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二妙散对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞分化的影响 被引量：5
1
作者 何莲花 栾慧杰 +3 位作者 何娟 王小成 虎义平 王庆文 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期66-72,共7页
目的:观察古代经典名方二妙散(EMS)对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)分化的影响。方法:按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS(5.4 g·kg^(-1))组及甲氨蝶呤(MTX,0.5 mg·... 目的:观察古代经典名方二妙散(EMS)对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)分化的影响。方法:按体质量将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、CIA组,EMS(5.4 g·kg^(-1))组及甲氨蝶呤(MTX,0.5 mg·kg^(-1))组。CIA组、EMS组及MTX组在第1天以等体积牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以等体积牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂于尾根部有别于第1次免疫部位免疫DBA/1小鼠建立CIA模型(此为第2次免疫),并于第2次免疫当天开始灌胃给药,除MTX为每周3次外,其余每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察CIA小鼠关节滑膜炎症的情况;免疫荧光(IF)双标法检测CIA小鼠关节中CD4+T细胞中Th17细胞标志物白细胞介素-17(IL-17)和Treg细胞标志物叉头框转录因子P3(FoxP3)在关节滑膜中的表达情况;流式细胞术检测小鼠脾脏及淋巴结中Th17和Treg的细胞比例情况。结果:与正常组比较,CIA组小鼠关节滑膜炎症情况明显,小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重(P<0.01);小鼠关节组织中Th17/Treg值显著升高(P<0.01);小鼠脾脏及淋巴结中Th17的细胞表达比例显著增高(P<0.01),Treg细胞表达比例显著减少(P<0.01);与CIA组比较,EMS组和MTX组两组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;EMS组和MTX组两组中Th17/Treg值显著降低(P<0.01);小鼠脾脏及淋巴结组织中,EMS组、MTX组Th17细胞表达比例显著降低(P<0.01),Treg细胞的表达比例显著增加(P<0.01)。结论:EMS通过调节Th17/Treg平衡,抑制CIA小鼠中Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,进而治疗RA。 展开更多
关键词 二妙散 胶原诱导型关节炎 辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg) 分化
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防己黄芪汤治疗类风湿关节炎的研究进展
2
作者 何莲花 栾慧杰 +2 位作者 何娟 虎义平 王庆文 《江西中医药》 CAS 2023年第3期70-72,77,共4页
类风湿关节炎(RA)是一种慢性、自身免疫性疾病,属于中医“痹证”范畴。防己黄芪汤出自汉朝张仲景的《金匮要略》,是历代公认的祛风除湿良方,该方组方精妙,配伍严谨,既可益气固表,又可祛风行水,是治疗风寒湿痹中湿痹的有效方剂。防己黄... 类风湿关节炎(RA)是一种慢性、自身免疫性疾病,属于中医“痹证”范畴。防己黄芪汤出自汉朝张仲景的《金匮要略》,是历代公认的祛风除湿良方,该方组方精妙,配伍严谨,既可益气固表,又可祛风行水,是治疗风寒湿痹中湿痹的有效方剂。防己黄芪汤记载于各医学古典中,具体内容稍有变化,但主要用于风寒湿痹证。临床上可单独或者和其他药物合用,用于RA的治疗。现代药理学研究表明,防己黄芪汤具有抗炎、抗肿瘤及免疫调节等作用。而防己黄芪汤在RA的实验研究中表明,防己黄芪汤可有效减轻RA动物模型的关节炎症状。现从防己黄芪汤成方源流、配伍理论、临床研究、药理学研究及基础研究等方面为防己黄芪汤的研究进展进行简单综述,为防己黄芪汤治疗RA的基础研究及临床应用提供参考依据。 展开更多
关键词 防己黄芪汤 类风湿关节炎 研究进展
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类风湿关节炎相关肺间质病变危险因素的Meta分析 被引量：1
3
作者 吴琦 栾慧杰 +1 位作者 何娟 王庆文 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期607-614,共8页
