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一种改良的植物基因组DNA通用提取方法 被引量：16
1
作者 陈林杨 宋敏舒 +1 位作者 查红光 李志敏 《植物分类与资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期375-380,共6页
高质量的基因组DNA是分子生物学研究的基础,而从富含糖类和次生代谢物且异质性强的植物材料中分离DNA相对困难。本方法在CTAB法和商业DNA提取试剂盒的基础上,在裂解细胞之前,对植物材料进行预处理,去除干扰DNA提取的代谢物,并在后续步... 高质量的基因组DNA是分子生物学研究的基础,而从富含糖类和次生代谢物且异质性强的植物材料中分离DNA相对困难。本方法在CTAB法和商业DNA提取试剂盒的基础上,在裂解细胞之前,对植物材料进行预处理,去除干扰DNA提取的代谢物,并在后续步骤中进行了一些优化。该方法适于多种不同的植物种类,所提取的基因组DNA质量较好,能满足下一步基因操作的要求,是一种通用的植物基因组DNA提取方法。 展开更多
关键词 植物基因组DNA 通用DNA提取方法 植物材料
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Sepharose 4B一步法对金环蛇蛇毒磷脂酶A_2的分离纯化 被引量：2
2
作者 查红光 张云 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期433-436,共4页
利用经酸处理的Sepharose 4B为层析介质 ,以含 0 2mol/L半乳糖 ,pH7 4台氏液作为洗脱液 ,从广西产金环蛇 (Bungarusfasciatus)蛇毒中一步分离得到一种磷脂酶A2 。用SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为 14kDa。N端部分序列测定表明 ... 利用经酸处理的Sepharose 4B为层析介质 ,以含 0 2mol/L半乳糖 ,pH7 4台氏液作为洗脱液 ,从广西产金环蛇 (Bungarusfasciatus)蛇毒中一步分离得到一种磷脂酶A2 。用SDS -聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为 14kDa。N端部分序列测定表明 ,所分离得到的磷脂酶A2 其N端 16个氨基酸残基序列与已报道的金环蛇蛇毒磷脂酶A2 同功酶Ⅵ (Lu&Lo ,1978)一致。该酶糖含量较高 ,为 13 4% ;具有弱的磷脂酶A2 活性 ,无毒 ,也无溶血和出血毒活性。 展开更多
关键词 金环蛇 磷脂酶A2 SEPHAROSE 4B一步法 分离 纯化 蛇毒
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景天三七与轮叶景天同工酶的研究 被引量：3
3
作者 丁毅 钱万英 +1 位作者 刘鋆 查红光 《安徽农业技术师范学院学报》 2000年第3期30-32,共3页
采用薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳方法 ,分别测定了景天三七和轮叶景天不同营养器官的同工酶谱 ,并根据电泳后所显示的酶带数计算出品种间的相似性系数 ,分析同为景天科的两种植物存在的差异及原因。结果表明
关键词 景天三七 轮叶景天 同工酶 遗传相似性系数
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两个金环蛇蛇毒磷脂酶A_2基因的克隆与序列报道
4
作者 查红光 张云 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期392-396,共5页
从广西产金环蛇 (Bungarusfasciatus)毒腺中抽提总RNA ,经mRNA纯化后构建了金环蛇毒腺cDNA文库。根据已发表的眼镜蛇科蛇毒磷脂酶A2 基因序列中的保守区设计探针筛选克隆 ,得到 2个磷脂酶A2 基因。测定两者序列 ,其cDNA的阅读框均为 4 3... 从广西产金环蛇 (Bungarusfasciatus)毒腺中抽提总RNA ,经mRNA纯化后构建了金环蛇毒腺cDNA文库。根据已发表的眼镜蛇科蛇毒磷脂酶A2 基因序列中的保守区设计探针筛选克隆 ,得到 2个磷脂酶A2 基因。测定两者序列 ,其cDNA的阅读框均为 4 3 5bp ,编码 14 5个氨基酸的磷脂酶A2 前体 ,其中包括 2 7个氨基酸组成的信号肽 ,118个氨基酸组成的成熟蛋白质 ;两者均属于第一类磷脂酶A2 ,其等电点经计算机软件推算分别为 7 96和7 95。根据序列比较分析 ,这 2个磷脂酶A2 基因所编码的蛋白质序列结构均区别于已报道的金环蛇蛇毒磷脂酶A2 ,是 2个新的金环蛇蛇毒磷脂酶A2 ,分别命名为金环蛇蛇毒磷脂酶A2 Ⅰ (Bf PLA2 Ⅰ )和金环蛇磷脂酶A2 Ⅱ (Bf PLA2 Ⅱ )。 展开更多
关键词 金环蛇 磷脂酶A2 CDNA 序列分析 基因克隆
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一种气相色谱质谱联用仪测定土壤中灭多威肟的分析方法
5
作者 黄贵凤 王继忠 +2 位作者 张家宝 张席席 查红光 《农业科学》 2022年第4期237-245,共9页
采用加压流体萃取-C18柱净化–气相色谱质谱联用仪测器对土壤中灭多威肟进行分析,对加压流体萃取、净化条件和浓缩条件进行优化。确定最优条件为:萃取溶剂为二氯甲烷–丙酮混合溶剂(1+1)、加压流体萃取温度为70℃,压力为12 Mpa、选择了... 采用加压流体萃取-C18柱净化–气相色谱质谱联用仪测器对土壤中灭多威肟进行分析,对加压流体萃取、净化条件和浓缩条件进行优化。确定最优条件为:萃取溶剂为二氯甲烷–丙酮混合溶剂(1+1)、加压流体萃取温度为70℃,压力为12 Mpa、选择了C18柱作为净化柱,8 mL二氯甲烷–丙酮混合溶剂(1+1)洗脱,20℃减压旋蒸作为收集液的浓缩方式。在最优条件下,土壤样品灭多威肟低、高浓度加标回收效率分别为79.4%~83.7%、90.5%~91.5%,相对标准偏差为0.7%~3.1%,方法检出限为1.17 &#181;g/kg。 展开更多
关键词 加压流体萃取 气相色谱质谱联用 土壤 灭多威肟
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