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CTB-FimA融合蛋白原核表达纯化及其免疫效果 被引量:1
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作者 李智涛 +3 位作者 韩海芳 王烁 陈义祥 高社干 《生物技术》 CAS 2024年第1期12-19,共8页
[目的]构建牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)菌毛蛋白(FimA)与霍乱毒素B亚基(CTB)重组质粒pET-32a/CTB-FimA,表达纯化CTB-FimA融合蛋白并对其黏膜免疫效果进行研究。[方法]根据GenBank查找FimA基因和CTB基因,利用(Gly4Ser)... [目的]构建牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)菌毛蛋白(FimA)与霍乱毒素B亚基(CTB)重组质粒pET-32a/CTB-FimA,表达纯化CTB-FimA融合蛋白并对其黏膜免疫效果进行研究。[方法]根据GenBank查找FimA基因和CTB基因,利用(Gly4Ser)3连接肽序列构建pET-32a/CTB-FimA原核表达质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),确定IPTG诱导浓度及温度,SDS-PAGE分析目的蛋白的可溶性;采用亲和层析和凝胶过滤层析纯化目的蛋白CTB-FimA;用纯化的目的蛋白作为免疫原鼻腔滴注免疫BALB/c小鼠观察其黏膜免疫效果。[结果]经双酶切和测序鉴定pET-32a/CTB-FimA重组表达质粒构建成功;IPTG最适诱导浓度为0.5 mmol/L,最适诱导温度为23℃,重组蛋白CTB-FimA主要以可溶形式表达;Expasy软件ProtParam工具预测重组蛋白分子量约为72.08 kDa,亲水性总平均值为-0.313;每升发酵液表达CTB-FimA蛋白约100 mg;免疫BALB/c小鼠产生sIgA抗体效价显著高于对照组。[结论]成功构建pET-32a/CTB-FimA重组蛋白表达质粒,获得可溶性CTB-FimA重组蛋白,鼻腔滴注免疫BALB/c小鼠能够产生高效价的sIgA抗体,为防治口腔牙龈卟啉单胞菌感染疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 CTB-FimA重组蛋白 诱导表达 亲和层析 凝胶过滤层析 鼻腔黏膜免疫
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我国农村居民消费意愿的政策效果检验 被引量:4
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作者 汤渌洋 萧志彬 《统计与决策》 CSSCI 北大核心 2020年第19期78-82,共5页
文章基于1985—2018年我国农村居民消费水平与农村家庭人均纯收入的数据进行了研究,通过邹断点和格兰杰因果关系检验,建立了ARIMA模型和虚拟变量模型,分析了中央出台的一系列惠农政策对农村居民消费意愿的影响,检验政策的效果。结果表明... 文章基于1985—2018年我国农村居民消费水平与农村家庭人均纯收入的数据进行了研究,通过邹断点和格兰杰因果关系检验,建立了ARIMA模型和虚拟变量模型,分析了中央出台的一系列惠农政策对农村居民消费意愿的影响,检验政策的效果。结果表明,在政策的扶持下,我国农村居民的家庭人均纯收入和消费水平逐年上升,农村居民消费水平在1999年和2010年两个断点前后的发展速度有明显提升。实证表明国家的"新农合""家电下乡""取消农业税"等一系列经济政策对提升农村居民消费意愿效果非常明显。 展开更多
关键词 ARIMA模型 虚拟变量模型 政策效果 消费意愿
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牙龈卟啉单胞菌疫苗的研究进展 被引量:2
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作者 李智涛 +3 位作者 郑月月 韩海芳 王烁 高社干 《食管疾病》 2022年第3期172-176,共5页
牙龈卟啉单胞菌(Pg)是一种主要的牙周致病菌。研究表明牙龈卟啉单胞菌表面多种抗原可以作为疫苗免疫原诱导机体产生保护性免疫应答。为了有效预防牙龈卟啉单胞菌引起的全身或局部疾病,合适的免疫佐剂和免疫途径能够进一步增强牙龈卟啉... 牙龈卟啉单胞菌(Pg)是一种主要的牙周致病菌。研究表明牙龈卟啉单胞菌表面多种抗原可以作为疫苗免疫原诱导机体产生保护性免疫应答。为了有效预防牙龈卟啉单胞菌引起的全身或局部疾病,合适的免疫佐剂和免疫途径能够进一步增强牙龈卟啉单胞菌疫苗的免疫效果。本文从牙龈卟啉单胞菌疫苗免疫原、免疫佐剂、免疫途径及其相关疾病等方面,综述了近年来牙龈卟啉单胞菌疫苗研究的重要进展,旨在为预防牙周炎及牙龈卟啉单胞菌引起的其它相关疾病提供新思路。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 疫苗 免疫原 免疫佐剂 免疫途径
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Pg FimA Ⅱ型特异性单克隆抗体制备及鉴定
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作者 韩海芳 李智涛 +3 位作者 王烁 谷变利 高社干 《生物技术》 CAS 2023年第6期677-682,共6页