目的了解类风湿关节炎相关肺间质病变(RA-ILD)的危险因素。方法通过检索Pubmed、Sinomed、Embase、Wiley online library、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网、万方数据库、维普数据库、NSTL开放学术资源系统网等搜集RA-ILD危险因... 目的了解类风湿关节炎相关肺间质病变(RA-ILD)的危险因素。方法通过检索Pubmed、Sinomed、Embase、Wiley online library、中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知网、万方数据库、维普数据库、NSTL开放学术资源系统网等搜集RA-ILD危险因素相关的文献,检索年限为建库至2021年1月1日,采用纽卡斯尔-渥太华质量评估量表(NOS)对纳入的文献进行质量评价,提取纳入的文献数据后,利用Review Manager 5.3和Stata SE12.0统计软件进行Meta分析。结果纳入的Meta分析的36篇文献,RA-ILD组有3280例,RA-nILD组有25510例。RA-ILD的发生率为6.25%,男性RA-ILD的风险是女性的2.51倍[OR(95%CI)=2.51(2.25,2.80)]。RA-ILD组患者的发病年龄均比RA-nILD组大7.47岁[56.50岁与49.04岁,95%CI(6.56,8.38)岁]。RA-ILD组平均病程比RA-nILD组长1.11年[7.73年与6.62年,95%CI(0.68,1.55)年]。吸烟的RA患者出现ILD的风险是非吸烟者的2.25倍[OR(95%CI)=2.25(2.01,2.52)]。ESR增快、CRP升高、DAS28-ESR升高均为RA-ILD中度危险因素(分别为SMD(95%CI)=0.25(0.18,0.31);SMD(95%CI)=(0.18,0.32);SMD(95%CI)=0.36(0.27,0.45)]。RF阳性及抗CCP抗体阳性的RA患者发生ILD风险分别是阴性者的1.71倍[OR(95%CI)=1.71(1.45,2.01)]、2.41倍[OR(95%CI)=2.41(1.80,3.23)]。结论男性、吸烟、高龄、长病程、ESR快、CRP高、DAS28-ESR高、RF及抗CCP抗体阳性是RA-ILD的危险因素。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 肺疾病 间质性 危险因素 META分析
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防己黄芪汤对脐静脉内皮细胞功能的影响 被引量：2
4
作者 何莲花 覃清霞 +4 位作者 吴青 栾慧杰 何娟 何文成 王庆文 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期8-14,共7页
目的:防己黄芪汤对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力的作用。方法:VEGF(20μg·L^(-1))体外诱导HUVECs,加入不同质量浓度防己黄芪汤(0.25,0.5,1 g·L^(-1))作用后,... 目的:防己黄芪汤对血管内皮生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力的作用。方法:VEGF(20μg·L^(-1))体外诱导HUVECs,加入不同质量浓度防己黄芪汤(0.25,0.5,1 g·L^(-1))作用后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、划痕修复实验、转移小室(transwell)迁移、黏附、侵袭及管腔形成实验检测防己黄芪汤对VEGF诱导的HUVECs功能的影响。提取HUVECs中的蛋白,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化Janus激酶1(p-JAK1)的蛋白表达水平。结果:与空白组比较,VEGF(20μg·L^(-1))能显著增加HUVECs细胞的增殖、划痕修复,transwell迁移、黏附、侵袭及管腔形成的能力(P<0.01);与VEGF组比较,防己黄芪汤(0.25,0.5,1 g·L^(-1))作用24 h对VEGF诱导的HUVECs增殖活性没有明显影响,作用24 h内能明显降低VEGF诱导升高的HUVECs划痕修复,transwell迁移、黏附、侵袭及管腔形成的能力(P<0.05)。与空白组比较,VEGF能显著诱导p-JAK1在HUVECs中的异常升高(P<0.01),防己黄芪汤(0.25,0.5,1 g·L^(-1))能明显降低p-JAK1的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论:防己黄芪汤能够降低VEGF诱导的HUVECs划痕修复,transwell迁移、黏附、侵袭及管腔形成的能力,而其机制可能与JAK1相关。 展开更多
关键词 防己黄芪汤 人脐静脉内皮细胞 迁移 侵袭 黏附 管腔形成
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防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎及血管新生的影响 被引量：15
5
作者 何莲花 栾慧杰 +7 位作者 单宏颖 杨波 何娟 虎义平 戴嘉婧 万汇娟 方崇州 王庆文 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期16-23,共8页
