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裸体方格星虫染色体组型分析 被引量：5
1
作者 王庆恒 杜宇宏 +2 位作者 林斯里 杜晓东 邓岳文 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期95-98,共4页
将裸体方格星虫（Sipunculus nudus）置于0.04%秋水仙素溶液中暂养12h,取其体腔液,用盐度6.50‰的过滤海水低渗45min,1500r/min离心8min,卡诺氏液固定1h,热滴片,5%Giemsa染色,显微观察、摄影,根据Levan等的分类标准进行染色体组型分析... 将裸体方格星虫（Sipunculus nudus）置于0.04%秋水仙素溶液中暂养12h,取其体腔液,用盐度6.50‰的过滤海水低渗45min,1500r/min离心8min,卡诺氏液固定1h,热滴片,5%Giemsa染色,显微观察、摄影,根据Levan等的分类标准进行染色体组型分析。结果表明,裸体方格星虫的染色体基数为x=17,2n=2x=34,染色体组型为2n=2x=26m＋8sm,NF=68。除第2、3、4、8对染色体为亚中部着丝粒染色体（sm）外,其余均为中部着丝粒染色体（m）。臂比值变化范围是1.211～2.617。未发现性染色体和随体。 展开更多
关键词 裸体方格星虫 染色体 组型分析
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平榛主要过敏原一个片段区基因的克隆表达及免疫鉴定
2
作者 李娜 胡东生 +3 位作者 刘志刚 林斯里 罗新萍 黄钟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期4-6,共3页
目的:克隆表达平榛(Corh)主要过敏原Corh1的一个片段区基因,并纯化表达的蛋白及检测其免疫学活性。方法:采用生物信息学方法选取Corh1的主要抗原表位区,设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其导入pMD18-T载体... 目的:克隆表达平榛(Corh)主要过敏原Corh1的一个片段区基因,并纯化表达的蛋白及检测其免疫学活性。方法:采用生物信息学方法选取Corh1的主要抗原表位区,设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其导入pMD18-T载体中测序。将测序正确的质粒双酶切,并将获得的片段基因导入pET-32a中表达。通过Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,采用Westernblot方法检测其IgE结合活性。结果:克隆并获得了Corh1的主要表位区基因,基因开放阅读框为243个碱基,编码81个氨基酸,蛋白相对分子质量(Mr)约为9000。表达的蛋白以可溶性为主,纯化出的蛋白有较好的免疫原性。结论:成功地克隆表达了Corh1的主要表位区基因,蛋白具有良好的免疫学活性。 展开更多
关键词 平榛主要过敏原 Corh1 抗原表位 克隆表达
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多重PCR-毛细管电泳法检测Y染色体微缺失 被引量：1
3
作者 曲守方 于婷 +3 位作者 林斯里 滕乐 高尚先 黄杰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期243-248,共6页
目的:对多重PCR-毛细管电泳法检测Y染色体微缺失进行评价。方法:选择Y染色体无精子因子(AZF)区域的15个序列标签位点(STS),设计特异性的引物,分成4个不同的多重PCR体系。首先提取临床外周全血样本的基因组DNA。将样本的DNA分别加入到4... 目的:对多重PCR-毛细管电泳法检测Y染色体微缺失进行评价。方法:选择Y染色体无精子因子(AZF)区域的15个序列标签位点(STS),设计特异性的引物,分成4个不同的多重PCR体系。首先提取临床外周全血样本的基因组DNA。将样本的DNA分别加入到4个不同的PCR体系中进行扩增。将获得的目的 DNA片段进行毛细管电泳,并根据预设的AZF marker计算出各检测位点的碱基长度,然后分析临床样本的Y染色体微缺失情况。结果:该方法能够准确检测出临床样本的Y染色体AZF a区域缺失、AZF b区域缺失和AZF c区域缺失等缺失;检测限约为3 ng·反应^(-1);正常男性临床样本的检测结果是均未发生Y染色体微缺失;在210例无精子症和少精子症患者中,该方法能够准确检测出19例AZF区域微缺失,包括AZF a区域缺失1例,AZF b区域缺失2例,AZF c区域缺失13例,AZF bc区域缺失1例和AZF abc区域缺失2例。结论:多重PCR-毛细管电泳法具有很好的临床适用性,在临床上可以用于Y染色体微缺失检测,为临床遗传咨询提供建议。 展开更多
关键词 无精子因子 Y染色体微缺失 多重聚合酶链式反应 DNA检测 毛细管电泳法 辅助生殖
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