1,3-木聚糖原位分析中的良好应用潜力。VaCBM6的挖掘与表征为β-1,3-木聚糖的研究与开发提供了良好工具。 展开更多
关键词 β-1 3-木聚糖 紫菜 碳水化合物结合结构域 荧光探针 原位分析
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基于碳水化合物结合结构域的香菇多糖特异性荧光探针的构建与应用
2
作者 李静敏 薛长湖 +3 位作者 梅轩玮 刘冠辰 韩瑾 常耀光 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第19期240-246,共7页
为构建得到香菇多糖特异性荧光探针以实现香菇多糖的原位可视化观察,本研究利用生物信息学技术从β-1,3-D-葡聚糖酶TlGluA中挖掘得到一个潜在具有香菇多糖结合能力的碳水化合物结合结构域,并对其进行了重组表达及分离纯化,重组蛋白命名... 为构建得到香菇多糖特异性荧光探针以实现香菇多糖的原位可视化观察,本研究利用生物信息学技术从β-1,3-D-葡聚糖酶TlGluA中挖掘得到一个潜在具有香菇多糖结合能力的碳水化合物结合结构域,并对其进行了重组表达及分离纯化,重组蛋白命名为LBM,进一步利用微量滴定板法研究了LBM的结合特异性。结果表明LBM能够结合香菇多糖,但未表现出对大麦β-葡聚糖、凝结多糖或魔芋葡甘露聚糖的结合能力,这证实该蛋白对香菇多糖具有良好的结合特异性。此外,通过将LBM与绿色荧光蛋白EmGFP融合表达构建得到首个香菇多糖特异性荧光探针,命名为EmGFP-LBM,基于该探针实现了香菇多糖在香菇中的原位可视化观察。研究发现,香菇多糖不仅存在于菌丝细胞壁中,还以散在状态分布于菌丝细胞间隙与细胞内部。本研究成功构建得到首个香菇多糖特异性荧光探针,为香菇多糖的原位可视化观察提供了关键工具。 展开更多
关键词 香菇 香菇多糖 碳水化合物结合结构域 荧光探针 原位可视化
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湿热协同海藻酸钠处理对普通玉米淀粉物化性质的影响（英文） 被引量：4
3
作者 王雨生 梅轩玮 +1 位作者 陈海华 陈建刚 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第23期34-43,共10页
为研究湿热协同海藻酸钠处理(heat moisture treatment combined with sodium alginate,HMT-AG)对普通玉米淀粉(normal corn starch,NCS)性质的影响,以单独湿热处理(heat moisture treatment,HMT)为对照,探讨了HMT-AG对NCS糊化、热力学... 为研究湿热协同海藻酸钠处理(heat moisture treatment combined with sodium alginate,HMT-AG)对普通玉米淀粉(normal corn starch,NCS)性质的影响,以单独湿热处理(heat moisture treatment,HMT)为对照,探讨了HMT-AG对NCS糊化、热力学性质、结晶结构及凝胶性质等的影响。湿热处理条件分别为水分质量分数15%-35%、处理温度80-120℃、处理时间1~15 h。结果表明:HMT-AG使NCS的成糊温度升高,衰减值、回生值、糊化焓显著降低(P<0.05);HMT或HMT-AG均不改变NCS的X射线衍射峰型,水分质量分数大于25%的HMT显著降低了NCS的相对结晶度(relative crystallinity,RC)(P<0.05),但同条件HMT-AG显著升高了NCS的RC(P<0.05);当以水分质量分数25%、120℃条件处理6 h时,与HMT相比,HMT-AG对NCS黏度、起始糊化温度、凝胶硬度的降低影响更为显著(P<0.05)。 展开更多
关键词 湿热处理 海藻酸钠 凝胶硬度 糊化性质 热力学性质 结晶结构
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非对称异构信息网络的模糊推荐算法 被引量：3
4
作者 王永贵 梅轩玮 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2020年第23期74-79,共6页
传统的协同过滤推荐算法存在普遍的数据稀疏性问题;应用于推荐算法领域的异构信息网络模型对对象的相似关系认定通常是对称的,这种对称关系的认定在实际问题的处理中存在局限性。为解决上述问题,提出一种非对称异构信息网络的模糊推荐... 传统的协同过滤推荐算法存在普遍的数据稀疏性问题;应用于推荐算法领域的异构信息网络模型对对象的相似关系认定通常是对称的,这种对称关系的认定在实际问题的处理中存在局限性。为解决上述问题,提出一种非对称异构信息网络的模糊推荐算法。该算法利用模糊集理论在处理用户喜好程度方面的优势,从模糊的信息种获取用户的准确偏好,根据异构信息网络中元路径的丰富语义信息,获取不同角度的用户关联,在相似度计算中引入对象关系的非对称系数,对不同特征元路径的计算结果进行加权,以此提高用户之间相似关系的准确度,通过矩阵分解的方法实现评分预测。实验结果表明,该算法有效解决了数据稀疏性问题,提升了推荐精度。 展开更多
关键词 模糊集 异构信息网络 元路径 非对称系数
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