目的:观察防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)及血管新生的影响。方法:将DBA/1小鼠按体质量随机分为正常组,CIA组及防己黄芪汤组(5.4 g·kg^(-1))。CIA组及防己黄芪汤组第1天以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于... 目的:观察防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)及血管新生的影响。方法:将DBA/1小鼠按体质量随机分为正常组,CIA组及防己黄芪汤组(5.4 g·kg^(-1))。CIA组及防己黄芪汤组第1天以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠建立CIA模型,并于二次免疫当天开始灌胃给药,每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,进行组织苏木素-伊红(HE)染色观察CIA小鼠关节滑膜中血管新生情况;免疫组化检测CIA小鼠关节滑膜中血管内皮细胞标志物血小板内皮细胞黏附分子-1(CD31)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况;免疫荧光双染检测CIA小鼠关节滑膜中成熟血管和不成熟血管的情况。同时,提取大鼠胸主动脉环,采用VEGF(20μg·L^(-1))诱导大鼠胸主动脉环微血管的生长,加入不同浓度防己黄芪汤(0.25,0.5,1 g·L^(-1))作用后,显微镜下观察防己黄芪汤对VEGF诱导的大鼠胸主动脉环微血管生长情况并进行拍照统计。结果:与正常组比较,CIA组小鼠炎症关节红、肿及畸形明显,临床关节炎评分、发病率、关节滑膜炎症、血管新生情况显著升高,关节滑膜中的血管密度,CD31和VEGF的阳性表达量、不成熟血管的数量均显著升高(P<0.01);与CIA组比较,防己黄芪汤组小鼠炎症关节的红、肿及畸形明显改善,临床关节炎评分、发病率、关节滑膜炎症、血管新生情况显著降低,关节滑膜中的血管密度,CD31和VEGF的阳性表达量、不成熟血管的数量均显著下降(P<0.01)。与正常组比较,VEGF能显著诱导大鼠胸主动脉环微血管的生长(P<0.01);与VEGF组比较,防己黄芪汤(0.25,0.5,1 g·L^(-1))可显著抑制大鼠胸主动脉环微血管的生成(P<0.01)。结论:防己黄芪汤可有效缓解CIA小鼠的临床症状,降低临床关节炎评分及发病率,同时具有抑� 展开更多
关键词 防己黄芪汤 DBA/1小鼠 胶原诱导型关节炎 大鼠胸主动脉环 血管新生
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积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞表达的影响 被引量：9
6
作者 栾慧杰 何莲花 +3 位作者 何娟 单宏颖 虎义平 王庆文 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期76-83,共8页
目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响。方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg^(-1)),积雪草苷低、中、高剂... 目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响。方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg^(-1)),积雪草苷低、中、高剂量(5,15,45 mg·kg^(-1))组。除正常组外,其余组小鼠均构建CIA模型,分别于第1天给予牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂进行一次免疫,第21天给予牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂进行二次免疫,并在二次免疫当天开始给药,MTX腹腔注射方式给药,积雪草苷灌胃方式给药,每天1次,共给药28 d。第49天小鼠取材后,小鼠关节组织进行苏木素-伊红(HE)染色观察病理改变;免疫组化检测Th17细胞标志物IL-17和Treg细胞标志物叉头样转录因子3(FoxP3)的表达情况;免疫荧光双染法检测小鼠关节组织CD4+T细胞中IL-17和FoxP3的表达情况;流式细胞术检测小鼠淋巴结中Th17和Treg细胞比例。结果:与正常组比较,CIA组小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重(P<0.01);小鼠关节组织CD4及IL-17阳性染色明显增多,且积分吸光度IA值显著升高(P<0.01),FoxP3阳性染色减少且IA值显著降低(P<0.01),Th17/Treg值显著升高(P<0.01);小鼠淋巴结中Th17细胞表达比例明显增高(P<0.01),Treg细胞的表达比例显著减少(P<0.01);与CIA组比较,MTX组和积雪草苷各剂量组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;MTX组和积雪草苷中、高剂量组小鼠关节组织中CD4阳性染色减少且IA值明显降低(P<0.05);MTX组和积雪草苷各剂量组IL-17阳性染色明显减少且IA值明显降低(P<0.05,P<0.01);积雪草苷中、高剂量组FoxP3阳性表达明显增加且IA值明显升高(P<0.05,P<0.01);MTX组和积雪草苷中、高剂量组Th17/Treg值明显降低(P<0.05,P<0.01);小鼠淋巴结组织中,积雪草苷各剂量组Th17细胞表达比例明显降低(P<0.05,P<0.01),Treg细胞的表达比例� 展开更多
关键词 积雪草苷 胶原诱导型关节炎 DBA/1小鼠 辅助性T细胞17 调节性T细胞
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