[目的]诱导表达、纯化牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)FimAⅡ蛋白,将其作为免疫原制备抗Pg FimAⅡ单克隆抗体(mAbs),对抗体特性进行初步研究。[方法]将BL21-pET28a-FimAⅡ菌株诱导表达,镍柱亲和层析纯化重组蛋白并作为抗... [目的]诱导表达、纯化牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)FimAⅡ蛋白,将其作为免疫原制备抗Pg FimAⅡ单克隆抗体(mAbs),对抗体特性进行初步研究。[方法]将BL21-pET28a-FimAⅡ菌株诱导表达,镍柱亲和层析纯化重组蛋白并作为抗原免疫BALB/c小鼠,经PEG融合法和腹水法获得FimAⅡ单克隆抗体;分别采用SDS-PAGE法、酶联免疫吸附实验检测抗体纯度、效价和亚型,Western Blot和Biacore检测抗体的特异性和亲和力。[结果]FimAⅡ重组蛋白为可溶性表达,最适诱导条件为1 mmol/L IPTG诱导12 h;纯化后的重组蛋白纯度为90%以上,该免疫原制备的FimAⅡ单克隆抗体为IgG1亚类,kappa亚型,效价为1:8×104以上,特异性良好,亲和力可达到9nM。[结论]成功诱导表达、纯化FimAⅡ蛋白并制备抗Pg FimAⅡ特异性单克隆抗体,为后续开发快速检测Pg诊断试纸条奠定基础。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 FimAⅡ菌毛蛋白 FimAⅡ型特异性单克隆抗体 特性鉴定
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河南省高校科技创新能力研究 被引量:1
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作者 《合作经济与科技》 2018年第17期110-113,共4页
科技创新能力的大小衡量着一所高校科研水平及办学层次的高低。通过构建科技创新投入、科技创新产出2个一级指标,科技创新人力投入、财力投入等6个二级指标以及教学与科研人员、研究与发展人员等21个三级指标的科技创新能力评价体系,以... 科技创新能力的大小衡量着一所高校科研水平及办学层次的高低。通过构建科技创新投入、科技创新产出2个一级指标,科技创新人力投入、财力投入等6个二级指标以及教学与科研人员、研究与发展人员等21个三级指标的科技创新能力评价体系,以河南省2012~2016年相关数据为研究对象,运用熵值法赋权的灰色关联度对其进行分析,得出近5年来河南省高校科技创新能力有着显著的提高,但在科技创新产出方面还有待提升。 展开更多
关键词 科技创新能力 指标体系 熵值法 灰色关联度
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牙龈卟啉单胞菌菌毛与消化道肿瘤关系研究
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作者 郑月月 李智涛 +2 位作者 韩海芳 高社干 《食管疾病》 2020年第3期179-185,共7页
牙龈卟啉单胞菌(Pg)是引起牙周病的一个重要致病因素,并可引起多种疾病,如冠心病、糖尿病、肿瘤等。Pg与消化道肿瘤,包括口腔鳞状细胞癌、食管鳞癌、胰腺癌以及结直肠癌有密切关系。本文重点介绍Pg菌毛的致病及免疫颠覆机制、Pg与消化... 牙龈卟啉单胞菌(Pg)是引起牙周病的一个重要致病因素,并可引起多种疾病,如冠心病、糖尿病、肿瘤等。Pg与消化道肿瘤,包括口腔鳞状细胞癌、食管鳞癌、胰腺癌以及结直肠癌有密切关系。本文重点介绍Pg菌毛的致病及免疫颠覆机制、Pg与消化道肿瘤的关系。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 菌毛 消化道肿瘤 免疫破坏
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牙龈卟啉单胞菌快速诊断方法研究进展
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作者 韩海芳 李智涛 +3 位作者 郑月月 王烁 高社干 《食管疾病》 2022年第4期248-252,共5页
口腔微生物群是人体内最多样化的微生物群落之一,目前已经鉴定的物种分类有700多种。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是导致牙周炎的主要病原体之一。另外,Pg还与其它多种疾病相关,如食管癌、口腔癌、阿尔茨海默病和风湿... 口腔微生物群是人体内最多样化的微生物群落之一,目前已经鉴定的物种分类有700多种。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是导致牙周炎的主要病原体之一。另外,Pg还与其它多种疾病相关,如食管癌、口腔癌、阿尔茨海默病和风湿病等。因此,Pg的精准检测对于牙周炎以及其它相关疾病的诊断具有重要的临床意义。本文将主要从细菌学、免疫学、分子生物学以及新兴技术等方面,综述Pg诊断检测相关的研究进展。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 细菌学 免疫学 分子生物学 快速诊断
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